專利名稱：高質量的銀杏葉提取物及制作工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及中成藥制作工藝領域，特別適用于抑制血栓及擴張血管，保護大腦及器官移植排斥反應，減少心肌梗塞及氣管過敏，抗休克及腫瘤以及對泌尿系統有一定作用的一種高質量的銀杏葉提取物及制作工藝。
背景技術：
心血管疾病是目前人類最主要而且死亡率最高的疾病。銀杏葉制劑在治療心血管疾病上的重要作用越來越凸現出來。但目前銀杏葉制劑只能作為輔助藥劑，而且日服用量大(4-6片/日)，服用次數多，不方便，日服用價格偏高，極大的影響了該產品在臨床上應有的作用。其主要原因就是目前銀杏制劑的有效成份含量標準，采用的是1976年德國Schwabe AG制定的24/6(銀杏黃酮甙24％，內酯6％)之標準。由于該標準的有效成份含量偏低，造成了療效不顯著，服用量大，價格偏高，而且只能作為輔助藥(二線藥)使用等諸多問題，這也是美國FDA始終未將其批準為處方藥的原因。目前國際上已經有一些較高含量的產品出現，美國和加拿大有28/8含量的制劑，英國有30/10含量的制劑。
造成銀杏葉含量偏低的原因是銀杏葉中黃酮(0.45％-1.89％)和內酯(0.03％-0.37％)等有效成份含量低，提取工藝困難，限制了銀杏制劑中有效成份的絕對含量。
國內外使用最為廣泛的方法是樹脂吸附純化法，最高能得到含黃酮苷27.4％和銀杏總內酯10.6％。超臨界CO2提取法，中試裝置和實驗方法，所得的提取物中銀杏黃酮含量為28％，銀杏內酯含量為7.2％，但此方法的生產成本太高，不適宜工業化規模生產。實驗階段的方法有高速逆流色譜技術提取法，能提取高含量的純品，供檢測用。另有專利報道，可以用銀杏葉粗提物(24/6)分離得高含量黃酮、內酯，但其中的超聲波提取工藝只能限于實驗室小試，在工業規?；a上是不可實現的，而且只能從已有基礎的銀杏葉提取物粗品(24/6)開始。能從銀杏葉開始，并適合工業規?；a，產品質量能達到31-40％-11-15％的還未見報道。
國際國內的采用的離子柱法，都是一次性的將黃酮和內酯兩種成份洗脫下來，所以含量不可調整，只能是固定的24/6或28/8，而且質量波動的現象很嚴重；在國際上越來越重視指紋圖譜的今天，必需尋求一種有效的方法來解決這個問題。

發明內容
本發明的目的是提出一種新的、有效的提高銀杏葉制劑的有效成份含量，充分發揮銀杏制劑作用，且療效明確，服用方便，日服用價格低，具有極大市場競爭力的高質量銀杏葉提取物及制作工藝。
本發明的技術方案是這樣解決的。
所述的高質量銀杏葉提取物及其制作工藝，其特征在于a、銀杏葉提取物組份銀杏葉提取物的有效成份主要有黃酮甙和內酯兩大類，銀杏黃酮甙主要有槲皮素甙、山柰酚甙及異鼠李素；其內酯主要有A、B、C和白果內酯，具有二萜倍半萜結構。
銀杏葉提取物組份為31-40％黃酮甙，11-15％內酯；b、制作工藝銀杏葉以60％丙酮動態提取，減壓濃縮，水沉，離心，上柱，離子交換柱采用混合樹脂，通過混合樹脂能有效的將黃酮和內酯兩種成份分別洗脫，分別收集，再用化學方法對黃酮和內酯進行分別精制，使黃酮甙含量達到40-50％，內酯含量達到50-65％，按百分比含量將黃酮和內酯進行調配，使終產品的黃酮甙、內酯含量穩定的控制在31-40％/11-15％的質量標準上；工藝流程提取→濃縮→離心→離子交換柱分離→濃縮→干燥→裝袋→成品；制作步驟銀杏干葉，丙酮，動態提取兩次，收集提取液，真空濃縮，水沉，靜置過液；上清液于每分一萬轉的高速離心機中離心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗內酯；離心液過離子交換柱，離子交換柱由大孔樹脂，與驟酰胺樹脂混裝，裝柱前兩種樹脂混合均勻，混均后用堿液處理，離心液上柱達飽和后，先用少量工藝水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫內酯，與沉淀物中萃出的粗內酯合并；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉40％50％，內酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之標準規格的銀杏干粉。
