專利名稱：一種用于畜禽支原體肺炎治療的納米乳組合物及其制備方法
技術領域：
本發明屬于獸藥領域，涉及一種可以用于禽慢性呼吸道病、豬喘氣病和傳染性胸膜肺炎等呼吸系統疾病治療的納米乳組合物及其制備方法。
背景技術：
呼吸道疾病是畜禽養殖過程中的常見病和多發病。特別是近些年，隨著經濟的發展，人們消費水平的提高，市場對肉、蛋、奶的需求不斷加大，傳統養殖逐漸向現代化集約化養殖轉變，畜禽養殖數量增大，規模空前。加上目前我國管理體制還未健全，抗生素的濫用對耐藥菌株進行的選擇等，致使畜禽呼吸道疾病的發病率一直居高不下，病死率也不斷上升，養殖成本也不斷增加，成為困擾養我國畜禽養殖的較為嚴重的問題。雞慢性呼吸道病是由雞毒支原體(MG)感染而引起的一種接觸性傳染病，全年各季均可發生，以寒冬和早春最為嚴重。以呼吸時發出啰音、咳嗽、流鼻涕和竇部腫脹為臨床特征,如為單純感染,一般呈隱性經過,發病較慢,病程較長,故得名慢性呼吸道病。由于本病可引起機體的生長發育，故可使雞飼養期延長，飼料報酬降低，產蛋雞群產蛋率會下降 10°/Γ45%，使養殖戶經濟大受損失。由于機體抵抗力下降,本病常合并感染其他病原(如大腸桿菌等)，致使病死率居高不下。豬氣喘病是由支原體感染而引起的一種慢性呼吸道傳染病，病豬主要表現氣喘和咳嗽，剖檢病理變化集中在胸腔，以病健結合部分界清楚，肺左右兩葉病變部呈對稱性且大都局限在尖葉、心葉和中間葉，有胰樣堅實的感覺為視病病變。本病可引起豬生長緩慢甚至停滯，飼料利用率下降，育肥期延長。目前廣大養殖戶對畜禽支原體肺炎的治療主要采用中藥散劑拌料和注射劑肌注等傳統方法上，中藥散劑拌料時很容易出現攪拌不均勻的現象，造成有的動物吃的過多，有的動物吃不到的狀況，且畜禽發病后往往食欲低下，藥效利用率會很低；注射劑有較好的治療效果，但對動物的應激性大，費時費力，由于動物的反抗，使操作起來很不方便；本發明中的蕓香油具有良好的治療呼吸系統疾病的療效，但目前人們對其的利用主要局限在原藥上，市場上以滴丸劑為主，其他劑型幾乎沒有。特別是在畜牧領域，蕓香油的利用還未起步， 其藥用價值未能在動物身上體現，藥用領域狹窄，直接影響了蕓香油的推廣利用。因此，針對上述情況，有必要以蕓香油為主要活性成分并復配其他治療藥物從而開發一種新劑型用于畜禽呼吸系統疾病的治療，用以服務于畜牧業。

發明內容
本發明針對上述問題和現有技術的缺陷，提供一種吸收率高，生物利用度好，穩定性強的用于治療禽慢性呼吸道病、豬喘氣病和傳染性胸膜肺炎等呼吸系統疾病的一種水包油型納米乳組合物，該組合物安全、無毒副作用且有顯著療效。
實現上述發明目的的技術方案是本納米乳組合物，由下列質量百分比的原料組成
蕓香油O. 1% --8. 0%牡荊油O. 1% --5. 0%紫蘇子油O. 1% --3. 0%柴胡油O. 1% --2. 0%大蒜素O. 01% O. 1%延胡索酸泰妙菌素O. 1% --4. 0%表面活性劑19. 0% 31. 0(余量為蒸餾水上述總組分為100%。在表面活性劑的選擇上，本發明選用無毒性和生物相容性好的非離子型表面活性劑。非離子型表面活性劑在溶液中比較穩定，不易受強電解質、無機鹽類的影響，也不易受酸堿的影響，并且與其他表面活性劑的相容性好，溶血作用較小。理論上，0/W型納米乳狀液的制備需要表面活性劑的HLB值介于8 18之間，考慮到制備工藝的簡單性，即納米乳的易形成性和制備出來的納米乳的穩定性，本發明選用HLB介于10 15之間的液態非離子型表面活性劑。優選使用吐溫-80。本發明以蕓香油、牡荊油、柴胡油、紫蘇子油、大蒜素和延胡索酸泰妙菌素作為組合，是因為蕓香油含胡椒酮40 50%、蒈烯-4 20%、櫳牛兒醇10%、櫳牛兒酸乙酯10%，尚有櫳牛兒醛、檸檬烯等。臨床實踐證明，蕓香油具有顯著的止咳、平喘、緩解慢性氣管炎和哮喘癥狀并具有一定的抗菌作用。