專利名稱：一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子提取物、制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥材提取物，更具體的說涉及一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物、制備方法及其應用。
背景技術：
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfatty liver disease, NAFLD)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致的以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變為主要特征臨床病理綜合征，包括單純性脂肪肝以及由其演變的脂肪性肝炎(NASH)和肝硬化。近年來隨著生活水平的改善和生活方式的改變，非酒精性脂肪肝的發病率不斷升高，有資料研究顯示美國、西歐、日本普通人群NAFLD患病率為10% 24%，而肥胖癥患者NAFLD患病率則高達 57. 5% 74%。NAFLD將會是未來發病率最高的一種肝臟疾病，治療NAFLD將是今后數十年肝病科醫生面臨的挑戰。非酒精性脂肪肝目前尚無療效理想的藥物，某些治療僅僅是改善胰島素抵抗，維護機體內環境脂質代謝、能量代謝和抗氧化物的平衡，促使機體保持在適應性反應階段，延緩、阻止脂肪肝肝病的病情進展。臨床上對非酒精性脂肪肝病的防治以飲食調節、合理運動和藥物干預為主。治療非酒精性脂肪肝病的藥物主要有二甲雙胍、維生素等。二甲雙胍是胰島素增敏劑，通過改善患者的糖耐量和高胰島素血癥，降低體內血漿游離脂肪酸和血漿甘油三酯水平，但副作用明顯，對胃腸道刺激性非常大，有心、腎功能障礙的老年患者有發生乳酸中毒的危險。維生素類藥物如維生素A、E等，具有抗氧化作用，可以通過抑制過氧化自由基的形成防止肝細胞受損，但大劑量補充后易在體內蓄積產生毒性，反而加重肝臟負擔。其他許多針對高脂血癥的降血脂藥物，可促進血脂更集中于肝臟進行代謝，反而易促進脂質在肝內的蓄積，并進一步損害肝功能。所以目前還缺乏安全有效、作用肯定的治療非酒精性脂肪肝的藥物，尋找具有保肝、降血脂、抗脂肪肝作用的藥物顯得非常有必要。決明子為豆科植物決明CassiaobtusifoliaL.或小決明CassiatoraL.的干燥成熟種子，其性味甘、苦、咸、微寒，歸肝、大腸經，具有清熱明目，潤腸通便的功效，作為臨床常用中藥，是國家衛生部公布的藥食同源物質之一。現代研究表明，決明子中的主要成分為蒽醌類和多糖類化合物。蒽醌類成分目前研究有很多，發現具有抗衰老、調節免疫、降血脂、降血壓和抗氧化等作用，是決明子發揮活性的主要成分。多糖類成分近年來逐漸引起科研人員的興趣，發現其具有明顯的抗氧化和調節免疫的功效。所以，決明子中的多種成分是其良好生物活性的物質基礎。目前決明子的提取方法主要以水提和乙醇提取為主，比較兩種提取方法發現，決明子乙醇提取物中的總蒽醌含量要明顯比水提取高，而水提取的得膏率高于乙醇提取，但相應的雜質如蛋白質、無機鹽等含量也很多，從而造成相應治療效果不太理想。研究已證明決明子乙醇提取物或水提取物在治療高血脂癥的實際效果中，其降低總膽固醇和甘油三酯含量的效果并不是最佳。專利CN1739599A公開一種由決明子乙酸乙酯提取物制備的降脂保肝藥物，據專利公開的數據顯示，決明子的乙酸乙酯提取物在降脂的同時可以降低肝臟脂肪的含量，減緩或消除脂肪肝病理損害、改善肝功能。張榮等在《山西中醫》雜志上發表的《決明子乙酸乙酯提取物對非酒精性脂肪肝大鼠的防治作用》一文中指出，決明子乙酸乙酯提取物能明顯降低實驗大鼠血清、肝臟中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂肪蛋白膽固醇(LDL-C)和血清ALT，AST的含量，升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量，改善肝臟的病理損害。焦素芳等在《臨床合理用藥》中發表的《決明子的化學成分與藥理作用》一文中指出，決明子的水提取物中對于肝損傷具有良好的活性；同時，決明子水、醇提取物對于動物實驗均有一定的降壓作用。但是目前對決明子混合提取物的使用多為單一提取部位的使用。