用市售銀杏葉粗提物，銀杏黃酮含量≤24％/內酯≤6％，離心液過離子交換柱，離子交換柱由大孔樹脂，與驟酰胺樹脂混裝，裝柱前兩種樹脂混合均勻，混均后用堿液處理，離心液上柱達飽和后，先用少量工藝水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫內酯，與沉淀物中萃出的粗內酯合并；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉40％～50％，內酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之標準規格的銀杏干粉。
C、溶媒在制作工藝中，提取、分離步驟中所用的溶劑可以是丙酮、甲醇、乙醇、乙酸、乙酯。
上述方案中，所述的劑量及服用方法為片劑或膠囊，片(粒)重200mg，含銀杏葉提取物(35/12)40mg，其中總黃酮甙14mg，銀杏內酯4.8mg，一天一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
藥理(1)抑制血栓，擴張血管銀杏內酯是一血小板活化因子(PAF)的強競爭性拮抗劑。銀杏內酯不僅預防該血小板因子誘導血栓形成，也加速血栓溶解。
銀杏葉黃酮能舒張血管。其槲皮素、山柰酚及異鼠李素三個化合物具有擴張血管和解除痙攣作用。此外能擴張冠脈血管增加冠脈流量。
(2)減少心肌梗塞銀杏內酯能阻止心肌衰退，抑制缺氧引起的冠狀動脈收縮，明顯地抑制心室纖維化作用和減少梗塞程度。
(3)保護大腦銀杏提取物能改善腦的代謝，保護腦免受各種形式缺血引起的低氧損害。銀杏內酯能促進穿透性大腦損傷的恢復，對大腦及血腦屏障有保護作用，并對腦代謝和神經遞質有一定影響。
(4)減少氣管過敏銀杏內酯可阻止抗原引起的支氣管收縮，對正常人的支氣管收縮有部分保護作用。銀杏內酯對各種氣道過敏具有保護作用。
(5)對泌尿系統的作用銀杏內酯能抑制PAF，內毒素及肌注甘油等引起鼠腎小球濾過速度和腎血流量的減少。
(6)抗休克作用休克是一個多因素參與的復雜病理過程，應用PAF特異性受體拮抗劑銀杏內酯可較好地逆轉多種休克狀態，提高存活率。
(7)抗腫瘤作用銀杏內酯A、B、C或單獨用銀杏內酯B可以應用于轉移癌的治療。它能提高抗癌化療劑的效果，減少不良反應，使得耐細胞毒藥物的癌細胞對化療劑更為敏感有效。
(8)保護器官移植排斥反應銀杏內酯可改善對肺的保護，有利于肺長期保存后的肺移植。銀杏內酯可應用于肺移植的供體和受體中，使遠距離肺移植成為可能藥性甘、苦、澀，平。歸心、肺經。
本發明充分發揮銀杏制劑的作用，創造一套特殊工藝，工藝的最大特點是將黃酮甙和內酯分別洗脫，分別精制，按產品所需百分比要求進行調配，達到產品質量高，且穩定的結果。在中藥制劑向國際化邁進的今天，通過調配方式滿足恒定的指紋圖譜，是尤為重要的工藝。
本發明把銀杏葉制劑的有效成份含量從24/6(銀杏黃酮甙24％，內酯6％)提高到35/12(銀杏黃酮甙35％，內酯12％)的國際領先水平。高質量銀杏葉制劑顯著地提高了銀杏產品的療效，根據英國Morris公司的臨床顯示，一天只需一片(粒)。療效提高了，服用方便了，患者日服一片的價格也大大低于24/6的4-6片(粒)，在臨床使用上有一個質的飛躍。從而能使我國的銀杏葉相關產業擺脫低水平重復、產品不穩定等因素造成的落后局面，使之有能力參與國際大市場競爭。本發明具有一箭雙雕的作用，既能配出高質量銀杏葉提取物，又能有效地控制質量波動問題，并通過多批次產品的共同調配，完全滿足指紋圖譜的需要，徹底擺脫中成藥質量不穩定的局面，使中藥在國際上樹立起不敗的地位。
具體實施例方式
，下面通過實施例進一步描述本發明，本發明不限于所述實施例。
施實例1(1)制作600公斤銀杏干葉，3噸80％甲醇，動態提取兩次，收集提取液，真空濃縮，水沉，靜置過液；上清液于每分一萬轉的高速離心機中離心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗內酯；離心液過離子交換柱(離子交換柱由50％的大孔樹脂HPD-600，與50％的驟酰胺樹脂混裝)，離心液上柱達飽和后，先用少量工藝水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫，洗脫液濃縮后與沉淀物中萃出的粗內酯合并，蒸餾水洗液的后部份棄之；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；洗脫下來的粗黃酮甙干粉含量在25％左右，粗內酯干粉含量在35％左右。粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉30％～42％，內酯干粉45％～55％。按32％/11％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，如調配(2)，充分混均，配成32％/11％之標準規格的銀杏干粉。調配例見(2)。
