一種黏膜給藥的配方及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種黏膜給藥的配方及其制備方法，該配方主要通過口腔、陰道和鼻腔黏膜等黏膜表面傳遞物質，配方中包含一個或多個具有黏膜膠粘或黏膜穿透性的蛋白或水解產物以及需要傳遞的一個或多個物質。本發明與現有技術相比，使用過程無毒無刺激，且使用方便，醫療成本和副作用明顯降低，非常適合醫藥上廣泛使用。
【專利說明】一種黏膜給藥的配方及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種黏膜給藥的配方及其制備方法，屬于生物醫藥領域。
【背景技術】
[0002]很多物質可以用于人或動物的健康的改善，這些物質包括治療性藥品和營養補充劑。通常，這些物質的給藥途徑包括肌肉注射，皮下注射和口服等。
[0003]肌肉注射或皮下注射有很多明顯的缺點，如給藥的過程需要相對專業的技能才能完成，不適合于大規模的給藥，給藥的過程本身比較昂貴，還有可能發生一些不良反應等等。然而不幸的是，許多生物活性劑還不得不通過注射途徑給藥，因為使用傳統方法口服后其功效幾乎或者完全喪失。這些不能得到有效口服的藥物包括多肽類藥物，如降鈣素，促血紅細胞生長素，釋放激素類似物，生長抑素，胰島素，干擾素等，也包括DNA和RNA及其片段
坐寸ο
[0004]蛋白質或多肽藥物口服給藥是一個非常復雜的過程，因為它們可能被存在于胃和腸道的消化酶代謝，也可能被酸性環境分解，未受保護的蛋白質或多肽口服時，在通過腸壁進入血液循環前就會被大大降解。這種影響在一定程度上可以用大劑量給藥的方式解決，然而這種做法對很多藥物活性成分來說經濟上是不可行的，而且還可能導致很多副作用。
[0005]因此，醫藥界仍然需要開發新的口服給藥的配方與方法，以方便這類物質能被人或動物有效的使用。本發明的目的就是提供一種方便的口服給藥的新配方，以及其制備方法。

【發明內容】
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[0006]為了解決上述問題，本發明的技術方案采用了黏膜給藥的方式。黏膜給藥指使用合適的載體將藥物通過人體黏膜部位如鼻黏膜、口腔黏膜、眼黏膜、直腸黏膜、子宮及陰道黏膜，進入局部或全身血液循環而起藥效的給藥方式。黏膜給藥系統相對其他的給藥方式有很多優勢。例如，通過黏膜給藥可以直接進入血液循環系統進行吸收，這在很多時候可以讓需要傳遞的生物活性物質繞過消化道以及肝臟系統的首過代謝。其次，生物活性劑如藥物直接進入血液循環系統，從而使治療劑更快速的達到所需要的目標位置，從而可以更快地引起預期的醫療或其它生物活性效果。此外，避免消化道和肝臟系統首過代謝意味著本發明可用是用較少的的藥物使用量達到傳統方法大量藥物的同樣效果，從而降低醫療成本與副作用。
[0007]本發明技術方案涉及一種黏膜給藥配方，包括水相、油相及需要傳遞的物質，其特征在于:所述配方還包括一個或多個具有黏膜膠粘或黏膜穿透性的蛋白水解物，所述蛋白水解物占整個配方的比重(重量比)為0.1% -80%。
[0008]本發明技術方案所述配方是一種乳液，需要傳遞的物質溶解在乳液的油相或水相中。所述需要傳遞的物質為生物活性物質，可包含兩種或多種成分，如藥品，維生素，營養補充劑，草藥提取物，激素或類似物與衍生物等。這些物質進入人體后可以在細胞、組織或器官層面上導致所需的身體功能改變和/或外觀的改變。
[0009]優選的，本發明配方傳遞的物質可以用來治療各種疾病，如神經疾病，呼吸系統疾病，免疫系統疾病，肌肉疾病，生殖系統紊亂，胃腸功能紊亂，肺部疾病，消化系統疾病，代謝紊亂，心血管疾病，腎臟疾病，增生性疾病，癌癥疾病及炎癥等。另一優選的，本發明傳遞的物質還可以是用途廣泛的各類藥物，包括但不限于抗菌劑，殺菌劑，抗驚厥，鎮痛藥，消炎藥，鈣拮抗劑，麻醉劑，抗瘧藥，抗寄生蟲，抗高血壓藥，抗組胺藥，退熱藥，α -腎上腺素受體激動劑，α β_腎上腺素受體阻滯劑，避孕藥，心血管藥物，鈣離子通道抑制劑，抗抑郁藥，利尿劑，酶，安眠藥，激素，降糖藥，肌肉松弛劑，糖蛋白，核蛋白，脂蛋白，鎮靜劑，類固醇，鎮靜劑，泌尿系統藥物，疫苗，陰道藥物，維生素，礦物質，非類固醇消炎藥，血管緊張素轉換酶，核苷酸，多肽，多糖，DNA和RNA及其片段與衍生物等。在某些實施案例中，本發明配方還用于傳遞保健成分，包括但不限于維生素，礦物質，激素，抗氧化劑，中藥提取物等。
