專利名稱：一種從蘆筍中提取類黃酮的方法
技術領域：
技術領域
本發明涉及黃酮類物質的提取方法領域，具體涉及一種蘆筍中類黃酮的提取方法。
背景技術：
蘆筍是世界十大名菜之一，又名石習柏。在國際市場上享有“蔬菜之王”的美稱，蘆筍富含多種氨基酸、蛋白質和維生素，其含量均高于一般水果和蔬菜，特別是蘆筍中的天冬酰胺和微量元素硒、鑰、鉻、錳等，具有調節機體代謝，提高身體免疫力的功效，在對高血壓、心臟病、白血病、血癌、水腫、膀胱炎等的預防和治療中，具有很強的抑制作用和藥理效應。蘆筍主要是用于加工成罐頭或速凍后出口，蘆筍的加工期為每年的四月初到六月底，之后，由于蘆筍組織的纖維化程度增加，口感變差，便不再用于加工，而是讓其自由生長，以利蘆筍的第二年的采挖，目前蘆筍老莖在十月份干枯后，農民將蘆筍老莖收割回家，用作柴燒，沒有充分利用。報道中蘆筍含有蘆丁等黃酮類化合物，黃酮類化合物具有抗自由基、抗氧化、抗癌、搞菌、抗病毒、搞炎癥、抗過敏等多種生理活性及藥理作用，并具有降低血管透性及脆性的作用，對人類的腫瘤、血管等疾病的治療和預防有重要的意義，因此，其成為近幾年研究、開發和利用的熱點，尤其在醫藥、食品領域具有廣闊的應用前景。類黃酮廣泛存在于植物的各個部位，自從Hertog等報道類黃酮的攝食與心肌梗死及冠心病引起的死亡率呈負相關后，植物來源的類黃酮很快成為研究的熱點。許多研究已表明類黃酮具有多種生物活性，如抗菌消炎、降血壓、抗突變、抗氧化、抗癌、抑制脂肪氧化酶等，在化妝品、醫藥、食品等工業中應用廣泛。國內外研究表明蘆笑中含有大量的類黃酮，目前，對于蘆笑類黃酮的單一提取方法已經研究得很深入，類黃酮的提取主要是根據其性質來選擇合適的提取溶劑，并結合超聲波技術、微波技術、逆流萃取技術等手段提高提取率。到目前為止，尚無利用雙水相與超聲耦合從蘆筍中提取類黃酮的報道。蘆筍中的類黃酮物質的提取方法主要集中在采用有機試劑提取上，一般是將蘆筍清洗干凈，干燥、粉碎、以水或者是有機溶劑為提取介質提取，通過真空濃縮去除水或有機溶劑即可得到蘆丁醇等黃酮類的物質。還有報道中采用生物酶法和超聲波結合的方法提取，但是這種方法在工業上大規模的應用有難度。

發明內容
為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種從蘆筍中提取黃酮的方法。本發明是通過下述的技術方案來實現的
a.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩；
b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉15-25mL石油醚的比例加入石油醚，在40-50°C超聲振蕩30-40min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥4-6小時；c.雙水相萃取向濾渣中加入丙酮或乙醇與水的混合溶液60mL，其中丙酮或乙醇與水體積之比為3:5，再加入12-15g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在40-50°C，時間為30-40min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液；d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。
優選的，上述的步驟b中，超聲處理的條件為按Ig蘆筍干粉20mL石油醚的比例加入石油醚，在45°C超聲振蕩35min，超聲波的功率為250W，過濾，濾渣室溫下干燥5小時。
優選的，上述的步驟c中，加入的有機溶劑為丙酮或乙醇。
優選的，上述的步驟c中，丙酮或乙醇與水的體積之比為3:5。
優選的，上述的步驟c中，雙水相萃取的條件為向濾渣中加入有機溶劑與水的混合溶液60mL，再加入14g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在45°C，時間為 35min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液。
本發明的有益效果在于，通過采用雙水相與超聲耦合相結合的方法，從蘆筍中提取黃酮類化合物，提取率高、方法簡單、適于工業化生產，而且采用該方法安全可靠、操作簡便、廣品純度聞。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作更進一步的說明，以便本領域的技術人員更了解本發明，但并不因此限制本發明。
實施例Ia.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩；b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉20mL石油醚的比例加入石油醚，在45°C超聲振蕩35min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥5小時；c.雙水相萃取向濾渣中加入丙酮與水的混合溶液60mL，其中丙酮與水體積之比為 3: 5，再加入14g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在45°C，時間為35min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液；d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。