(2)調配按100公斤銀杏提取物干粉中含純黃酮甙32公斤、純內酯11公斤計，需40％的銀杏黃酮粉32％÷40％＝80公斤需55％的內酯粉11％÷55％＝20公斤80公斤40％的黃酮粉加20公斤55％的內酯粉進行總混，成為100公斤含銀杏黃酮甙32％和內酯11％的高規格銀杏產品中間體。加輔料制成片(粒)重為200克，含銀杏葉提取物40.00mg，其中含總黃酮甙元12.80mg，銀杏總內酯4.40mg的制劑。
(3)組份上述工藝制成的產品組份為32％黃酮，11％內酯。
(4)劑量32/11的高質量銀杏葉片，劑量為銀杏葉提取物40.00mg，其中總黃酮甙元12.80mg，銀杏總內酯4.40mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
施實例2(35/12)(1)制作600公斤銀杏干葉，3噸60％丙酮，動態提取兩次，收集提取液，真空濃縮，水沉，靜置過液；上清液于每分一萬轉的高速離心機中離心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗內酯；離心液過離子交換柱(離子交換柱由50％的大孔樹脂HPD-600，與50％的驟酰胺樹脂混裝，裝柱前一定要注意兩種樹脂混合均勻，混均后用PH8的堿液處理)，離心液上柱達飽和后，先用少量水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫內酯，與沉淀物中萃出的粗內酯合并；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；洗脫下來的粗黃酮甙干粉含量在32％左右，粗內酯干粉含量在40％左右。粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉40％～50％，內酯干粉50％～65％。按35％/12％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成35％/12％之標準規格的銀杏干粉。調配例見(2)。
(2)調配按100公斤銀杏提取物干粉中含純黃酮甙35公斤、純內酯12公斤計，需45％的銀杏黃酮粉35％÷45％＝78公斤需55％的內酯粉12％÷55％＝22公斤78公斤45％的黃酮粉加22公斤55％的內酯粉進行總混，成為100公斤含銀杏黃酮甙35％和內酯12％的高規格銀杏產品中間體。加輔料制成片(粒)重為200克，含銀杏葉提取物40.00mg，其中含總黃酮甙元14mg，銀杏總內酯4.8mg的制劑。
(3)組份上述工藝制成的產品組份為35％黃酮，12％內酯。
(4)劑量35/12的高質量銀杏葉片，劑量為銀杏葉提取物40.00mg，其中總黃酮甙元14.00mg，銀杏總內酯4.80mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
施實例3(39/14)(1)制作市售銀杏葉粗提物(銀杏黃酮含量≤24％/內酯≤6％)25公斤，500公斤80％甲醇，加溫60℃，攪拌至全溶，室溫靜置4小時；上清液于離心機中離心；離心液過離子交換柱 (離子交換柱由50％的大孔樹脂HPD-600，與50％的驟酰胺樹脂混裝)，離心液上柱達飽和后，先用少量水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫、收集內酯；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；洗脫下來的粗黃酮甙干粉含量在38％左右，粗內酯干粉含量在48％左右。粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉45％～55％，內酯干粉55％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，將＞45％的黃酮甙干粉和＞55％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成39％/14％之標準規格的銀杏干粉。調配例見(2)。
(2)調配按100公斤銀杏提取物干粉中含純黃酮甙39公斤、純內酯14公斤計，
