專利名稱：一種殼寡糖復合納米微粒的制備方法
技術領域：
本發明屬于生物材料領域的一種具有殼寡糖復合納米微粒的制備方法。
背景技術：
殼寡糖是將殼聚糖經特殊的生物酶降解處理而得到的一種全新的低分子量產品， 與殼聚糖相比，殼寡糖具有溶解度高，易被生物體吸收，能夠提人體高免疫，抑制癌細胞生長，降血脂、降血壓、降血糖、調節膽固醇，預防成人疾病等功能，可應用于醫藥、功能性食品等領域。現有的研究發明中，曾有報道采用溶劑擴散法制備了單一的殼寡糖納米微粒，同時研究了 A549肺上皮細胞對殼寡糖溶液和殼寡糖納米微粒的細胞攝取情況，結果表明單純的殼寡糖納米微粒可以攜帶親水性藥物，具有較高的藥物包封率和良好的藥物緩釋作用， 并且殼寡糖的納米化可以顯著地提高A549肺上皮細胞對殼寡糖的攝取，但是所制備的殼寡糖納米粒，穩定性差，不易分散，制備過程相對復雜，殘余的分散劑不易除去，影響了其在藥物緩釋載體方面的應用。因此，合成一種分散性好、穩定性強、不添加交聯劑和分散劑的新型殼寡糖復合納米微粒，對于藥物的攜載\包裝\傳導和藥物緩釋體系的建立具有重要的意義。
發明內容
本發明的目的是提供一種殼寡糖復合納米微粒的制備方法，以彌補已有技術的不足。本發明采用殼寡糖為原料，通過聚合物凝聚法合成目標產物，即殼寡糖復合納米微粒。其具體步驟是分別將殼寡糖、羧甲基殼聚糖溶解于去離子水中，中性條件下將殼寡糖溶液滴加入羧甲基殼聚糖溶液中進行聚合物沉淀反應，控制轉速、殼寡糖濃度、羧甲基殼聚糖濃度以及殼寡糖溶液的滴加速度，待反應完畢后，超聲，最后將其分離純化，干燥得到固體產品即殼寡糖復合納米微粒。本發明具有操作方便，制備技術工藝簡便和制造成本低廉等優點。本發明對原材料有廣泛的適用性，無論是0-羧甲基殼聚糖還是N，0-羧甲基殼聚糖均可以適用于本發明， 所形成的殼寡糖復合納米微粒為規則球形。本發明的重要意義在于形成的殼寡糖納米微粒穩定性好Geta表面電位大于30mv)，中性條件下能夠穩定存在，有利于藥物包載。由于在納米微粒的制備過程中沒有使用任何交聯劑和分散劑，簡化了殼寡糖納米粒的制備過程， 降低了制備成本的同時提高了殼寡糖納米微粒的細胞相容性。在醫用材料、癌癥治療以及功能性食品等許多方面具有良好的研究和開發應用前景，因此，該發明技術具有很好的經濟開發潛力。
圖1為殼寡糖復合納米微粒的示意2為殼寡糖復合納米微粒的粒徑分布圖
具體實施例方式本發明采用殼寡糖為原料，采用聚合物凝聚法合成目標產物。具體實施方案為第一步分別將殼寡糖和羧甲基殼聚糖溶于去離子水中，殼寡糖的濃度為 0. 2% (w/v)，羧甲基殼聚糖的濃度為0.25% (w/v) 0第二步中性條件下，將殼寡糖溶液滴入羧甲基殼聚糖溶液中，添加量為羧甲基殼聚糖與殼寡糖的質量比為0.4 1 1，滴加在20分鐘內完成，室溫下攪拌，攪拌速度為300 轉/分，反應時間為6小時，90 170w功率超聲2 10分鐘，12000轉/分離心1小時，棄去上清，冷凍干燥，得到所制備的產品，即殼寡糖復合納米微粒。本發明中的殼寡糖的分子量為1500 5000Da，脫乙酰度大于90% ；所指的羧甲基殼聚糖可以是0-羧甲基殼聚糖，也可以是N，0-羧甲基殼聚糖，羧甲基取代度范圍大于 80%。所得產物的結構示意圖如圖1所示，將產物進行粒徑以及^ta電位分析，結果表明所制備的殼寡糖復合納米微粒的粒徑分布較窄，其分散系數在0. 079 0. 178(表1)，平均粒徑在90 120nm(表1、圖2)；納米體系比較穩定，Zeta電位均大于30mv (見表1)。