發明內容
研究發現，決明子能抑制血清膽固醇升高和主動脈粥樣硬化斑點形成，能明顯增加血清HDL-C含量及提高HDL-C/TCM比值，改善體內膽固醇的分布狀況，決明子中的蒽醌 糖苷是降血脂的主要成分之一，它能減少腸道對膽固醇的吸收，增加排泄，通過反饋調節LDL-C代謝，降低血清膽固醇水平，延緩和抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成。決明子水提取部位中的萘并吡咯酮類成分具有良好的解毒保肝作用，決明子水提取物對巨噬細胞吞噬功能有增強作用，小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數明顯增高，并具有良好的抑菌作用；鈍葉決明素、鈍葉素、大黃酚、大黃素甲醚對15-羥基前列腺素脫氫酶有弱的抑制作用，能減緩前列腺素的代謝，使其利尿作用延長；決明子含有大量的不飽和脂肪酸，相對含量占71. 13%，其中亞油酸(41. 80%)、油酸(27. 82% )含量較高；而飽和脂肪酸以棕櫚酸(15. 33%)、硬脂酸(8. 17%)、花生酸(1.66%)為主。據報道，油酸、棕櫚酸具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗血小板聚集及血栓形成的作用。亞油酸是一種人體必須脂肪酸，為細胞膜和線粒體的組成成分，對膽固醇的代謝、輸送和排泄起調節作用。所以本發明將決明子的水提取物和乙醇提取物相組合得到一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物，并發現改提取對于糖尿病腎病具有一定的療效。一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物，由決明子藥材的水提取物與決明子藥材乙醇提取物組成。2. 一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，包括以下步驟I)將決明子藥材用乙醇提取，得到乙醇提取物；2)將步驟I)中決明子藥材殘渣用水提取，得到水提取物；3)合并乙醇提取物和水提取物，得到用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物。步驟I)所述的乙醇提取為的決明子藥材采用溫浸提取方法、回流提取方法和滲漉提取方法中的任一種方法提取。所述的乙醇提取為將決明子藥材用2-20倍藥材重量的15-99%的乙醇進行滲漉。所述的乙醇提取為將決明子藥材用8-16倍藥材重量的60-95%的乙醇進行滲漉，滲漉前浸泡24h，滲漉的流速為每千克藥材每分鐘3-7ml。步驟2)中所述水提取為將步驟I)中決明子藥材殘渣烘干揮去乙醇后，將決明子藥材殘渣采用溫浸提取方法、水煎煮提取和回流提取方法中的任一種方法提取。上述提取物及方法所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物在制備治療非酒精性脂肪肝藥物中的應用。上述提取物及方法所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物在制備治療糖尿病腎病藥物中的應用。本發明的有益技術效果是本發明將決明子中含有蒽醌類化合物、不飽和脂肪酸和萘并吡咯酮類成分的提取部位相組合得到的決明子混合提取物，治療治療非酒精性脂肪肝的效果優于使用乙酸乙酯提取的有效部位和只用乙醇提取的有效部位，同時還多糖尿病腎病具有一定的治療作用。
具體實施例方式實施例I決明子提取方法的篩選 大黃素、決明素、橙黃決明素、黃決明素、決明內酯、大黃酚-1_β龍膽二糖苷等成分，主要為蒽醌類化合物，以游離、結合狀態存在，其中結合型蒽醌為主。現代藥理結果表明決明子具明顯的降血脂作用，蒽醌糖苷是降血脂的主要成分之一。考慮蒽醌類成分遇熱不穩定，我們設計滲漉法提取進行正交試驗，以1，8_ 二羥基蒽醌為標準品，以其結合蒽醌為指標篩選最佳提取工藝。并與回流法、溫浸法比較。決明子滲漉法與回流法、溫浸法的比較按篩選出的最佳方法提取滲漉法浸泡24h、醇濃度80%、流速3ml/(min · kg)、乙醇用量8倍藥材重量。回流法浸泡O. 5h、60%酒精、回流提取3次、每次5倍量、時間2h。溫浸溫度為60°C，分別溫浸3次，每次加水量5倍.每次溫浸lh，進行蒽醌類成分含量比較，采用紫外分光光度法測定，結果見表I所示。表I決明子不同提取方法蒽醌類成分的含量(％)
