專利名稱：精漿的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及精漿的用途。
背景技術：
腫瘤發生是由于細胞電子平衡失調所致。活性氧(自由基R0S)是一種缺乏電子的物質(不飽和電子物質)，進入人體后到處爭奪電子，如果奪去細胞蛋白分子的電子，使蛋白質接上支鏈發生烷基化，形成畸變的分子而致癌。該畸變分子由于自己缺少電子，又要去奪取鄰近分子的電子，又使鄰近分子也發生畸變而致癌。這樣，惡性循環就會形成大量畸變的蛋白分子。這些畸變的蛋白分子繁殖復制時，基因突變，形成大量癌細胞，最后出現癌癥癥狀。而當自由基或畸變分子搶奪了基因的電子時，人就會直接得癌癥。人體得到負離子后，由于負離子帶負電荷，有多余的電子，可提供細胞缺失的電子，從而阻斷惡性循環，癌細胞就可防止或被抑制。
專利CN200710017785.3已描述了動物精液藥材在治療腫瘤、抑郁癥等多種疾病中的藥物應用，而精液包括精漿與精子，精漿是由前列腺液、精囊液、附睪液和尿道球腺分泌的少量液體一起組成，精漿是輸送精子的必須介質，并為精子提供能量和營養物質；精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產生，精漿里含有果糖和蛋白質，是精子的營養物質，精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質，是一類天然有機物質，沒有毒副作用。
現有技術并未確定動物精液中何種物質起到抑制腫瘤等疾病的作用，直接應用動物精液制備的藥物純度也較低，因此效用較差，患者的服用劑量大；同時，在傳統的認識中，人們并沒有發現精漿的藥用價值。發明內容
本發明提供的精漿的新用途，主要用于抑制癌細胞的擴散，特別是大于3kDa的精漿蛋白，對癌細胞的擴散抑制效果非常明顯。
本發明的具體技術解決方案如下:
精漿用于抑制癌細胞的擴散，精漿用于抑制肺癌細胞、乳腺癌細胞、大腸癌細胞、宮頸癌細胞、肝癌細胞或胃癌細胞等癌細胞的擴散。
精漿為活性成分的藥物制劑。
精漿在制備治療癌癥的藥物中的應用。
精漿在制備治療肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌等癌癥的藥物中的應用。
精漿用于制備膠囊、顆粒、片劑、滴丸、中西藥復方制劑、口服液或注射液。
精漿蛋白用于抑制癌細胞的擴散，精漿蛋白用于抑制肺癌細胞、乳腺癌細胞、大腸癌細胞、宮頸癌細胞、肝癌細胞或胃癌細胞等癌細胞的擴散。
精漿蛋白為活性成分的藥 物制劑。
精漿蛋白在制備治療癌癥的藥物中的應用。
精漿蛋白在制備治療肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌等癌癥的藥物中的應用。
精漿用于制備膠囊、顆粒、片劑、滴丸、中西藥復方制劑、口服液或注射液。
上述精漿蛋白尤其是分子直徑大于3kDa，和/或濃度大于2.5 %的精漿蛋白，效果更佳。
本發明的優點在于:
本發明通過大量的實驗研究，突破現有技術應用上的局限性，獲取了精漿在治療肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌等癌癥的藥物中的應用。
同時，本發明通過實驗發現，抑制癌細胞的作用還與精漿中精漿蛋白的分子直徑以及與精漿濃度有關，精漿蛋白分子大于3kDa后抑制作用明顯，精漿濃度或精漿蛋白濃度處于2.5% 5.0 %時效果一般，5.0% 7.5%效果較佳，大于7.5% 10.0 %后抑制作用明顯。
精漿可制成可制成膠囊、顆粒、片劑、滴丸、口服液、注射液等各種制劑應用于臨床，優選為膠囊。本品也可與其他藥物制成中西藥復方制劑應用。
具體實施方式
人大細胞肺腫瘤細胞株NC1-H460分析，所用試劑如下:
RPM1-1640培養基為 Thermo公司(北京)產品；胎牛血清為Thermo公司(北京)產品；MTT為Invitrogen公司產品；其余試劑均為進口分析純；
磷酸緩沖鹽溶液(PBS)=NaCl 8g，KCl 0.2g, Na2HPO4 1.44g, KH2PO40.24g，溶于800mlddH20, HCl調節PH值至7.4，定容至1L，121°C高壓滅菌，4°C保存。
