專利名稱：如意珍寶丸/片在治療血管性癡呆中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥領域，具體涉及藏藥如意珍寶丸/片的新用途。
背景技術：
血管性癡呆(vascular dementias, VD),又稱為多發梗塞性癡呆,是引起老年期癡呆的第二大病因，在癡呆中占10% 50%。VD是一個綜合征，而不是一個單一的疾病，不同的血管病理變化均可引起VD癥狀，包括大、小動脈病變，彌漫性缺血性白質病變，心臟脫落栓子的栓塞，血液動力學改變，出血，血液學因素和遺傳性疾病等。與VD有關的病理生理機制包括局灶性缺血性損害、白質病變、其它與缺血有關的因子、功能因素。總之，是長期高血壓、動脈硬化、反復發生腔隙性梗塞、或其他原因的多發性梗塞，導致腦室擴大，皮質萎縮，使相應的傳導束破壞，逐漸出現的皮質下癡呆。目前，血管性癡呆的診斷標準是采用美國神經病學會《神經病診斷和統計手冊》第四版(DSM-IV)，具體為(I)發生多方面認知缺陷，表現為以下二者記憶缺陷(不能學習新資料或不能回憶所學到的資料)；至少有下列認知障礙之一失語、失用(雖然運動功能沒有問題，但不能執行動作)、失認(雖然感覺功能沒有問題，但不能認識或識別物體)、執行管理功能的障礙(即計劃、組織、安排次序、抽象等)；(2)以上認知缺陷導致社交或職業功能缺陷，并可發現這些功能明顯不如以前；(3)存在局限性神經系統體征與癥狀(例如深腱反射亢進、伸跖反射、假性球麻痹、步態障礙、某一肢體軟弱)；或有提示腦血管疾病的實驗室依據(例如，涉及皮層及白質的多梗塞)并可認為是此障礙的病因；(4)這些缺陷并非由于譫妄所致。血管性癡呆為一種多因素疾病，是現今唯一可以防治的癡呆類型，VD診斷一旦確立即適合開始藥物治療認知癥狀。臨床常用的治療藥物包括腦循環促進劑、作用于神經遞質的藥物、神經元保護劑以及中藥療法，其中，中藥療法多為辨證論治。腦循環促進劑包括氫麥角堿(Hydergine，二氫麥角堿，喜得鎮，舒腦寧)，可直接作用于DA和5-HT受體，降低腦血管阻力，增加腦血流量及腦對氧的利用率，改善突觸神經傳遞功能；阿司匹林(Aspirin)，抗血小板聚集藥，廣泛應用于心腦血管病的防治；尼麥角林(Nicergoine，腦通)具有a受體阻滯的擴張血管作用，增加腦血流量，加強腦細胞的新陳代謝、增加血氧和葡萄糖的利用，此外，尚有促進多巴胺的代謝、促進腦部蛋白質的合成，抑制血小板聚集和抗血栓等作用；萘呋胺酯(Naftidrofuryl,克拉瑞唳,腦加強)，是5-HT受體拮抗劑，通過抗5-HT而減少缺血所致的神經元壞死，易透過血腦屏障可直接擴張腦血管和外周血管，增加紅細胞的變形性和降低血液稠度并能促進細胞代謝，對細胞缺氧也有保護作用；己酮可可堿(Pentoxifylline),具有擴張腦及外周血管的作用，還可能通過影響紅細胞的變形性、血小板粘附及血小板聚集性而發揮作用，臨床用于各種腦血管血流障礙性疾病；長春西汀(Vinpocetine),能增加腦血流量、改善大腦氧供給、降低血液粘稠度,對腦血管有較高的選擇。作用于神經遞質的藥物包括多奈哌齊(Don印ezil，安理申)可逆性地抑制乙酰膽堿酯酶(AchE)引起的乙酰膽酰水解而增加受體部位的乙酰膽堿含量，多奈哌齊可能還有其他機制，包括對肽的處置、神經遞質受體或Ca2+通道的直接作用；哈伯因(huperzine):其主要成分是從天然植物千層塔中提取的一種生物堿(石杉堿甲)，屬于可逆性膽堿酯酶抑制劑，易透過血腦屏障，有促進記憶再現和增強記憶保持的作用。