市場上主要有蕓香油滴丸等劑型用來治療慢性氣管炎和哮喘病，療效明顯，其作用與其含有的胡椒酮、蒈烯-4等有很大關系；牡荊油內含β_ 丁香烯， 可以明顯提升血清中IgG含量，增強體液免疫和巨噬細胞吞噬力，抗感染效果顯著；柴胡油具有解熱、鎮痛和抗炎作用，對畜禽合并感染而引起的體溫升高，肌肉痛等炎性反應有顯著的治療作用，可以有效改善臨床癥狀和縮短病程；紫蘇子油具有降氣消痰，平喘，潤肺的功效，用于痰壅氣逆，咳嗽氣喘，與蕓香油起協同作用，起到輔助治療的作用；大蒜素具有較強的抗菌消炎作用，其分子中的氧原子與細菌生長繁殖所必需的半胱氨酸分子中的巰基相結合從而抑制了細菌的生長和繁殖，對多種球菌、桿菌、真菌、病毒等均有抑制和殺滅作用，可以預防和治療畜禽患病期間合并的其他病原菌的感染，對健康畜禽也有保健作用；延胡索酸泰妙菌素又名支原凈，對革蘭氏陽性菌(如金葡菌、鏈球菌)、支原體(雞毒支原體、豬肺炎支原體)、豬胸膜肺炎放線桿菌及豬密螺旋體等都有較強的抗菌作用，用于對雞慢性呼吸道病、豬氣喘病、傳染性胸膜肺炎等的治療。各味藥組合后起協同作用，效果增強。本發明經透射電子顯微鏡檢測，液滴直徑分布在I IOOnm之間，外觀為黃色或淡黃色的透明液體，具有很好的穩定性
I、經時穩定性
該納米乳組合物在室溫自然變化條件下儲藏后，經檢驗外觀持久澄清透明，未發現渾濁或沉淀等破乳情況，說明經時穩定性好。2、熱貯穩定性
將該納米乳組合物分裝于幾個玻璃瓶中，密封之后置于50°C恒溫箱中貯存15d，每隔5d取樣觀察。結果表明，該納米乳熱貯后檢驗外觀仍保持澄清透明的外觀，未發現渾濁或分層等破乳情況，說明熱貯穩定性良好。3、抗冷凍穩定性
將該納米乳組合物在冰箱中-10°c保存一周后。恢復至室溫。該納米乳會由固態融化為液態，經稀釋檢驗后外觀仍澄清透明，放置一周后繼續檢驗，未發現渾濁或沉淀等破乳情況，表明抗冷凍性良好。4、加速穩定性
將該納米乳組合物置于試管，密封，在15000r/min的轉速下離心20分鐘，經稀釋檢驗后外觀仍澄清透明，未發現渾濁或沉淀等破乳情況。5、光穩定性實驗
將部分該納米乳組合物裝于玻璃瓶中，密封置于日光下，室溫光照10d，于ld、3d、5d、 IOd分別取樣。經稀釋檢驗表明該納米乳液保持澄清透明，無渾濁或分層等破乳情況，表明光穩定性良好。本發明的一種用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物具有治療禽慢性呼吸道病、豬喘氣病和傳染性胸膜肺炎等呼吸系統疾病的功效。用法用量口服或飲水。每噸水稀釋本納米乳液，豬5L ;禽10L。自由飲用，連用 4 5天。本發明的一種用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物與現有技術相比，具有以下優點
1)水溶性好。可以在水中無限稀釋而不會破乳，可以作為液體添加劑使用，用于防治畜禽呼吸道疾病；
2)熱力學穩定性高。本納米乳組合物在一10°C和50°C之間儲存不分相、不沉淀，不渾池，未出現破乳情況，穩定性提聞；
3)吸收率高于市場普通劑型。該納米乳組合物乳滴粒徑在fIOOnm之間，口服后可以更好地被腸道吸收，吸收率高于滴丸劑等；
4)經腸道吸收后可以避開肝臟的首過效應，使藥物的生物利用度提高；
5)方法工藝簡單，適合規模化生產。
具體實施例方式以下通過藥物安全性試驗和藥效對比試驗來進一步闡述本發明所述藥物的有益效果。試驗例I 本發明的納米乳組合物藥物(以實施例I為例)安全性試驗
將60只一月齡的健康蛋雛雞隨機分為空白對照組和本納米乳組合物(以實施例2為例)組2組，每組30只。本納米乳組合物組每只灌胃本納米乳液I. 0ml，空白對照組每只灌胃等量生理鹽水，每日一次，連續灌胃一周。期間每日觀察雞群的活動情況和健康狀態，并做記錄；末次給藥6h后，將雞處死并剖檢，觀察各個臟器的病理變化，并做記錄。結果表明兩組雞群活動情況和健康狀態均正常，剖檢后各臟器也無異常病變，兩組之間無差異，表明該納米乳液安全性好。試驗例2本發明的納米乳組合物與其他制劑治療雞慢性呼吸道病效果對比試驗
