專利名稱：：藥物組合物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及中藥
技術領域：
，具體涉及一種藥物組合物，即包括丹參丹酚酸A和人參皂苷組合的藥物組合物。本申請人參皂苷主要包括人參皂苷Rg"Rg3、Rb"Re、Rd等中的一種或幾種；人參皂苷的含量以人參皂苷Rgt、Rg3、Rb。Re、Rd等中的一種或幾種計。
背景技術：
：丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.根及根莖，性微寒，味苦，具有祛瘀止痛，活血通經，清心除煩作用，用于月經不調、經閉痛經、癥瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、瘡瘍腫痛、肝脾腫大、心絞痛等癥，是中藥活血化瘀的常用藥味；研究表明丹參中主要活性成分是丹參丹酚酸A(杜冠華基礎醫學與臨床，2000，20(5):10~14、胡義揚中藥藥理學報，1997，18(5):478-480)，但因為現有技術的缺陷，無法得到批量級的丹酚酸A，主要是因為丹參丹酚酸A在丹參中含量很低，只有萬分之五左右，即使通過一系列的工藝將其提取出，只能得到微量級的丹酚酸A，因此，無法將丹參丹酚酸A與其它中藥組分有效部位或有效成分進行量效關系研究，雖然已經有丹參與人參進行配伍的研究，但主要研究的重點還是在丹參丹酚酸B與人參皂苷的配伍配比，這種研究具有一定的效果，但沒有將中藥中最有效成分進行研究，無法達到優效的效果；并且，這種組合沒有根據中醫理論進行配伍研究，丹參丹酚酸A在活血化瘀的同時，特別是長期應用易導致人體出血的現象，在臨床給藥中要密切關注病人的狀況，以調整給藥方案，因此，在祛瘀的同時，應注意氣分的調理，使之營衛調和，采用人參皂苷配伍丹參丹酚酸A治療疾病，可以起到破血的同時去瘀生新，增強患者體質，扶助正氣，達到活血而不亂血、益氣而不助邪之目的；因此，將丹參丹酚酸A與人參皂苷進行配伍配比研究一直是醫藥科研工作者希望解決的難點之一。中國專利"200310100813.x""—種治療心腦血管疾病的藥物組合物"、中國專利"200410058101.0""—種用于治療心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法"、中國專利"200410089522.x""—種治療心腦血管疾病的人參和丹參的復方制劑"、中國專利"200510021321.0""雙參酚苷注射劑及其制備方法和用途"、中國專利"200610046081.4""治療心腦血管疾病的中藥復方組合物"都是將丹參丹酚酸B與人參總皂苷進行組合，在一定程度上具有一些療效，但沒有將丹參中活性最好的有效成分進行配伍研究，造成了中藥資源的浪費。査閱文獻和專利，未有丹參丹酚酸A與人參皂苷配伍的報道。
發明內容基于上述原因，我們將得到的批量級的丹參丹酚酸A與人參組分有效部位或有效成分人參皂苷進行配伍，通過藥效篩選、量效關系研究、劑量優選與配伍研究、系統藥效、安全性評價等實驗確定了丹參丹酚酸A與人參皂苷配伍的藥物組合物，通過系統的研究對配伍的有效成分重量份進行確定，研究中我們意外的發現一定量的丹參丹酚酸A與人參皂苷除了具有相加的作用外還具有協同作用，降低了臨床聯合用藥的不良反應，達到了l+l大于2即增加療效，降低不良反應的效果。現有技術中雖然已經有丹參總酚酸與人參皂苷的配伍配比的研究，但這還停留在中藥有效部位進行組合的研究，雖然比傳統中藥前進了一步，但還不是真正意義的現代中藥，而現代中藥的研究應該以活性最好的有效成分為基礎，進行單方或復方復配研究，在傳統中藥有效的基礎上，達到更好的效果安全、優效；同時，丹參丹酚酸A雖然也屬于丹參總酚酸中的一種，其物理、化學性質與丹參總酚酸還是具有一定的區別，因此，將丹參丹酚酸A與人參皂苷進行配伍配比研究十分必要。本申請通過下述方案實現的。藥物組合物，包括丹參丹酚酸A1—10重量份，人參皂苷1一30重量份；藥物組合物，其中優選為T—丹參丹酚酸A1—5重量份，人參皂苷15—30重量份；藥物組合物，其中優選為丹參丹酚酸A6—10重量份，人參皂苷1一14重量份；上述藥物組合物還可以加入黃芪皂苷、山楂總黃酮、川芎嗪、銀杏黃酮、銀杏內酯、丹皮酚、紅花黃色素中的一種或幾種。其中人參皂苷含量以大于等于50%且小于100X;(以人參皂苷R^、R^、Re、Rd等中的一種或幾種計)其中丹參丹酚酸A的含量大于等于50%且小于100%;上述藥物組合物制備成片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑；上述藥物組合物含有丹參丹酚酸A和人參皂苷外，還含有藥劑學常規要求的藥用輔料；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為20mg—4000mg;其中優選單位劑量為50—2000mg;單位劑量低于20mg在臨床使用中沒有效果，單位劑量大于4000mg在臨床使用會產生一定的毒副反應；其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為10-2000mg，其中優選單位劑量20一1000mg;單位劑量低于10mg在臨床使用中沒有效果，單位劑量大于2000mg在臨床使用會產生一定的毒副反應。上述藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝纖維化、衰老、腫瘤中的應用。上述藥物組合物還可以用于糖尿病及并發癥、高血脂等疾病，還具有利尿、提高免疫力等作用。一、制備工藝丹參丹酚酸A提取純化丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—80。C溫度、加熱l一6小時或調PH值至3.5—6.0、110一130。C溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱1一6小時；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD誦400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400或AB-8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A;或丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—8(TC溫度、加熱l一6小時或調PH值至3.5—6.0、110一130。C溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱1一6小時；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD-300、HPD誦400、HPD-400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400或AB-8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20或聚酰胺柱層析分離，先用水、20—50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用50—95%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A;或丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—80。C溫度、加熱1—6小時或調PH值至3.5—6.0、110一130"C溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱1一6小時；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400或AB-8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20或聚酰胺柱層析分離，先用水、20—50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用50—95%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至2—5，經有機溶劑萃取，有機溶劑選自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、異丙醇中的一種，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A;人參皂苷為現有技術制備，其中人參皂苷含量以計大于等于50%且小于100%(人參皂苷含量以人參皂苷計或以Rbt計或以Re計或以Rd計或以Rg^Rb,、Re計或以Rg!