[0010]本發明技術方案中黏膜給藥配方的蛋白水解物，可以是該水解物的部分純化或完全純化的水解片段，與黏膜通過二級化學鍵連接。所述水解物由具有黏膜膠粘或黏膜穿透性的轉鐵蛋白(Transferrins)或粘蛋白(Mucins)水解形成。優選的，蛋白為乳鐵蛋白(Lactoferrin)、乳鐵蛋白結合蛋白(lactoferrin binding proteins)、重組乳鐵蛋白(recombinant lactoferrin)、乳鐵蛋白肽(Lactoferricins)、乳鐵蛋白肽(Lactoferricins b)、轉鐵蛋白結合蛋白(transferrin binding proteins)、轉鐵蛋白(transferrin)或卵轉鐵蛋白(ovotransferrin)。符合需要的乳鐵蛋白可以是從乳制品中分離獲得的，包括牛初乳，牛奶和乳清，其來源可以是人、牛、水牛、馬、羊、豬或駱駝等，也可以從各種商業渠道取得，如美國的Glanbia公司，新西蘭Westland等，還可以通過重組蛋白或基因重組的生物(GMO)生產等方法獲得。
[0011]優選的，本發明技術方案的黏膜給藥配方還包含一個或多個表面活性劑。表面活性劑用于幫助形成穩定的乳液，其用量由需要傳遞的物質的性質以及乳液中的其他成分性質來決定，因為有些物質具有自乳化的性能，乳液中的其他成分也可能影響表面張力。表面活性劑溶解在水溶液中時，可以降低溶液的表面張力或水相和油相之間的界面張力，形成穩定的油包水或水包油乳化劑。表面活性劑分子同時含有親水基團以及疏水基團，可以在乳液中形成各種大分子結構，如膠束、反膠束、脂質體、液晶等，確切的大分子結構的形成取決于表面活性分子的親水性和疏水性區域的相對大小。在某些實施案例中，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉，山梨醇，山梨醇月桂酸，硬脂酸山梨醇棕櫚酸酯，聚山梨酯，如聚氧乙烯
(20)山梨醇單月桂酸酯，聚氧乙烯(20)山梨醇酐單棕櫚酸酯，聚氧乙烯(20)山梨醇單硬脂酸酯，磷脂，神經酰胺，糖脂，脂蛋白，合成聚合物等，以及它們的組合。在某些實施案例中，表面活性劑為磷脂，卵磷脂，磷脂酰乙醇胺類，磷脂酰絲氨酸類，磷脂酰甘油，磷脂酰環己六醇，磷脂酸，混合鏈磷脂，溶血磷脂，氫化磷脂，部分氫化磷脂，或其混合物及制品。在某些實施案例中，表面活性劑則為吐溫80，卵磷脂等。在某些實施案例中，表面活性劑是TPGS，TPGS是維生素E琥珀酸酯與聚乙二醇1000的酯化產物。表面活性劑的量按重量計可以小于0.1%，也可高達35%。形成的穩定乳液，可以包含一個或多個膠束，脂質體及其混合物等，它們可以把藥傳遞的成分包裹起來，然后吸附在黏膜表面，滲透，從而達到傳遞藥物的目的。
[0012]優選的，本發明技術方案的黏膜給藥配方還包含助溶劑、聚合物或各種添加劑。[0013]助溶劑通常為液體，無毒，藥學上可接受，用于幫助溶解活性成分或粘合黏膜或滲透黏膜。在某一實施例中，助溶劑是一種多元醇或多元醇組合，如乙二醇，丙二醇，二丙二醇，聚乙二醇，甘油，丁二醇，己二醇，聚氧乙烯，聚丙二醇，山梨糖醇，乙二醇，或其混合物。助溶劑的數量取決于活性成分在油或水相中的溶解度，以及黏膜膠粘或黏膜穿透性物質的溶解度。通常情況下，助溶劑的量足以完全溶解活性成分。優選的，當助溶劑是丙二醇時，重量可在I %左右，也可以達總重量約30%的濃度。