神經元保護劑包括美金剛(Memantine):腦部缺血缺氧可導致突觸前興奮性氨基酸釋放和再攝取減少，過量的EAA可激活突觸后EAA受體(主要是NMDA受體和AMPA受體)，加重神經細胞損害，美金剛作為非竟爭性NMDA受體拮抗劑，能夠減輕大腦缺血缺氧過程中的神經損傷；尼莫地平(Nimodipine):為鈣通道阻斷劑，能有效調節細胞內鈣水平，抑制鈣超載造成的神經細胞損傷，促進受損神經元的再生。如意珍寶丸為傳統藏藥，成方于公元13世紀，載于藏醫藥學家仁青堅贊所著的《秘訣珍珠串》一書中。其組方根據藏醫學原理，選用生長在世界屋脊特殊生態環境的天然、珍貴、稀有藏藥材，并以現代科學方法與傳統工藝相結合精制而成。主要由珍珠母、沉香、·石灰華、金礞石、紅花、螃蟹、丁香、毛訶子(去核)、肉豆蘧、豆蘧、余甘子、草果、香旱芹、檀香、黑種草子、降香、蓽茇、訶子、高良姜、甘草膏、肉桂、乳香、木香、決明子、水牛角、黃葵子、短穗兔耳草、藏木香、人工麝香、牛黃珍珠母、沉香、甘草等30種藥材組成，其功能主治為清熱，醒腦開竅，舒筋通絡，用于瘟熱、陳舊熱癥、白脈病、四肢麻木、癱瘓、口眼歪斜、神志不清、肢體僵直、關節不利。如意珍寶片為如意珍寶丸的改進劑型，參照如意珍寶丸的制備標準，以片劑的方式提供，方便服用。目前尚無關于如意珍寶丸/片治療血管性癡呆或相關疾病的報道。

發明內容
本發明的目的在于提供藏藥的新醫藥用途，即提供如意珍寶丸/片在治療血管性癡呆(Vascular Dementia, VD)中的應用。所述藏藥由下述原料制成珍珠母22. 69重量份、沉香22. 69重量份、石灰華22. 69重量份、金礞石6. 81重量份、紅花22. 69重量份、驗蟹11. 34重量份、丁香9. 07重量份、去核的毛訶子22. 69重量份、肉豆蘧9. 07重量份、豆蘧9. 07重量份、余甘子29. 49重量份、草果6. 81重量份、香旱芹9. 07重量份、檀香18. 15重量份、黑種草子9. 07重量份、降香74. 86重量份、蓽發6. 81重量份、去核的訶子29. 49重量份、聞良姜18. 15重量份、甘草骨9. 07重量份、肉桂11. 34重量份、乳香13. 61重量份、木香18. 15重量份、決明子13. 61重量份、水牛角或水牛角濃縮粉
9.07重量份、黃葵子11. 34重量份、短穗兔耳草34. 03重量份、藏木香18. 15重量份、人工麝香O. 45重量份、人工牛黃或體外培育牛黃O. 45重量份。本發明所述的藏藥可以以任何適宜服用的口服劑型提供，例如丸劑、膠囊劑、片齊U、散劑和顆粒劑，優選的劑型為丸劑或片劑，如意珍寶丸/片可以為傳統的如意珍寶丸，也可以為改進的以片劑形式提供的如意珍寶片。通過對患血管性癡呆的大鼠模型(VD大鼠)施用高、中、低劑量的如意珍寶片，通過動物行為學實驗、遞質含量測定實驗和大鼠腦血流量觀察證明，如意珍寶片能顯著的提高VD大鼠空間和條件性刺激的學習記憶能力和改善VD大鼠的協調能力；對腦內遞質NE、DA、5-HT、ASP有非常好的保護作用，對血清內GABA也有保護作用；能顯著增加VD大鼠腦血流量，從而改善因腦供血不足引起的腦損傷。因此如意珍寶丸/片臨床上可用于治療血管性癡呆。
具體實施例方式下面通過對本發明較佳實施方式的描述，詳細說明但不限制本發明。
I、實驗材料I. I供試品如意珍寶片由甘肅奇正藏藥有限公司提供。處方和制備方法取以重量計的以下成分珍珠母22. 69g、沉香22. 69g、石灰華22. 69g、金礞石