、Rb"Re、Rd計或以Rgt、Rb"Re、Rd、Rb2計或以Rg!、Rg3、RbpRe、Rd、Rb2、RaJ十等等)(市售或根據文獻方法提取純化得到)。現有技術是指現有文獻和專利中公開的提取純化人參皂苷的方法。制劑制備制劑制備取丹參丹酚酸A、人參皂苷，按照藥劑學常規要求制備成片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。二、檢測分析方法1、丹參丹酚酸A檢測分析方法色譜柱Cw反相色譜柱，NUCLEODUR，250*4.6mm，ODS;色譜條件與系統適用性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速L0ml/min;柱溫35。C;檢測波長286nm;以乙腈-0.2%醋酸水溶液為流動相，按下述梯度洗脫條件進行梯度洗脫，運行90分鐘；0-15分鐘時，乙腈的比例由10%升至20%，0.2%醋酸水溶液的比例由90%降至80%;15-55分鐘時，乙腈的比例由20%升至30%，0.2%醋酸水溶液的比例由80%降至70%;55-65分鐘時，乙腈的比例由30%升至50%,0.2%醋酸水溶液的比例由70%降至50%;65-72分鐘時，乙腈的比例由50%升至80%,0.2%醋酸水溶液的比例由50%降至20%;72-77分鐘時，乙腈的比例80%，0.2%醋酸水溶液的比例20%;77-80分鐘時，乙腈的比例由80%降至10%，0.2%醋酸水溶液的比例由20%升至卯％;80-90分鐘時，保持乙腈-0.2%醋酸水溶液以10:90的比例進行洗脫；對照品溶液的配制精密稱取丹酚酸A對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；樣品溶液的配制精密稱取丹酚酸A樣品，加入甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；或精密量取或稱取制劑，進行預處理，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；測定法分別精密吸取對照品溶液和樣品溶液，注入液相色譜儀，記錄^^譜圖，采用外標法以峰面積計算，即得；2、人參皂苷檢測分析根據《中華人民共和國藥典》(2005年，一部人參皂苷的檢測分析方法或文獻記載的檢測分析方法，進行含量測定(制劑進行檢測時需要進行預處理)。實驗結果見表l、表2:表1原料藥的檢測分析組別含量丹參丹酚酸AX250,<100<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實驗結論通過上述實驗表明，本申請藥物組合具有實際意義。三、量效關系研究丹參丹酚酸A與人參皂苷同是中藥的有效成分，二者是否存在一定的量效關系，通過下述實驗，我們有了進一步的認識實驗方案一方案1:丹參丹酚酸A0.2重:量份;方案2:丹參丹酚酸A0.4重:量i^方案3:丹參丹酚酸A0.6重:量份;方案4:丹參丹酚酸A0.8重量份;方案5:丹參丹酚酸A1重量:份；方案6:丹參丹酚酸A2重量:份；實驗方法實驗方法取健康SD大鼠，體重240-260g，隨機分組空白對照組、實驗方案組。置于相同環境預飼養2天，自由飲食。預飼養結束后，進行實驗，動物稱重，20e/。烏拉坦按0.6ml/100g腹腔注射，待麻醉滿意后，仰臥固定于鼠板上，氣管插管，接呼吸機，按1012ml潮氣量，70次/分的頻率給予呼氣，持續正壓呼吸，吸呼比為i:i。根據呼吸頻率及深度調整呼吸參數。隨后接心電圖機，測正常心電圖。剪去胸前手術區毛，碘酒消毒，剪開皮膚、皮下組織、胸前肌肉及筋膜34cm，用l鉍血管鉗沿第三肋間鈍性分離肋間肌3cm長，打幵胸腔及心包膜，記錄心電圖，撐開3、4肋骨,用左手四指托住大鼠右側胸腔，助手用眼科鑷將胸腺向上推，在左心耳與肺動脈圓錐之間找到結扎標志血管左冠狀靜脈，在左心耳下方2mm處用無創小圓針帶6-0絲線穿線，進針深度為11.5mm，寬23mm，穿線后記錄心電圖，尾靜脈給藥(給藥量為12.5mg/kg)，空白對照組給予相應量的生理鹽水，給藥10min后記錄心電圖，并用一帶凹槽的小塑料管墊在結扎部位，兩端線頭在其上結扎。結扎后即刻記錄心電圖，以左室前壁呈紫紺或II導聯S-T段弓背向上抬高大于O.lmv并持續0.5h以上為結扎成功標志(S-T段無改變者淘汰)。結扎后10min再次記錄心電圖，結扎30min后剪開結扎線，實現再灌注，再灌3小時，解剖取心臟，冰生理鹽水洗去殘血，剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷凍。將心臟在冰箱中冷凍10min后，自心尖向心底平行房室溝方向將左室切成相等厚度的5片，放入1XTTC染液中，37'C染色10min，未壞死區為暗紅色，壞死區呈灰白色。數碼相機拍照。將壞死區和非壞死區分別稱重，計算壞死區占左心室重量的百分比，即梗死范圍。"梗死范圍(％)=~"壞死區心臟重量—xl00%_壞死區+非壞死區心臟重量_檢測指標分別為，心肌梗死范圍。實驗結果見表3:實驗方案二方案l:人參皂苷l重量份；方案2:人參皂苷5重量份；方案3:人參皂苷10重量份；方案4:人參皂苷15重量份；方案5:人參皂苷20重量份；方案6:人參皂苷25重量份；方案7:人參皂苷30重量份；實驗方法按照上述實驗方法進行，實驗結果見表4:表3丹參丹酚酸A不同方案實驗結果心肌梗死范圍(％)方案616.62±5.38*表4人參皂苷不同方案實驗結果心肌梗死范圍(Q/。)_方案7__17.67±5.02*_注將上述實驗方案進行灌胃給藥，實驗結果與上述實驗結果相近。實驗小結實驗方案一實驗結果表明丹參丹酚酸A由0.2重量份至0.8重量份時，與模型組比較，心臟局灶缺血面積有降低的趨勢，但無統計學差異；當丹參14模艦28.71±14.01123.90±7.03222.51±7.1132U3士6.74420.05±6.32517.26±5.92*模型組沃土一n31.26±13.90127.14±6.50226.30±6.72324.97±5.93420.18±6.20*519.92i5.79*618.20±6.40*案案案案案方方方方方案案案案案案方方方方方方丹酚酸A1重量份時，與模型組比較，心臟局灶缺血面積明顯降低，具有統計學差異。同樣，實驗方案二實驗結果表明人參皂苷在1一小于15重量份與模型組比較，心臟局灶缺血面積有降低的趨勢，但無統計學差異；當人參皂苷15重量份，與模型組比較，心臟局灶缺血面積明顯降低，具有統計學差異。通過上述實驗結果表明1重量份的丹參丹酚酸A與15重量份以上的人參皂苷的藥效基本相同，說明等量的丹參丹酚酸A比人參皂苷藥效更好，提示我們在進行配伍篩選時，當丹參丹酚酸重量份少時，需要更多重量份的人參皂苷進行補充，以達到很好的藥理作用。將上述實驗方案進行心腦血管實驗、衰老等體外實驗，同樣得到上述實驗結果。四、溶血性實驗考察實驗方案方案l:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷10重量份；方案3:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷20重量份；方案4:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷30重量份；方案5:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷35重量份；方案6:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案7:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷10重量份；方案8:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷30重量份；方案9:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷35重量份；方案10:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷20重量份；實驗方法取去纖維蛋白兔全血，加生理鹽水，搖勻，離心，傾去上清液，反復清滌至不成紅色為止，量取紅細胞，加生理鹽水稀釋成2%的混懸液，取上述不同方案藥物組，加入2。