實施例2a.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩；b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉20mL石油醚的比例加入石油醚，在40°C超聲振蕩40min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥6小時；c.雙水相萃取向濾渣中加入丙酮與水的混合溶液60mL，其中丙酮與水體積之比為 3: 5，再加入12g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在40°C，時間為40min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液；d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。實施例3
a.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩；
b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉25mL石油醚的比例加入石油醚，在50°C超聲振蕩30min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥5小時；
c.雙水相萃取向濾渣中加入乙醇與水的混合溶液60mL，其中乙醇與水體積之比為3: 5，再加入13g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在50°C，時間為30min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液； d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。實施例4
a.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩；
b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉15mL石油醚的比例加入石油醚，在45°C超聲振蕩40min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥6小時；
c.雙水相萃取向濾渣中加入乙醇與水的混合溶液60mL，其中乙醇與水體積之比為3: 5，再加入13g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在45°C，時間為40min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液；
d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。測試實施例
稱取Ig蘆葦干粉分別按實施例1-4提供的方法提取類黃酮，利用氯化鋁比色法測定類黃酮含量，計算提取率，結果見表I。
權利要求
1.一種從蘆筍中提取類黃酮的方法，包括下述的步驟 a.預處理將蘆筍洗凈，置于60°C干燥箱干燥至恒重，取出粉碎，過40目篩； b.超聲處理將蘆筍干粉置于IOOmL具塞錐形瓶，按Ig蘆筍干粉15-25mL石油醚的比例加入石油醚，在40-50°C超聲振蕩30-40min，超聲波的功率為250 W，過濾，濾渣室溫下干燥4-6小時； c.雙水相萃取向濾洛中加入有機溶劑與水的混合溶液60mL,再加入12-15g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在40-50°C，時間為30-40min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液； d.濃縮干燥將步驟c中的上層丙酮相減壓濃縮至原提取液體積的1/5，在55°C下干燥，收集干燥后樣品即為蘆筍類黃酮。
2.如權利要求I所述的從蘆筍中提取類黃酮的方法，其特征在于，所述的步驟c中加入的有機溶劑為丙酮或乙醇。
3.如權利要求2所述的從蘆筍中提取類黃酮的方法，其特征在于，所述的步驟c中丙酮或乙醇與水的體積之比為3:5。
4.如權利要求I所述的從蘆筍中提取類黃酮的方法，其特征在于，所述的步驟b中，按Ig蘆筍干粉20mL石油醚的比例加入石油醚，在45°C超聲振蕩35min，超聲波的功率為250W，過濾，濾渣室溫下干燥5小時。
5.如權利要求I所述的從蘆筍中提取類黃酮的方法，其特征在于，所述的步驟c中，雙水相萃取向濾渣中加入有機溶劑與水的混合溶液60mL，再加入14g硫酸銨形成雙水相體系，超聲提取，溫度控制在45°C，時間為35min，超聲波的功率為250W，然后在分液漏斗中靜置，上層丙酮相為類黃酮提取液。
全文摘要
本發明涉及黃酮類物質的提取方法領域，具體涉及一種蘆筍中類黃酮的提取方法。該方法包括下述的步驟a.預處理；b.超聲處理；c.雙水相萃取，加入有機溶劑提取；d.濃縮干燥。本發明的有益效果在于，通過采用雙水相與超聲耦合相結合的方法，從蘆筍中提取黃酮類化合物，提取率高、方法簡單、適于工業化生產，而且采用該方法安全可靠、操作簡便、產品純度高。
文檔編號A61P35/00GK102973830SQ20121052191
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月7日 優先權日2012年12月7日
發明者張成如 申請人:山東大學