需50％的銀杏黃酮粉39％÷50％＝78公斤需65％的內酯粉14％÷65％＝22公斤78公斤50％的黃酮粉加22公斤65％的內酯粉進行總混，成為100公斤含銀杏黃酮甙39％和內酯14％的高規格銀杏產品中間體。加輔料制成片(粒)重為200克，含銀杏葉提取物40.00mg，其中含總黃酮甙元15.60mg，銀杏總內酯5.60mg的制劑。
(3)組份上述工藝制成的產品組份為39％黃酮，14％內酯。
(4)劑量39/14的高質量銀杏葉片，劑量為銀杏葉提取物40.00mg，其中總黃酮甙元15.60mg，銀杏總內酯5.60mg。
(5)服用方法一天服用一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
權利要求
1.一種活血化瘀，通脈舒絡的高質量銀杏葉提取物及制作工藝，其特征在于a、銀杏葉提取物組份銀杏葉提取物的有效成份主要有黃酮甙和內酯兩大類，銀杏黃酮甙主要有槲皮素甙、山柰酚甙及異鼠李素；其內酯主要有A、B、C和白果內酯，具有二萜倍半萜結構。銀杏葉提取物組份為31-40％黃酮甙，11-15％內酯；b、制作工藝銀杏葉以60％丙酮動態提取，減壓濃縮，水沉，離心，上柱，離子交換柱采用混合樹脂，通過混合樹脂能有效的將黃酮和內酯兩種成份分別洗脫，分別收集，再用化學方法對黃酮和內酯進行分別精制，使黃酮甙含量達到40-50％，內酯含量達到50-65％，按百分比含量將黃酮和內酯進行調配，使終產品的黃酮甙、內酯含量穩定的控制在31-40％/11-15％的質量標準上；工藝流程提取→濃縮→離心→離子交換柱分離→濃縮→干燥→裝袋→成品；制作步驟銀杏干葉，丙酮，動態提取兩次，收集提取液，真空濃縮，水沉，靜置過液；上清液于每分一萬轉的高速離心機中離心；水沉物用乙酸乙酯萃取，收集粗內酯；離心液過離子交換柱，離子交換柱由大孔樹脂，與驟酰胺樹脂混裝，裝柱前兩種樹脂充分混合均勻，混均后用堿液處理，離心液上柱達飽和后，先用少量工藝水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫內酯，與沉淀物中萃出的粗內酯合并；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉40％～50％，內酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之標準規格的銀杏干粉。用市售銀杏葉粗提物，銀杏黃酮含量≤24％/內酯≤6％，用有機溶劑溶解，離心液過離子交換柱，離子交換柱由大孔樹脂，與驟酰胺樹脂混裝，裝柱前兩種樹脂混合均勻，混均后用堿液處理，離心液上柱達飽和后，先用少量工藝水洗去部份雜質，再用乙酸乙酯洗脫內酯，與沉淀物中萃出的粗內酯合并；然后用丙酮洗脫黃酮甙；將洗脫液干燥，待處理；粗黃酮甙和粗內酯分別再用有機溶劑各精制一次，得黃酮甙干粉40％～50％，內酯干粉50％～65％。按31-40％/11-15％的百分比要求，將＞40％的黃酮甙干粉和＞50％的內酯干粉各按百分比要求加入適當的量，充分混均，配成31-40％/11-15％之標準規格的銀杏干粉。C、溶媒在制作工藝中，提取、分離步驟中所用的溶劑可以是丙酮、甲醇、乙醇、乙酸、乙酯。
2.根據權利要求1所述的高含量銀杏提取物及制作工藝，其特征在于劑量及服用方法為片劑或膠囊，片(粒)重200mg，含銀杏葉提取物(35/12)40mg，其中總黃酮甙14mg，銀杏內酯4.8mg，一天一次，一次一片(粒)，即一天一片(粒)。
全文摘要
一種活血化淤，通脈舒絡的高質量銀杏葉提取物及制作工藝，a.銀杏葉提取物組份，銀杏葉提取物組份為31－40％黃酮甙，11－15％內酯；b.制作工藝，銀杏葉以60％丙酮動態提取，減壓濃縮，水沉，離心，上柱，離子交換柱采用混合樹脂，通過混合樹脂能有效的將黃酮的內酯兩種成分分別洗脫，分別收集，再用化學方法對黃酮和內酯進行分別精制，使黃酮甙含量達到40－50％，內酯含量達到50－65％，按百分比含量將黃酮和內進行調配，使終產品的黃酮甙、內酯含量穩定的控制在31－40％/1 1－15％的質量標準上；工藝流程提取→濃縮→離心→離子交換柱分離→濃縮→干燥→裝袋→成品；c.溶媒。其療效提高，降低了成本，使用方便，為患者提供了福音。
文檔編號A61P7/00GK1602920SQ20041004035
公開日2005年4月6日 申請日期2004年8月3日 優先權日2004年8月3日
發明者石雁羽 申請人:石雁羽