/。紅細胞混懸液2.5ml，補加生理鹽水至5ml，輕輕搖勻，置37。C恒溫水浴中，觀察3小時、4小時、6小時溶血情況，實驗結果見表5:表5各組方案溶血情況Hj3小時4小時6小時方案10_^__注+表示溶血；一表示不溶血，+—，表示部分溶血。注上述人參皂苷是人參皂苷Re進行實驗。實驗小結實驗結果表明，當人參皂苷大于30重量份時就會產生溶血現象，表明在藥物進行組合時，人參皂苷不能超過30重量份。五、配伍篩選實驗1、對狗心肌缺血保護作用實驗方案方案l:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷10重量份；方案2:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷15重量份；方案3:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷20重量份；方案4:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷30重量份；方案5:丹參丹酚酸A3重量份，人參皂苷25重量份；方案6:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷10重量份；方案7:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷15重量份；方案8:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷30重量份；++++++案案案案案案案案方案9:丹參丹酚酸A;方案10:人參皂苷；實驗方法取實驗狗，分為生理鹽水組、實驗方案組，給藥組分別在狗前肢皮下頭靜脈給藥，給藥量每次10mg/kg，生理鹽水組等容不等量，每天給藥1次，連續給藥3天，給藥第3天后用戊巴比妥鈉25mg/kg靜脈麻醉，氣管插管，接人工呼吸機加以正壓呼吸，從左側第五肋開胸，剪開心包，暴露心臟，將心包切開緣縫于胸壁，在左冠狀動脈前降支分二期結扎，并緩慢iv利多卡因8mg/kg以防結扎前可能引起的心室顫動，隨后縫合心包及胸壁。心梗后24h，狗經戊巴比妥鈉麻醉后處死，迅速取出心臟，切除大血管和脂肪組織，核對前降支結扎點的位置，稱全心重，然后切除右心室和左右心房，留下室中隔及左心房，稱得左心室重，從心尖和開始與前降支垂直方向將左心室切成2-3mm厚的肌片，浸于硝基四唑藍溶液(NBT)中染色30min，剪下缺血區心肌組織稱重，計算心肌梗塞范圍，艮P:心梗范圍=缺血區重/左心室重乂100%，結果見表6:表6不同方案組對狗心肌缺血的保護作用<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與對照組比較"PO.Ol,*P<0.05;與方案9、10比較弁P0.05。2、對大鼠腦梗塞的影響實驗方案方案l:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷5重量份；方案3:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷10重量份；方案4:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷14重量份；方案5:丹參丹酚酸A8.重量份，人參皂苷10重量份；方案6:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案7:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷14重量份；方案8:丹參丹酚酸A11重量份，人參皂苷l重量份；方案9:丹參丹酚酸A;方案10:人參皂苷；實驗方法取健康SD大鼠，體重240-260g，隨機分組模型對照組、實驗方案組，各實驗組給藥量10mg/kg，尾靜脈給藥。給藥3天后，于末次給藥l小時，取大鼠，水合氯醛300mg/kgip麻醉,頸部切口，分離并結扎右側頸總動脈，縫合肌肉皮膚后，右側位固定,在右耳和右眼外眥連線中點切開皮膚，分離顳肌，暴露顴突及顳骨，在顴突的頭端12mm處開一約3x3mm的骨窗，暴露大腦中動脈(MCA)，將MCA灼斷,縫合切口。參考Bederson法，處死動物，取右大腦半球，切成5片，置于2g/LNPT中37。C溫育15min染色，仔細挖取并稱重未被染成蘭色的白色梗塞腦組織，實驗結果見表6:表6對大鼠腦梗塞保護情況組別動物數腦梗塞組織重量只mg模型對照組10121.54±79.7方案l1071.3±4.1**#方案21067.2±3.9**#方案31063.2±4.3**弁<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注與對照組比較"PO.Ol，*P<0.05;與方案9、10比較flPO.05。3、'對大鼠靜脈血栓形成的影響實驗方案方案l:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷5重量份；方案3:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷10重量份；方案4:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷14重量份；方案5:丹參丹酚酸A9重量份，人參皂苷l重量份；方案6:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案7:丹參丹酚酸A7重量份，人參皂苷15重量份；方案8:丹參丹酚酸A11重量份，人參皂苷l重量份；方案9:丹參丹酚酸A;方案10:人參皂苷；實驗方法取健康SD大鼠，體重240-260g，隨機分組模型對照組、實驗方案組，各實驗組給藥量40mg^g，灌胃給藥。給藥7天后，于末次給藥1小時，水合氯醛(350mg/kg，ip)麻醉，開腹分離下腔靜脈，于左腎靜脈下方用粗絲線結扎下腔靜脈，縫合腹部。6h后重新開腹，在結扎處下方2cm處夾閉血管，剖開管腔，取出血栓，稱重。數據用xis表示，組間t檢驗，結果見表7。表7對大鼠靜脈血栓形成的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注與對照組比較一PO.Ol，*P<0.05;與方案9、10比較ttPO.05。4、抗肝纖維化實驗方案l:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸A9重量份，人參皂苷l重量份；方案3:丹參丹酚酸A9重量份，人參皂苷2重量份；方案4:丹參丹酚酸A8重量份，人參皂苷5重量份；方案5:丹參丹酚酸A7重量份，人參皂苷14重量份；方案6:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷22重量份；方案7:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷30重量份；方案8:丹參丹酚酸A;方案9:人參皂苷；實驗方法用40%四氯化碳復合因素致大鼠肝纖維化模型。同時給與方案組治療，方案組灌胃給藥，給藥量為40mg/kg，應用生理鹽水作為陰性對照組。試驗結束時檢測肝功能、III型前膠原(pcin)、透明質酸(HA)，分離肝組織檢測肝羥脯氨酸含量及電鏡觀察肝組織病理變化。實驗結果方案1一7組能明顯改善肝纖維化大鼠的肝功能，降低血清pClII、HA含量及使肝組織羥脯氨酸明顯下降；明顯減輕貯脂細胞增生及膠原的沉積。其它組效果不是太明顯，與陰性對照組沒有顯著性差異。5、微循環藥理實驗實驗方案方案l:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸A9-重量份，人參皂苷3重量份；方案3:丹參丹酚酸A8重量份，人參皂苷14重量份；方案4:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷l重量份；方案5:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷20重量份；方案6:丹參丹酚酸A3重量份，人參皂苷30重量份；方案7:丹參丹酚酸A2重量份，人參皂苷29重量份；方案8:丹參丹酚酸A;方案9:人參皂苷；實驗方法顯微電視放大系統定量觀測方案組對正常及去甲腎上腺素(NA)所致耳廓微循環障礙小鼠耳廓微循環的影響；血漿復鈣試驗測定抗凝作用，方案組尾靜脈給藥，給藥量為10mg/kg。