5從自然感染雞敗毒支原體發病雞群中選取近似發病程度病雛雞60只，將其隨機分為空白對照組、強力霉素組和本納米乳組合物組三組，另選取健康同日齡同品種雛雞20只作為陰性對照組，4組雞群于相同條件下飼養，但相互之間隔離。陰性對照組和空白對照組雞群每日飲清潔自來水，強力霉素組按100mg/L的計量自由飲水，本納米乳組合物(以實施例 I為例)組按10g/L水的計量稀釋后供其自由飲用。用藥期間禁用其他同類藥物，連續治療 3天，每天觀察雞群活動狀況并記錄。 療效判斷標準
無效患雞仍表現流鼻涕，咳嗽，呼吸時有啰音，精神萎靡，兩翅下垂，不愿進食和走動， 且較治療前嚴重；
有效患雞呼吸道癥狀較治療前有所減輕，呼吸時啰音微弱，飲食逐漸恢復，精神和活動有所改善；
顯效患雞呼吸道癥狀消失，呼吸時氣流通暢，啰音消失，飲食、活動和精神基本恢復， 表現活躍；
治愈患雞飲食狀況和活動情況和健康雞無差別，癥狀完全消失；
表I本納米乳組合物與強力霉素治療雞慢性呼吸道病效果對比試驗結果
組別雛雞數量(只)治愈顯效有效無效陰性對照組20------------空白對照組2000 I 19強力霉素組2075 3 5本納米乳組合物組 20125 2 I
由表I可知空白對照組治愈率為0，顯效率為0，有效率為5%，無效率為95%，總有效為5% ;強力霉素組治愈率為35%，顯效率為25%，有效率為15%，無效率為25%，總有效率為 75% ;本納米乳組合物組治愈率為60%，顯效率為25%，有效率為10%，無效率為5%，總有效率為 95%。由結果可以看出本發明一種用于畜禽支原體肺炎治療的納米乳組合物治療雞支原體感染效果要優于強力霉素。以下通過具體實施例來進一步闡述本發明所述藥物的組成和制備方法。實施例I
蕓香油3. 0g、牡荊油I. 9g、紫蘇子油O. 8g、柴胡油I. 2g、大蒜素O. lg、延胡索酸泰妙菌素3. 0g、吐溫-80 27. 0g、蒸懼水63. 0g。上述各組分制成用于畜禽支原體肺炎治療的納米乳組合物，包括下列步驟
1)按配方準確稱取吐溫-80、蕓香油、牡荊油、紫蘇子油、柴胡油、大蒜素、延胡索酸泰妙菌素、蒸餾水的質量，備用；
2)將所述量的蕓香油、牡荊油、紫蘇子油、柴胡油、大蒜素混合攪拌均勻，作為油相；3)將所述量的表面活性劑吐溫-80加入到油相當中并攪拌均勻；
4)將所述量的延胡索酸泰妙菌素溶于所述量的蒸餾水并將其水溶液作為水相，在室溫 下迅速攪拌油相和吐溫-80混合物，攪拌的同時緩慢滴加水相，該混合物體系會出現由稀 變稠，最后又由稠變稀的一系列變化，直至體系呈透明的液體，即得本納米乳組合物。實施例2
蕓香油8. 0g、牡荊油1. 0g、紫蘇子油0. lg、柴胡油0. 2g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素2. 5g、吐溫-80 28. 0g、蒸懼水61. 05g。實施例3
蕓香油2. 0g、牡荊油5. 0g、紫蘇子油0. 2g、柴胡油0. lg、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素2. 8g、吐溫-80 26. 0g、蒸懼水63. 85g。實施例4
蕓香油4. 3g、牡荊油2. 9g、紫蘇子油3. 0g、柴胡油0. 9g、大蒜素0. 08g、延胡索酸泰 妙菌素3. 5g、吐溫-80 22. 8g、蒸餾水62. 52g。實施例5
蕓香油3. 3g、牡荊油2. 0g、紫蘇子油0. lg、柴胡油2. 0g、大蒜素0. lg、延胡索酸泰 妙菌素2. 0g、吐溫-80 30. 0g、蒸懼水60. 5g。實施例6