再以具體實施例為例進一步給出本發明的制備方法。實施例1 取0. Olg分子量為1500Da的殼寡糖溶于5ml去離子水中，在攪拌條件下，滴加入 4ml0. 25% (w/v)的N，0-羧甲基殼聚糖溶液中，20分鐘內滴完，攪拌速度為300轉/分，反應6小時后，90w功率超聲2分鐘，12000轉/分離心1小時，棄去上清，冷凍干燥即得殼寡糖復合納米微粒。實施例2:取0. 02g分子量為2000Da的殼寡糖溶于5ml去離子水中，在攪拌條件下，滴加入 4ml0.5% (w/v)的N，0-羧甲基殼聚糖溶液中，20分鐘內滴完，攪拌速度為300轉/分，反應6小時后，120w功率超聲5分鐘，12000轉/分離心1小時，棄去上清，冷凍干燥即得殼寡糖復合納米微粒。實施例3:取0. 05g分子量為3500Da的殼寡糖溶于5ml去離子水中，在攪拌條件下，滴加入 4mll% (w/v)的0-羧甲基殼聚糖溶液中，20分鐘內滴完，攪拌速度為300轉/分，反應6小時后，150w功率超聲10分鐘，12000轉/分離心1小時，棄去上清，冷凍干燥即得殼寡糖復合納米微粒。實施例4:取0. 05g分子量為5000Da的殼寡糖溶于5ml去離子水中，在攪拌條件下，滴入 0.5% (w/v)的0-羧甲基殼聚糖溶液，20分鐘內滴完，攪拌速度為300轉/分，反應6小時后，170w功率超聲5分鐘，12000轉/分離心1小時，棄去上清，冷凍干燥即得殼寡糖復合納米微粒。附表說明表1為殼寡糖復合納米微粒的平均粒度以及表面電位
權利要求
1.一種殼寡糖復合納米微粒的制備方法，其特征是用聚合物凝聚法制備目標產物，即殼寡糖復合納米微粒。其具體步驟是分別將殼寡糖、羧甲基殼聚糖溶解于去離子水中，中性條件下將殼寡糖溶液滴加入羧甲基殼聚糖溶液中進行聚合物沉淀反應，控制轉速、殼寡糖濃度、羧甲基殼聚糖濃度以及殼寡糖溶液的滴加速度，待反應完畢后，超聲，得到穩定的納米體系，超速離心分離并干燥，即得到本發明的產品。
2.根據權利要求1所述的殼寡糖復合納米微粒的制備方法，其特征是所述的殼寡糖的分子量為1500 5000Da ；脫乙酰度大于90% ；殼寡糖的濃度為0. 20Z0 (w/v)。
3.根據權利要求1所述的殼寡糖復合納米微粒的制備方法，其特征是所述的羧甲基殼聚糖可以選用0-羧甲基殼聚糖或N，0-羧甲基殼聚糖，其添加量為羧甲基殼聚糖與殼寡糖的質量比為0.4 1 1。
4.根據權利要求1所述的殼寡糖復合納米微粒的制備方法，其特征是所述的超聲功率為90 170w，超聲時間為2 10分鐘。
全文摘要
本發明公開了一種高分子材料學領域的納米微粒的制備技術，即一種殼寡糖復合納米微粒的制備方法，采用殼寡糖為原料，通過聚合物凝聚法合成目標產物，分別將殼寡糖、羧甲基殼聚糖溶解于去離子水中，中性條件下將殼寡糖溶液滴加入羧甲基殼聚糖溶液中進行聚合物沉淀反應，待反應完畢后，超聲，得到穩定的納米體系，超速離心分離并干燥，即得到本發明的產品。產品的平均粒徑在90～120nm，Zeta電位為+30.2～+41.2mv。可用于醫用生物材料和藥物載體，具有良好的研究和開發應用前景。
文檔編號A61K47/36GK102516405SQ201110376529
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月16日 優先權日2011年11月16日
發明者馮超, 程曉杰, 陳西廣 申請人:中國海洋大學