實驗結果方案1一7組能顯著促進或改善正常及NA所致耳廓微循環障礙小鼠耳廓的微循環；亦可延長血漿復鈣時間。6、抗腫瘤實驗實驗方案方案l:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷23重量份；方案2:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷30重量份；方案3:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷39重量份；方案4:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案5:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷19重量份；方案6:丹參丹酚酸A8重量份，人參皂苷ll重量份；方案7:丹參丹酚酸A7重量份，人參皂苷3重量份；方案8:丹參丹酚酸A;方案9:人參皂苷；實驗方法以小鼠骨髓細胞微核實驗和睪丸染色體畸變實驗觀察方案組的抗突變作用，以S-180和H-22移植性腫瘤觀察方案組的抗腫瘤效果，方案組灌胃給藥，給藥量為40mg/kg。實驗結果方案l一7組對環磷酰胺誘發的小鼠骨髓細胞微核發生和絲裂霉素誘發的小鼠睪丸細胞染色體畸變均有明顯的抑制效果；對S-180和H-22小鼠移植性腫瘤生長也有明顯的抑制作用。表明方案l一7組對體細胞和生殖細胞的DNA損傷均有保護作用，對小鼠移植性腫瘤也有一定的抑瘤作用。7、抗老年性癡呆藥理實驗實驗方案方案l:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷21重量份；方案2:丹參丹酚酸A3重量份，人參皂苷25重量份；方案3:丹參丹酚酸A5重量份，人參皂苷30重量份；方案4:丹參丹酚酸A6重量份，人參皂苷19重量份；方案5:丹參丹酚酸A9重量份，人參皂苷12重量份；方案6:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷8重量份；方案7:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案8:丹參丹酚酸A;方案9:人參皂苷；實驗方法:取經跳臺法和八臂迷宮法篩選的正常大鼠采用側腦室注射P-AP25.35，制成阿爾茨海默病(AD)大鼠模型，應用跳臺法和八臂電迷宮法判斷給藥前后大鼠的空間學習和記憶能力；采用化學比色法測定腦組織中乙酰膽堿酯酶(AchE)活性，應用生理鹽水作為陰性對照組，方案組尾靜脈給藥量為10mg/kg。實驗結果與陰性對照「組大鼠相比，模型大鼠八臂電迷宮錯誤次數明顯增加(P<0.05)，跳臺學習和記憶錯誤次數明顯增加(PO.Ol)。大鼠造模前后連續靜注給藥21天后，方案l一7組大鼠上述行為學指標得到明顯改善(PO.Ol)，腦組織AchE活性降低(P〈0.01)。結果表明本申請制劑對|3-^25.35側腦室注射所致大鼠空間學習和記憶障礙有顯著的預防和治療作用,該作用與降低腦組織中AchE活性呈相關性。其它組效果不是太明顯，與模型組沒有顯著性差異。藥理實驗小結通過上述藥理實驗表明，在本申請范圍內藥物組合與對照組具有很好的藥理作用(PO.01);與丹參丹酚酸A、人參皂苷比較具有顯著性差異(P<0.05)，充分說明丹參丹酚酸A與人參皂苷組合除具有很好的相加作用外，還具有互相影響提高藥理活性的作用。六.毒理學研究實驗方案方案h丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷l重量份；方案2:丹參丹酚酸人l重量份，人參皂苷6重量份；方案3:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷ll重量份；方案4:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷25重量份；方案5:丹參丹酚酸A1重量份，人參皂苷30重量份；方案6:丹參丹酚酸A7重量份，人參皂苷3重量份；方案7:丹參丹酚酸A9重量份，人參皂苷2重量份；方案8:丹參丹酚酸A10重量份，人參皂苷l重量份；方案9:丹參丹酚酸All重量份，人參皂苷l重量份；方案10:丹參丹酚酸A;方案ll:人參皂苷；實驗方法上述不同方案的藥物組合物，進行毒理學實驗，測定小鼠尾靜脈給藥急性毒性的LD5e，實驗結果見表7:表7不同方案的LD5o值方案ll_1^1實驗結論通過量效實驗、藥效學篩選實驗、藥效學論證實驗、藥代動力學實驗、毒理學實驗，我們確定丹參丹酚酸Al—lO重量份，人參皂苷1一30重量份;優選丹參丹酚酸Al—5重量份，人參皂苷15—30重量份；優選丹參丹酚酸A6—IO重量份，人參皂苷1一14重量份。七、制備實施例實施例1丹參丹酚酸A的制備丹參用70%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.5、12(TC溫度、表壓0.10MPa壓強，加熱4小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-450值!t瓜且經、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用50%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為53.8%。或丹參用60%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、125。C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經DIOI大孔樹脂柱層析分離，先甩水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用35%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用55%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為79.7%。或丹參用65%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至5.5、130。C溫度、表壓0.17MPa壓強，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、45%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用90%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡;濃縮液調PH值至4.5，經有機溶劑乙酸丁酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量為91.2%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為70.1%;(市售)制劑制備口服制劑原料藥為丹參丹酚酸A20克，人參皂苷20克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為20mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A5克，人參皂苷5克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶；單位劑量10mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例2丹參丹酚酸A的制備丹參用70%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.5、12(TC溫度、表壓0.10MPa壓強，加熱4小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-450大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用50%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為55.1%。或丹參用60%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、125。