6.81g、紅花22. 69g、螃蟹11. 34g、丁香9. 07g、去核的毛訶子22. 69g、肉豆蘧9. 07g、豆蘧9. 07g、余甘子29. 49g、草果6. 81g、香旱療9. 07g、檀香18. 15g、黑種草子9. 07g、降香74. 86g、蓽茇6.81g、去核的訶子29. 49g、高良姜18. 15g、甘草膏9. 07g、肉桂11. 34g、乳香13. 61g、木香18. 15g、決明子13. 61g、水牛角或水牛角濃縮粉9. 07g、黃葵子11. 34g、短穗兔耳草34. 03g、藏木香18. 15g、人工麝香O. 45g、人工牛黃或體外培育牛黃O. 45g ；將除人工牛黃或體外培育牛黃、水牛角或水牛角濃縮粉、人工麝香、甘草膏外的其它成份粉碎成細粉或超微粉碎，加入人工牛黃或體外培育牛黃、水牛角細粉或水牛角濃縮粉、人工麝香，過篩，混勻，用甘草膏加適量水制粒、干燥，壓片，包衣，即得。性狀本品為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯棕色至紅棕色；氣微香，味苦、甘。規格每片重O. 5g。批號20101113。I. 2陽性對照藥品1.2. I鹽酸多奈哌齊片(安理申)，衛材(中國)藥業有限公司制造，批號110110A,生產日期2011年I月，有效期至2013年12月，規格5mg/片。保存條件常溫。I. 2. 2甲磺酸雙氫麥角堿(喜得鎮)，天津華津制藥有限公司，批號9M862T，生產日期2009年12月，有效期至2012年11月，規格Img/片。保存條件常溫。I. 3 試劑1.3. I戊巴比妥鈉中國醫藥(集團)上海化學試劑公司，批號100808。I. 3. 2生理鹽水山東齊都藥業有限公司，批號20041208。I. 3. 3磷酸二氫鉀天津市化學試劑三廠，批號20041208。I. 3. 4甲醇天津市康科德科技有限公司，批號20111209。I. 3. 5醋酸鈉天津市化學試劑三廠，批號20090926。I. 3. 6硼酸鈉，天津市化學試劑三廠，批號20100120。I. 3. 7 二巰基乙醇北京鼎國生物技術，批號20111203。1.3. 8天冬氨酸上海源葉生物科技有限公司，批號20110503。I. 3. 9r_氨基丁酸上海源葉生物科技有限公司，批號20110503。I. 3. 10去甲腎上腺素中國食品藥品檢定研究所，批號100169-201103。I. 3. 11 多巴胺Augsburg, C13082000，批號00714。I. 3. 125-羥色胺Sigma，H9523，批號1001156278。I. 3. 13美托洛爾阿斯利康制藥有限公司，批號1108091。
1.3. 14青霉素鈉哈藥集團制藥總廠，批號101214706，80萬單位/0.5g/支。I. 4儀器與耗材I. 4. 1MG-3型迷宮刺激器，河南省原陽縣振華教學儀器廠。I. 4. 2PB-203 型電子天平，METTLER-T0LED0 GROUP 生產。I. 4. 31200series 高效液相色譜儀，Agilent Technologies Co。I. 4. 413300 型低溫離心機，Thermo science Co。I. 4. 5G&G T2000型電子天平，美國雙杰兄弟(集團)有限公司。I. 5實驗動物I. 5. ISD 大鼠250只SPF級雄性大鼠，由北京維通利華實驗動物技術有限公司(生產許可證號SCXK (京)2006-0009)，動物質量合格證號0247353。