0.25%胰酶溶液:1.25g胰酶，溶解于500mlPBS，過濾除菌后4°C保存。
首先進行樣品分離:取-20°C保存于精液37°C緩慢融化后，冰浴條件下，吸取2ml樣品，4°C，3000rpm離心lOmin，精液樣品清晰分層，其中上清部分為精漿，將精漿移入另一支EP管中，標記為“上清”，沉淀部分為精子，以2mlPBS重懸，標記為“沉淀”；
同取融化后樣品，冰浴條件下，吸取4ml，加入超濾離心管中，4°C，7500rpm離心30min,吸取濾過液補足4ml，標記為“小分子”，吸取PBS將濾出部分充分混懸并補足4ml，標記為“大分子”；
其次進行目標細胞培養:復蘇NC1-H460 —支，37°C，5% CO2培養5天至細胞增殖至一定數量，0.25 %胰酶消化，1640培養基將細胞稀釋至1*105個/ml，接種至96孔板，每孔100 μ L，繼續于37°C，5% CO2培養24h至細胞穩定貼壁；
然后進行加藥及檢測:按表I所示濃度分別加入樣品，每個濃度取3個副孔，370C，5% CO2培養24h后，換液并用PBS輕柔吹吸洗去孔內殘余培養液后，每孔加入MMT溶液5 μ L，新鮮培養基100 μ Lo 37°C孵育3h，吸去培養基，每孔加入DMS0150 μ L將MTT-甲充分溶解，溶解液轉移至96孔酶標板中，每孔轉移IOOy L，490nm處讀取吸光度。
按表I所示濃度分別加入樣品上清、沉淀，大分子部分、小分子部分，每個濃度取4個副孔，37°C，5% CO2培養24h后，換液并用PBS輕柔吹吸洗去孔內殘余培養液后，每孔加入MMT溶液5 μ L，新鮮培養基100 μ L0 37°C孵育3h，吸去培養基，每孔加入DMS0150 μ L將MTT-甲充分溶解，溶解液轉移至96孔酶標板中，每孔轉移100μ L，490nm處讀取吸光度。
表1樣品濃度梯度
權利要求
1.精漿用于抑制癌細胞的擴散。
2.精漿用于抑制肺癌細胞、乳腺癌細胞、大腸癌細胞、宮頸癌細胞、肝癌細胞或胃癌細胞的擴散。
3.精漿在制備治療癌癥的藥物中的應用。
4.根據權利要求3所述的精漿，其特征在于:所述癌癥是肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌。
5.根據權利要求4所述的精漿，其特征在于:所述精漿用于制備膠囊、顆粒、片劑、滴丸、中西藥復方制劑、口服液或注射液。
6.精漿蛋白用于抑制癌細胞的擴散。
7.精漿蛋白用于抑制肺癌細胞、乳腺癌細胞、大腸癌細胞、宮頸癌細胞、肝癌細胞或胃癌細胞的擴散。
8.精衆蛋白在制備治療癌癥的藥物中的應用。
9.根據權利要求6至8任一所述的精漿蛋白，其特征在于:所述精漿蛋白大于3kDa。
10.根據權利要求9所述的精漿蛋白，其特征在于:所述精漿蛋白的濃度大于2.5%。
11.根據權利要求10所述的精漿蛋白，其特征在于:所述精漿蛋白的濃度大于5.0 %。
12.根據權利要求11所述的精漿蛋白，其特征在于:所述精漿蛋白的濃度大于7.5%。
13.根據權利要求12所述的精漿蛋白，其特征在于:所述癌癥是肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌。
14.根據權利要求13所述的精漿蛋白，其特征在于:所述精漿蛋白用于制備膠囊、顆粒、片劑、滴丸、中西藥復方制劑、口服液或注射液。
全文摘要
本發明提供的精漿的新用途，主要用于抑制癌細胞的擴散，特別是大于3kDa的精漿蛋白，對癌細胞的擴散抑制效果非常明顯。可用于抑制肺癌細胞、乳腺癌細胞、大腸癌細胞、宮頸癌細胞、肝癌細胞或胃癌細胞等癌細胞的擴散。同時，本發明提供了精漿在制備治療癌癥的藥物中的應用，包括精漿在制備治療肺癌、乳腺癌、大腸癌、宮頸癌、肝癌或胃癌等癌癥的藥物中的應用。
文檔編號A61K38/17GK103156884SQ20121013229
公開日2013年6月19日 申請日期2012年4月28日 優先權日2012年4月28日
發明者李偃, 程輝 申請人:陜西精健新星生物醫藥有限公司