C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經DIOI大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用35%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用55%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為80.1%。或丹參用65%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至5.5、13(TC溫度、表壓0.17MPa壓強，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、25°/。稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、45%乙醇溶液洗脫，.棄去洗脫液，再用90%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至4.5，經有機溶劑乙酸丁酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量為卯.3%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為68.9%;(市售)制劑制備口服制劑原料藥為丹參丹酚酸A200克，人參皂苷600克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為4000mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A50克，人參皂苷150克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶;單位劑量2000mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例3丹參丹酚酸A的制備丹參用85%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至9.0、8(TC溫度、加熱6小時，溶液進行過濾，濾液經HPD-400大孔樹脂柱層析分離，先用水、30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，丹參丹酚酸A含量59.3^。或丹參用水提取得到水提取液，調PH值至3.5、ll(TC溫度、表壓0.05MPa壓強，加熱6小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-400A大孔樹脂柱層析分離，先用水、30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用95%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A,丹參丹酚酸A含量89.7X或丹參用80%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至6.0、13(TC溫度、表壓0.17MPa壓強，加熱6小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-450大孔樹脂柱層析分離，先用水、30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用95%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡;濃縮液調PH值至5，經有機溶劑乙酸丙酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，丹參丹酚酸A含量99.4M。人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為99.1%;制劑制備口服制劑原料藥為丹參丹酚酸A100克，人參皂苷300克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成1000數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為2000mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A25克，人參皂苷75克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶;單位劑量1000mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例4丹參丹酚酸A的制備丹參35%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、115。C溫度、表壓0.07MPa壓強，加熱5小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-100大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用40%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為58.1%。或丹參用水提取得到水提取液，調PH值至4.5、12(TC溫度、表壓O.lOMPa壓強，加熱3.5小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-100A大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用45%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、30%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用70%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為69.7%。或丹參50%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.5、125。C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱6小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-30G大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、35%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用60%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至2.5，經有機溶劑異丙醇萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量91.2%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為55.2%;制劑制備口服制劑原料藥為丹參丹酚酸A100克，人參皂苷600克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成1000數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑.；單位劑量為700mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A25克，人參皂苷150克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶；單位劑量350mg藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例5丹參丹酚酸A的制備丹參用70%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.5、12(TC溫度、表壓0.10MPa壓強，加熱4小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-450大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用50%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為55.1%。