提取方法_游離蒽·_結合蒽醌_總蒽醌_
滲漉法 030 Ζ~56 2^86冋流法 0.25 2.07 2.32溫浸法_OH)_L71_L81_根據表I的實驗結果采用滲漉作為提取方法，滲漉正交試驗以浸泡時間、醇濃度、流速、乙醇用量為考察因素，每因素設計三水平見表2所示。稱取粉碎后的決明子適量，分別按L9(34)正交表進行正交試驗，以浸膏率和1，8_ 二羥基結合蒽醌為考察指標，綜合評分、極差分析見表3所示，方差分析見表4所示。表2因素水平表
A浸泡時間(h) B醇濃度( ) C流速(ml/ndn . kg) D乙醇用暈(倍)
1246038
23680512
_J _48_95_ —_16_表3決明子滲漉L9 (34)正交試驗表
權利要求
1.一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物，其特征在于由決明子藥材的水提取物與決明子藥材乙醇提取物組成。
2.一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟 1)將決明子藥材用乙醇提取，得到乙醇提取物； 2)將步驟I)中決明子藥材殘渣用水提取，得到水提取物； 3)合并乙醇提取物和水提取物，得到用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物。
3.根據權利要求2所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，其特征在于步驟I)所述的乙醇提取為的決明子藥材采用溫浸提取方法、回流提取方法和滲漉提取方法中的任一種方法提取。
4.根據權利要求3所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，其特征在于所述的乙醇提取為將決明子藥材用2-20倍藥材重量的15-99%的乙醇進行滲漉。
5.根據權利要求4所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，其特征在于所述的乙醇提取為將決明子藥材用8-16倍藥材重量的60-95%的乙醇進行滲漉，滲漉前浸泡24h，滲漉的流速為每千克藥材每分鐘3-7ml。
6.根據權利要求2所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物的制備方法，其特征在于步驟2)中所述水提取為將步驟I)中決明子藥材殘渣烘干揮去乙醇后，將決明子藥材殘渣采用溫浸提取方法、水煎煮提取和回流提取方法中的任一種方法提取。
7.權利要求1-6任一所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物在制備治療非酒精性脂肪肝藥物中的應用。
8.權利要求1-6任一所述的用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物在制備治療糖尿病腎病藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供了一種用于治療非酒精性脂肪肝的決明子混合提取物，由決明子藥材的水提取物與決明子藥材乙醇提取物組成；發明將決明子中含有蒽醌類化合物、不飽和脂肪酸和萘并吡咯酮類成分的提取部位相組合得到的決明子混合提取物，治療治療非酒精性脂肪肝的效果優于使用乙酸乙酯提取的有效部位和只用乙醇提取的有效部位，同時還多糖尿病腎病具有一定的治療作用。
文檔編號A61P13/12GK102716182SQ20121018656
公開日2012年10月10日 申請日期2012年6月7日 優先權日2012年6月7日
發明者張毅, 徐宏喜, 楊大堅, 陳國慶, 陳士林, 陳新滋 申請人:重慶市中藥研究院, 香港浸會大學