2.給藥途徑、方法、劑量、頻率和用藥期限的確定給藥途徑口服。 給藥方式灌胃。給藥體積大鼠10ml/kg。劑量設計依據如意珍寶片口服一次4-5片，一日2次，每片重O. 5g。人以70kg體重計，大鼠體表等效劑量為O. 419g/kg，根據血瘀實驗結果I. 6g/kg才有顯著的活血化瘀作用，故藥效實驗劑量為大鼠1.6g 生藥 /kg、0. 8g 生藥 /kg、0. 4g 生藥 /kg。多奈哌齊臨床用量，每日劑量為5mg/人，5mg/人/天相當于大鼠體表等效劑量為O. 419mg/kg,劑量設定為大鼠0. 4mg/kg。甲磺酸雙氫麥角堿臨床用量，每日最大劑量為6mg/人，6mg/人/天相當于大鼠體表等效劑量為O. 502mg/kg，劑量設定為大鼠0. 5mg/kg。3.藥物配制方法及給藥濃度3. I如意珍寶片取如意珍寶片64片，加少量去離子水研磨均勻后，去離子水定容至200ml，為高劑量藥液，濃度為O. 16g/ml。用去離子水將高劑量藥液等比稀釋，配制中(0.08g/ml)、低(O. 04g/ml)劑量藥液。3. 2多奈哌齊取多奈哌齊片2片(5mg/片)，加少量去離子水研磨均勻后，去離子水定容至250ml，劑量為 O. 04mg/ml。3. 3甲磺酸雙氫麥角堿取甲磺酸雙氫麥角堿片13片(lmg/片)，加少量去離子水研磨均勻后，去離子水定容至260ml，劑量為O. 5mg/ml。4.數據處理與分析采用SPSS11. OOne-Way ANOVA (單因素方差分析)對數據進行方差分析后，采用t檢驗進行組間比較。實施例IVD大鼠模型的制作及實驗動物分組
250只成年健康雄性SD大鼠，先經MG-3型Y型迷宮訓練，淘汰反應過于遲鈍或對電刺激特別敏感的大鼠(淘汰31只大鼠)。隨機挑選20只大鼠作為假手術組，剩余199只大鼠采用改良雙側頸總動脈永久性結扎法制作VD動物模型。大鼠術前12h禁食，大鼠稱重，灌胃給予美托洛爾(O. 5mg/kg)，半小時后腹腔注射1%戊巴比妥鈉(4. 5ml/kg)麻醉，術前眼眶放血3ml，大鼠仰臥固定，備皮，消毒，頸部正中切口，鈍性分離胸骨舌骨肌和胸鎖乳突肌后便可見到頸總動脈搏動，鈍性分離雙側頸總動脈，O號線結扎其遠近心端，并從中間剪斷，縫合切口，放回籠中保溫飼養，術后及次日注射I %青霉素鈉4ml/kg (劑量為6. 4萬單位/kg)，術后灌胃給予美托洛爾(O. 5mg/kg)每日一次，連續給予I周，加強VD大鼠腦缺血效果(手術過程中死亡28只)。假手術組大鼠分離頸總動脈后縫合切口。手術結束后，大鼠恢復2天后檢測造模是否成功，171只手術大鼠進行Y迷宮檢測，篩選原則為正確次數大于10次以上淘汰。其中合格大鼠為122只，隨機分為6組，除模型組22只外，其余各組每組20只，各組大鼠每日上午灌胃給藥一次，連續給藥3周，模型組與假手術組給予同體積去離子水。每組隨機挑選10只大鼠做行為學實驗，末次給藥結束后，注射1%戊巴比妥納(4. 5ml/kg)麻醉大鼠進行腦血流量檢測，檢測結束后直接斷頭取腦進行腦內單胺類遞質和氨基酸類遞質指標檢測。其余各組大鼠，給藥結束后立即腹主動脈取血，離心取上清液進行血清內氨基酸類遞質指標檢測、取腦進行組織病理檢測。實施例2行為學實驗I如意珍寶片對VD大鼠學習記憶的影響各組大鼠應用MG-3型Y-型迷宮測試其記憶成績。Y迷宮由三個相同的臂組成，分別稱為I臂、II臂、III臂。迷宮底鋪設直徑O. 