或丹參用60%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、13(TC溫度、表壓0.17MPa壓強，加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經DIOI大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用35%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用55%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為80.1%。或丹參用65%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至5.5、115。C溫度、表壓0.08MPa壓強，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、45°/。乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用90%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡;濃縮液調PH值至4.5，經有機溶劑乙酸丁酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量為90.3%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為64.3%;制劑制備口服制劑原料藥為丹參丹酚酸A20克，人參皂苷300克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為320mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A5克，人參皂苷75克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶;單位劑量80mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例6丹參丹酚酸A的制備丹參用水提取得到水提取液，調PH值至7.5、30。C溫度、加熱1小時，溶液進行過濾，濾液經HPD-IOO大孔樹脂柱層析分離，先用水、10%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A。丹參丹酚酸A含量50.1X。或丹參用20%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至9.0、80"C溫度、加熱6小時，溶液進行過濾，濾液經HPD-100A大孔樹脂柱層析分離，先用水、30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、20%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用50%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A。丹參丹酚酸A含量61.3X;或丹參用50%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至8.0、50'C溫度、加熱4小時，溶液進行過濾，濾液經HPD-300大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用50%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、35%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用75%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至2，經有機溶劑乙酸乙酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A;丹參丹酚酸A含量90.03W;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為50.01%;制劑制備口服原料藥為丹參丹酚酸A200克，人參皂苷20克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為880mg。33注射劑原料藥丹參丹酚酸A50克，人參皂苷5克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶;單位劑量20mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例7丹參丹酚酸A的制備丹參用水提取得到水提取液，調PH值至8.5、5(TC溫度、加熱4小時，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用55%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為52.9%。或丹參用50%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至8.0、75。C溫度、加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經1400大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用60%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為84.1%。或丹參用水提取得到水提取液，調PH值至4.0、ll(TC溫度、表壓0.05MPa壓強，加熱5.5小時；溶液進行過濾，濾液經AB-8大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65°/。濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡;濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、30°/。乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用80%乙醇溶液洗脫，回收'乙醇至盡；濃縮液調PH值至3.5，經有機溶劑正丁醇萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量為94.7°%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為72.9%;制劑制備口服原料藥為丹參丹酚酸A200克，人參皂苷280克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為3840mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A50克，人參皂苷60克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶；單位劑量1100mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例8丹參丹酚酸A的制備丹參35%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、12(TC溫度、表壓O.lOMPa壓強，加熱5小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-100大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用40°/。濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為58.1%。