[0014]聚合物一般用于改變配方的粘度，其組成與用量可以根據所需的終端產品的特點各不相同。優選的，聚合物為聚乙二醇酯，?如聚乙二醇400雙硬脂酸，其用量在0.1%，也可達組成總重量10%的濃度。 [0015]優選的，本發明配方可以進一步包含一個或多個其它添加劑，如矯味劑，緩沖劑，螯合劑，著色劑，滲透改性劑，防腐劑，消毒劑，增溶劑，微量元素等。矯味劑包括但不限于調味劑，甜味劑和掩味劑，如自然和人工香草，糖，乳糖等。緩沖劑包括但不限于酸化劑和堿化劑如檸檬酸，富馬酸，乳酸，酒石酸，蘋果酸，以及檸檬酸鈉，碳酸氫鈉，碳酸鈣，鈉或鉀的磷酸鹽和氧化鎂等。著色劑包括但不限于FD&C著色劑，天然著色劑，天然濃縮果汁，二氧化鈦，二氧化硅和氧化鋅顏料等。穩定劑包括但不限于抗氧化劑，螯合劑，酶抑制劑，抗壞血酸，維生素E，丁基醚(BHA)，二丁基羥基甲苯(BHT)，沒食子酸丙酯，雙十二烷基硫代二丙酸，硫代二丙酸，零陵香膠，檸檬酸，依地酸及其鹽類等。本發明配方也含有防腐劑，包括但不限于苯甲酸鈉，山梨酸鉀，苯甲酸酯及其衍生物，如尼泊金甲酯，尼泊金丙酯，山梨酸及其鹽類，丙酸及其鹽類，亞硫酸鹽，醋酸和醋酸，亞硝酸鹽和硝酸鹽等。
[0016]本發明的技術方案還包括所述黏膜給藥配方的制備方法，包括如下步驟:
[0017](I)制作蛋白水解物:將一個或多個有黏膜黏膠或黏膜穿透性質的蛋白水解，得到蛋白水解物，所述水解過程為有機酸水解、無機酸水解、有機堿水解、無機堿水解或酶水解；
[0018](2)制作水相:取步驟(1)中制得的蛋白水解物溶液，依次加入助溶劑、防腐劑，pH調節劑，如三乙胺，所述添加劑的劑量保持在不得導致有效成分降解的范圍，保持溫度一般不超過65°C，PH值范圍為8-14，以I萬RPM以下的轉速攪拌溶解；
[0019](3)制作油相:依次添加助溶劑、防腐劑至油相中，保持溫度為35_65°C，以I萬RPM以下的轉速攪拌溶解；
[0020]所述生物活性物質溶入水相或者油相中，并進一步混合；
[0021](4)制備乳化液:將水相加入油相，或將油相加入水相混合，并以100RPM-10萬RPM
的轉速混合直至乳化。
[0022]優選的，所述黏膜給藥配方的制備方法，還包括將步驟(4)的乳化液濃縮干燥或冷凍干燥，減少水分含量，并加入藥用輔料，也可以先加入輔料再干燥，然后制備成膠囊劑、粉末劑、片劑等。
[0023]步驟(1)中，黏膜膠粘或黏膜穿透的蛋白可以溶解到水中，濃度為0.1-30% (重量計)，優選的為5-15% (重量計)，pH值可以調整在1-4，優選的為2-3，反應時間取決于溶液的PH值以及相應的溫度。當pH值調整到1-2時，溫度可以在80攝氏度到130度。pH值調整到2-4時，溫度可以在100到130度，反應時間可以在I到180分鐘，最好是15-60分鐘。當采用酸水解時，將市場上出售的乳鐵蛋白(Westland Milk Products,New Zealand)溶解在純凈水中形成5%濃度的溶液，分別加入IM鹽酸調整pH值到1，2，3和4。水解反應可以在不同PH值下，溫度在O度到100度之間，優選的在35-90°C，水解時間可以在5-180分鐘之間，最好在60-120分鐘。
[0024]酶解也可以按照常規方法進行。將有黏膜膠粘或黏膜穿透性的蛋白物質溶解在水或純凈水或pH值特定范圍的水中，濃度0.1-30% (重量計)之間，優選的在5-15%之間，進一步調整pH值到最適合酶解反應的pH值范圍內，保持溫度在15度與55攝氏度，優選的在25到45攝氏度是進行酶解，時間為15-720分鐘，優選的為60-300分鐘之間。待酶解反應達到要求后，可以按照傳統方法使酶失活。豬胃蛋白酶和其它酸性酶可以單獨或聯合使用。使用的酶的數量一般是0.1-5.0%，最好是0.5-3.0%，再使用傳統方法冷卻，如有必要還可以搗破，除鹽，脫色，由此產生的黏膜膠粘或黏膜穿透的蛋白水解物可以直接用于液體或乳液產品的配制，該液體產品也可以進一步濃縮和/或干燥獲得的濃縮液產品或粉狀產品，以方便產品的配制。該水解物也可以部分純化，甚至純化成單一成分。上面提到的水解條件可以因溫度，時間，壓力以及酸或酶的種類和數量適當調整。