2cm，長14cm，間距Icm的電柵，可以通電刺激。三臂頂端各裝有15W信號燈，燈光作為電擊的信號，以訓練大鼠辨別燈光刺激及安全方位的能力。實驗時其中有一條臂盡頭的燈發出亮光，此時該臂底部電柵無電流通過為安全區，另兩臂的燈不亮，底部電網通電，為非安全區。安全區與非安全區隨機改變。實驗前先將大鼠放入迷宮，讓其自由活動，適應5min，訓練日大鼠在起步區予以電擊致其逃至安全 區，燈光持續10s，然后熄燈休息5s，開始下一次操作，一共測試15次。次日為測試日同訓練日操作，記錄15次測試中正確反應次數進行統計分析。實驗在黑暗、安靜環境下進行。規定大鼠受電擊后從起步區直接逃至安全區的反應稱為“正確反應”，否則為“錯誤反應”。結果見表I。結果顯示，與假手術組比較，給藥前模型動物正確次數非常顯著的減少，表明VD模型制作成功。給藥2周和給藥3周模型組正確次數均非常顯著的減少，VD大鼠的學習記憶能力顯著下降，其中給藥2周P < O. 001，給藥3周顯著性為P < O. 01。與模型組比較，給藥2周，多奈哌齊、如意珍寶片高劑量均能非常顯著的增加正確次數(顯著性分別為P
<O. OLP < O. 001)，給藥3周，多奈哌齊、如意珍寶片高、中劑量也均能顯著的增加正確次數(顯著性分別為P < O. 05，P < O. 01，P < O. 05)。喜得鎮組各項指標均無顯著性差異。實驗結果表明如意珍寶片能顯著的提高VD大鼠空間和條件性刺激的學習記憶能力。表I如意珍寶片對VD大鼠Y迷宮實驗的影響
權利要求
1.藏藥在制備治療血管性癡呆藥物中的用途，所述藏藥由如下原料制成 珍珠母22. 69重量份、沉香22. 69重量份、石灰華22. 69重量份、金礞石6. 81重量份、紅花22. 69重量份、驗蟹11. 34重量份、丁香9. 07重量份、去核的毛訶子22. 69重量份、肉豆蘧9. 07重量份、豆蘧9. 07重量份、余甘子29. 49重量份、草果6. 81重量份、香旱療9. 07重量份、檀香18. 15重量份、黑種草子9. 07重量份、降香74. 86重量份、蓽茇6. 81重量份、去核的訶子29. 49重量份、聞良姜18. 15重量份、甘草骨9. 07重量份、肉桂11. 34重量份、乳香13. 61重量份、木香18. 15重量份、決明子13. 61重量份、水牛角或水牛角濃縮粉9. 07重量份、黃葵子11. 34重量份、短穗兔耳草34. 03重量份、藏木香18. 15重量份、人工麝香O.45重量份、人工牛黃或體外培育牛黃O. 45重量份。
2.權利要求I所述的用途，其中所述藏藥為選自丸劑、膠囊劑、片劑、散劑和顆粒劑的任一種口服劑型。
3.權利要求2所述的用途，其中所述藏藥為如意珍寶丸。
4.權利要求2所述的用途，其中所述藏藥為如意珍寶片。
全文摘要
本發明提供了藏藥如意珍寶丸/片在治療血管性癡呆中的應用，其中所述藏藥由如下原料制成珍珠母、沉香、石灰華、金礞石、紅花、螃蟹、丁香、去核的毛訶子、肉豆蔻、豆蔻、余甘子、草果、香旱芹、檀香、黑種草子、降香、蓽茇、去核的訶子、高良姜、甘草膏、肉桂、乳香、木香、決明子、水牛角或水牛角濃縮粉、黃葵子、短穗兔耳草、藏木香、人工麝香、人工牛黃或體外培育牛黃。
文檔編號A61K35/32GK102908572SQ201210303750
公開日2013年2月6日 申請日期2012年8月24日 優先權日2012年8月24日
發明者陳維武, 吳屾, 陳麗娟, 張國霞 申請人:甘肅奇正藏藥有限公司