或丹參用水提取得到水提取液，調PH值至4.5、125'C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱3.5小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-100A大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用45%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、30%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用70%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為69.7%。或丹參50%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.5、ll(TC溫度、表壓0.05MPa壓強，加熱6小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-300大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、35%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用60%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至2.5，經有機溶劑異丙醇萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量91.2%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為87.3%;制劑制備口服原料藥為丹參丹酚酸A60克，人參皂苷560克；藥用輔料；片劑制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為620mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A15克，人參皂苷75克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑iooo瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶；單位劑量90mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例9丹參丹酚酸A的制備丹參用水提取得到水提取液，調PH值至8.5、5(TC溫度、加熱4小時，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用55%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為52.9%。或丹參用50%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至8.0、75'C溫度、加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經1400大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用60%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A，含量為84.1%。或丹參用水提取得到水提取液，調PH值至4.0、125"C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱5，5小時；溶液進行過濾，濾液經AB-8大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡;濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，先用水、30%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用80%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至3.5，經有機溶劑正丁醇萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍千燥，得丹參丹酚酸A，含量為94.7%;人參皂苷為現有技術制備，其含量以計為93.8%;(文獻方法)制劑制備口服原料藥為丹參丹酚酸A160克，人參皂苷220克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成IOOO數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為380mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A40克，人參皂苷55克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑1000瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶；單位劑量190mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。實施例10丹參丹酚酸A的制備丹參用70%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇享盡，調PH值至4.5、12(TC溫度、表壓O.lOMPa壓強，加熱4小時；溶液進行過濾，濾液經HPD-450大孔樹脂柱層析分離，先用水、20%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用50%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，千燥，得到丹參丹酚酸A，含量為57.2%。或丹參用60%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至4.0、125'C溫度、表壓0.14MPa壓強，加熱2小時；溶液進行過濾，濾液經DIOI大孔樹脂柱層析分離，先用水、15%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用35%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用聚酰胺層析柱分離，先用水、25乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用55%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A,含量為823%。或丹參用65%乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至5.5、13(TC溫度、表壓0.17MPa壓強，加熱3小時；溶液進行過濾，濾液經1300-1大孔樹脂柱層析分離，先用水、25%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用65%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20層析柱分離，用水、45%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用90%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至4.5，經有機溶劑乙酸丁酯萃取，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A，含量為91.0%;人參皂昔為現有技術制備，其含量以計為69.2%;(市售)制劑制備口服原料藥為丹參丹酚酸A40克，人參皂苷60克；藥用輔料；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，分別制備成1000數量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或分別制備成10000數量的微丸劑、滴丸劑；單位劑量為50mg。