[0025]步驟(2)中，水相可以被加熱并保持在一個預定的溫度，以便于黏膜黏附或黏膜穿透性蛋白質水解物或要傳遞的成分或藥物成分易溶于水相，同時保留其活性。例如，含有乳鐵蛋白水解物的配方，溫度保持65°C以下。優選的，可以添加助溶劑和防腐劑:助溶劑，如丙二醇等可以在預定的轉速下溶解在水相；防腐劑，如苯甲酸鈉和/或山梨酸鉀可以添加到水相。水溶性表面活性劑，如土溫80，可以加入到水箱中.整個過程中保持在特定溫度和壓力，避免相關成分的破壞。黏膜膠粘或黏膜穿透蛋白水解物的數量要足以達到轉移活性成分或藥物的目的，并加入到水相混合溶解。如果需要傳遞的活性成分或藥物是水溶性的，它(們)就可以添加到水相，混合溶解。
[0026]步驟(3)中，油相中使用的成分包括天然或人工合成的,適合消費者使用的任何油脂，包括但不限于甘油單酯，甘油雙酯，甘油三酯，脂肪酸，如油酸，亞油酸，棕櫚酸，硬脂酸等的酯，以及丙二醇 或其他多元醇酯，醚等。在某些例子中，油是短鏈，中鏈或長鏈甘油三酯。在某些例子中，油就是中鏈甘油三酯(MCT)。在某些實例中，MCT是三辛酸甘油酯。優選的，油相包含玉米油，燕麥油和三辛酸甘油三酯。油的用量要足以溶解所有油溶性成分。
[0027]油相在35至65°C之間制備，所有的油溶性成分都可以溶解在油相中。優選的，可以添加助溶劑如丙二醇或甘油到油相中，但不能導致任何有效成分的降解。所需的油相防腐劑，如甲基苯甲酸酯和尼泊金丙酯，可以加入油相中。需要的表面活性劑，如磷脂等可以溶解在油相。在某些實施案例中，反應容器需要密閉，以防止成分的蒸發，或通過其它條件最大限度地減少蒸發。在某些實例里，蒸發量是沒有影響的，因而反應容器并不一定必須密封。
[0028]步驟(4)中，水相加入油相或油相加入水相都可以，混合速度要足以達到乳化效果，但不得導致任何有效成分的降解等。乳液混合的步驟可以包括剪切，也可以只是輕微的混合。在某些實施案例中，乳化一定要剪切混合。乳液通常保持在較低溫度，優選的，為40攝氏度。
[0029]綜上所述，采用本發明方法制備的黏膜給藥配方中含有具有黏膜膠粘或黏膜穿透屬性的組分，無論是通過口腔黏膜、鼻黏膜或陰道黏膜等方式給藥，一接觸到黏膜表面，就會膠粘和/或嵌入到黏膜表面，讓相關成分滲透黏膜，從而實現將需要傳遞的物質傳遞進入循環系統，達到治療與防治的目的。本配方與其他藥物載體相比，可增加水難溶性藥物和脂溶性藥物的溶解度、粒徑小且均勻，使被包容的物質高度分散有利于吸收，大大提高藥物體內F，藥物被包埋在微乳中吸附、偶聯在微乳表面延緩藥物釋放。本發明的配方使用方便、用藥起效快，使用過程無毒無刺激，且醫療成本和副作用顯著降低，非常適合醫藥上廣泛使用。
【具體實施方式】
[0030]現結合實施例對本發明做進一步詳細描述:
[0031 ] 實施例1蛋白水解物的制備
[0032]甲:10克乳鐵蛋白溶解于純凈水90克，然后用IM鹽酸調整溶液的pH值到2，由此產生的溶液加熱到120°C，酸水解，水解I小時，然后冷卻，再用IM的氫氧化鈉調節pH至
8.5，過濾，得10%的乳鐵蛋白水解物(凈重10克水解物)的溶液約100克。
[0033]乙:10克的乳鐵蛋白溶解于純凈水90克，由此產生的溶液用IM的鹽酸調整pH值至2，然后加熱到100°C水解6小時。水解液冷卻，再用IM的氫氧化鈉調節pH至8.5，過濾，得到10%的乳鐵蛋白水解物(凈重10克水解物)約100克。
[0034]丙:10克的乳鐵蛋白溶解于純凈水90克，由此產生的水溶液用2M檸檬酸調整pH值至2.5，然后加入0.3克豬胃蛋白酶(10，000單位/克蛋白質)，均勻混合，溫度維持在370C。水解3小時后加熱到80°C，10分鐘后冷卻，用IM氫氧化鈉溶液調節pH至8.5，過濾，得約100克的乳鐵蛋白水解液。