蕓香油4. 5g、牡荊油1. 0g、紫蘇子油1. 0g、柴胡油0. 2g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素1. 0g、吐溫-80 25. 0g、蒸餾水67. 25g。實施例7
蕓香油3. 8g、牡荊油0. 5g、紫蘇子油0. 5g、柴胡油0. 5g、大蒜素0. 06g、延胡索酸泰 妙菌素2. 0g、吐溫-80 19. 0g、蒸懼水73. 64g。實施例8
蕓香油4. 0g、牡荊油1. 0g、紫蘇子油0. 5g、柴胡油0. 3g、大蒜素0. 01g、延胡索酸泰 妙菌素4. 0g、吐溫-80 23. 0g、蒸懼水67. 19g。實施例9
蕓香油5. 0g、牡荊油2. 0g、紫蘇子油0. 5g、柴胡油0. 2g、大蒜素0. lg、延胡索酸泰 妙菌素0. lg、吐溫-80 31. 0g、蒸懼水61. lg。實施例10
蕓香油0. lg、牡荊油1. 5g、紫蘇子油1. 0g、柴胡油1. 0g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素3. 0g、吐溫-80 29. 0g、蒸懼水64. 35g。
權利要求
1.一種用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物，其特征在于，由下列質量百分比的原料組成蕓香油O. 1% 8. 0%、牡荊油O. 1% 5. 0%、紫蘇子油O. 1% 3. 0%、柴胡油O. 1% 2. 0%、 大蒜素O. 01% O. 1%、延胡索酸泰妙菌素O. 1% 4. 0%、表面活性劑19. 0% 31. 0%、余量為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100% ；所述的表面活性劑是非離子表面活性劑吐溫-80。
2.根據權利要求I所述的一種用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物，其特征在于該納米乳的粒徑在I IOOnm之間。
3.根據權利要求I所述的一種用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物制備方法，其特征在于，包括以下步驟按配方準確稱取表面活性劑、蕓香油、牡荊油、紫蘇子油、柴胡油、大蒜素、延胡索酸泰妙菌素、蒸餾水的質量，備用；將所述量的蕓香油、牡荊油、紫蘇子油、柴胡油、大蒜素混合攪拌均勻，作為油相；將所述量的表面活性劑加入到油相當中并攪拌均勻；將所述量的延胡索酸泰妙菌素溶于所述量的蒸餾水并將其水溶液作為水相，在室溫下迅速攪拌油相和表面活性劑混合物，攪拌的同時緩慢滴加水相，直至體系呈透明的液體，即得用于畜禽支原體肺炎治療的水包油型納米乳組合物。
全文摘要
本發明公開了一種用于畜禽支原體肺炎治療的納米乳組合物，由下列質量百分比的原料組成蕓香油0.1%～8.0%、牡荊油0.1%～5.0%、紫蘇子油0.1%～3.0%、柴胡油0.1%～2.0%、大蒜素0.01%～0.1%、延胡索酸泰妙菌素0.1%～4.0%、表面活性劑19.0%～31.0%、余量為蒸餾水，上述成分的質量百分比之和為100%。本納米乳具有擴張氣管、抑制咳嗽反射、提高機體免疫力、抗炎和抑殺肺炎支原體或混合感染的其他病原體的作用，可用于禽慢性呼吸道病、豬喘氣病和傳染性胸膜肺炎等呼吸系統疾病的治療和預防。本發明穩定性好，口服后腸道吸收利用率高，可避開肝首過效應，療效顯著。
文檔編號A61P11/00GK102600304SQ20121005726
公開日2012年7月25日 申請日期2012年3月7日 優先權日2012年3月7日
發明者歐陽五慶, 歐陽伸雨, 郭建軍 申請人:西北農林科技大學