注射劑原料藥丹參丹酚酸A45克，人參皂苷175克；藥用輔料；水針劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照水針劑的藥劑學常規要求制備成水針劑iooo瓶；輸液劑的制備取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照輸液劑的藥劑學常規要求制備成輸液劑1000瓶；取丹參丹酚酸A和人參皂苷，按照粉針劑的藥劑學常規要求制備成粉針劑1000瓶;單位劑量220mg;藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。注上述實施例l一10中人參皂苷是RgpRg3、Rbn、Re、Rd等中的一種或幾種。注本發明所要求保護的具體技術方案，不限于上述實施例所表達的技術方案的具體組合。權利要求1、一種藥物組合物，其特征在于藥物組合物包括丹參丹酚酸A1-10重量份，人參皂苷1-30重量份。2、根據權利要求1所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A1—5重量份，人參皂苷15—30重量份。3、根據權利要求1所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A6—10重量份，人參皂苷1一14重量份。4、據權利要求1、2或3所述的一種藥物組合物，其中人參皂苷含量大于等于50%且小于100%。5、據權利要求l、2或3所述的一種藥物組合物，其中丹參丹酚酸A的含量大于等于50%且小于100%。6、根據權利要求1、2或3所述的一種藥物組合物，其中藥物組合物制備成單位劑量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。7、據權利要求6所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為20mg—4000mg。8、據權利要求6所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為50mg—2000mg。9、據權利要求6所述的一種藥物組合物，其中水針劑、輸液劑、粉針劑的單位劑量為10mg—2000mg。10、根據權利要求6所述的一種藥物組合物，其中水針劑、輸液劑、粉針劑的單位劑量為20mg—1000mg。11、根據權利要求6所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑的原料藥包括人參皂苷，其特征在于丹參丹酚酸A的制備方法丹參丹酚酸A提取純化丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—80。C溫度、加熱1—6小時或調PH值至3.5—6.0、110一13(TC溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱1一6小對；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD誦300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400或AB畫8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A;或丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—8(TC溫度、加熱1一6小時或調PH值至3.5—6.0、110—130X:溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱1一6小時；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400或AB-8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20或聚酰胺柱層析分離，先用水、20—50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用50—95%乙醇溶液洗脫，濃縮，干燥，得到丹參丹酚酸A;或丹參用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液濃縮乙醇至盡，調PH值至7.5—9.0、30—80。C溫度、加熱1一6小時或調PH值至3.5—6.0、110一13(TC溫度、表壓0.05MPa—0.17MPa壓強，加熱l一6小時；溶液進行過濾，濾液經非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，大孔樹脂柱為HPD-IOO、HPD-100A、HPD-300、HPD畫400、HPD-400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400或AB陽8，先用水、10—30%稀乙醇洗脫，除去雜質，再用30—70%濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至盡；濃縮液用葡聚糖凝膠LH-20或聚酰胺柱層析分離，先用水、20—50%乙醇溶液洗脫，棄去洗脫液，再用50—95%乙醇溶液洗脫，回收乙醇至盡；濃縮液調PH值至2—5，經有機溶劑萃取，有機溶劑選自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、異丙醇中的一種，分離有機溶劑相，得含藥溶液，濃縮，干燥或冷凍干燥，得丹參丹酚酸A。12、根據權利要求l、2、、3、11任一項所述的一種藥物組合物，包括人參皂苷的檢測分析方法，其特征在于丹參丹酚酸A的檢測分析方法丹參丹酚酸A檢測分析方法色譜柱C^反相色譜柱，NUCLEODUR，250*4.6mm,ODS;色譜條件與系統適用性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速l.Oml/min;柱溫35'C;檢測波長286nm;理論板數按丹酚酸A計應不低于60000;以乙腈-0.2%醋酸水溶液為流動相，按下述梯度洗脫條件進行梯度洗脫，運行90分鐘；0-15分鐘時，乙腈的比例由10%升至20%，0.2%醋酸水溶液的比例由90%降至80%;15-55分鐘時，乙腈的比例由20%升至30%，6.2%醋酸水溶液的比例由80%降至70%;55-65分鐘時，乙腈的比例由30%升至50%，0.2%醋酸水溶液的比例由70%降至50%;65-72分鐘時，乙腈的比例由50%升至80%，0.2%醋酸水溶液的比例由50%降至20%;72-77分鐘時，乙腈的比例80%，0.2%醋酸水溶液的比例20%;77-80分鐘時，乙腈的比例由80%降至10%，0.2%醋酸水溶液的比例由20%升至90%;80-90分鐘時，保持乙腈-0.2%醋酸水溶液以10:90的比例進行洗脫；對照品溶液的配制精密稱取丹酚酸A對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；樣品溶液的配制精密稱取丹酚酸A樣品，加入甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度;或精密量取或稱取制劑，進行預處理，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；測定法分別精密吸取對照品溶液和樣品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，采用外標法以峰面積計算，即得。13、根據權利要求l、2、3任一項所述的一種藥物組合物在制備治療和/或預防心腦血管疾病、肝損傷、腫瘤、衰老中的應用。全文摘要本發明公開了一種藥物組合物，其特征在于通過量效關系實驗、藥效學篩選和驗證實驗、毒理學實驗確定組合為丹參丹酚酸A1-10重量份，人參皂苷1-30重量份，優選丹參丹酚酸A1-5重量份，人參皂苷15-30重量份；優選丹參丹酚酸A6-10重量份，人參皂苷1-14重量份；本申請還公開了藥物組合物及其制劑的檢測分析方法和用途；藥理實驗表明，本申請藥物組合具有很好的藥理作用。文檔編號A61K9/48GK101292987SQ20071009727公開日2008年10月29日申請日期2007年4月29日優先權日2007年4月29日發明者李志剛,林治榮,栗艷彬,渠守峰,米長江,郭小鵬,金治剛,群顧申請人:北京本草天源藥物研究院