[0035]丁:60g的乳鐵蛋白粉溶解于純凈水240克。以檸檬酸將溶液的pH值調整到pH2，將3克豬胃蛋白酶(10，000單位/克蛋白質)加入溶液中，攪拌并保持在37°C。反應I小時后用IM的氫氧化鈉中和，由此產生的反應混合物加熱到80°C。10分鐘后冷卻，并用IM氫氧化鈉調節PH至8.3，過濾，得約300克的乳鐵蛋白水解液。
[0036]戊:10克粉狀乳鐵蛋白加入純凈水90克。將此溶液用IM氫氧化鈉調整pH值至
6。然后往此溶液中加入胰蛋白酶2克，攪拌并保持在45°C，反應4個小時。再將反應混合物加熱到80°C，冷卻10分鐘后再用IM氫氧化鈉調節pH至8.5，過濾，得約100克的乳鐵蛋白水解液。
[0037]實施例2:艾塞那肽配方制備
[0038]該配方共0.5公斤按如下表1制備:
[0039]表1:
[0040]
【權利要求】
1.一種黏膜給藥配方，該配方包含一個或多個具有黏膜膠粘或黏膜穿透性的蛋白水解物,所述蛋白水解物占整個配方的比重(重量比)為0.1%-80%。
2.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述配方是一種乳液，需要傳遞的物質溶解在乳液的油相或水相中。
3.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述需要傳遞的物質為一種或多種生物活性成分或藥物活性成分。
4.根據權利要求1或3所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述需要傳遞的物質為一種或多種具有生物活性的多肽。
5.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述蛋白水解物是該水解物的部分純化或完全純化的水解片段。
6.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述水解物由具有黏膜膠粘或黏膜穿透性的轉鐵蛋白(Transferrins)或粘蛋白(Mucins)水解形成。
7.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述配方的組成還包含表面活性劑，所述表面活性劑為聚山梨酯類或卵磷脂或聚乙二醇酯或糖酯或維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的任意一種或多種混合物。
8.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述配方的組成還包含添加劑，所述添加劑為矯味劑、緩沖劑、螯合劑、著色劑、滲透改性劑、防腐劑、滅菌劑、增溶劑。
9.根據權利要求1所述的黏膜給藥配方，其特征在于:所述配方通過口腔、陰道、鼻腔黏膜、肺黏膜、腸黏膜給藥。
10.一種權利要求1所述黏膜給藥配方的制備方法，包括如下步驟: (1)制作蛋白水解物:將一個或多個有黏膜黏膠或黏膜穿透性質的蛋白水解，得到蛋白水解物，所述水解過程為有機酸水解、無機酸水解、有機堿水解、無機堿水解或酶水解； (2)制作水相:取步驟(1)中制得的蛋白水解物溶液，依次加入助溶劑、防腐劑、pH調節劑、表面活性劑等，保持溫度65°C以下，PH值范圍為8-14，并攪拌溶解； (3)制作油相:依次添加助溶劑、防腐劑至油中，保持溫度35-65°C并攪拌溶解； 將所述生物活性物質或藥物活性物質溶入水相或者油相中，并進一步混合； (4)制備乳化液:將水相和油相混合，并以100RPM-10萬RPM的轉速混合至產生乳化效果。 (5)干燥:將步驟(4)的乳化液干燥減少水分含量，并加入藥用輔料，或先加入藥用輔料再干燥減少水分含量，然后制備成膠囊劑或噴劑或粉末劑或片劑。
【文檔編號】A61K47/42GK103566376SQ201210281683
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年8月9日 優先權日:2012年8月9日
【發明者】李健雄, 張進軍 申請人:武漢英納氏藥業有限公司