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一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑的制作方法

文檔序號:11900815閱讀:474來源:國知局

本發明涉及疫苗佐劑技術領域,特別是涉及一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑。



背景技術:

佐劑是非特異性免疫增強劑,當與抗原一起注射或預先注入機體時,可增強機體對抗原的免疫應答或改變免疫應答類型。佐劑增強免疫應答的機制是通過改變抗原的物理形狀,延長抗原在機體內保留時間;刺激單核吞噬細胞對抗原的遞呈能力;刺激淋巴細胞分化,增加擴大免疫應答能力。

佐劑有很多種;例如氫氧化鋁佐劑、短小棒狀桿菌、脂多糖、細胞因子、明礬等。白油佐劑免疫原性好,但是毒副作用大;氫氧化鋁膠佐劑免疫原性好,副作用小,但不能誘導細胞免疫;類脂佐劑和蜂膠佐劑免疫原性好,可誘導體液免疫和細胞免疫,免疫持續時間長,但原材料價格昂貴。現有的免疫佐劑,因為效果差或者毒力大,尤其是缺乏針對性,沒有一種得到滿意效果。因此本發明的目的在于提供一種用于雞新城疫活疫苗的新型免疫佐劑。



技術實現要素:

本發明的目的就是針對上述存在的缺陷而提供一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,本發明將明礬、維生素E、左旋咪唑、羊毛脂有機結合,互相協調,制備出用于雞新城疫活疫苗的免疫復合佐劑,發揮佐劑的最大優勢,與抗原合用免疫效果較好,毒性小,成本低。

本發明的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑技術方案為,包括明礬、維生素E、左旋咪唑、羊毛脂。

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括按重量比的以下成分:明礬20-60、維生素E10-20、左旋咪唑1-8、羊毛脂10-30。

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括按重量比的以下成分:明礬30-50、維生素E12-18、左旋咪唑2-6、羊毛脂12-25。

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括按重量比的以下成分:明礬40-45、維生素E12-16、左旋咪唑3-5、羊毛脂15-20。

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,優選的,包括按重量比的以下成分:明礬45、維生素E15、左旋咪唑5、羊毛脂16。

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,制備方法為:

(1)將明礬配制成10-20%的硫酸鋁鉀溶液;

(2)將維生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸鋁鉀溶液中,混合均勻,調pH到6.5得到佐劑。

步驟(1)中,將明礬配制成12%的硫酸鋁鉀溶液。

將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中,按照2500rpm,乳化30分鐘。

本發明的有益效果為:本發明所述一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括明礬、維生素E、左旋咪唑、羊毛脂。本發明將明礬、維生素E、左旋咪唑、羊毛脂有機結合,互相協調,制備出用于雞新城疫活疫苗的免疫復合佐劑,發揮佐劑的最大優勢,與抗原合用免疫效果較好,毒性小,成本低。

本發明佐劑與雞新城疫活疫苗抗原結合,組成最佳的配方,即形成免疫刺激復合物,更好的發揮免疫佐劑效果。應用該佐劑和單獨使用明礬佐劑或者使用現有的弗氏佐劑、分別配置雞新城疫活疫苗活疫苗免疫動物,應用本發明佐劑組其抗體滴度均明顯高于單獨使用明礬佐劑或者使用現有的弗氏佐劑實驗組,高出5-12個抗體滴度。

具體實施方式:

為了更好地理解本發明,下面用具體實例來詳細說明本發明的技術方案,但是本發明并不局限于此。

實施例1

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括按重量比的以下成分:明礬45、維生素E15、左旋咪唑5、羊毛脂16。

制備方法為:

(1)將明礬配制成12%的硫酸鋁鉀溶液;

(2)將維生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸鋁鉀溶液中,混合均勻,調pH到6.5得到佐劑。

將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中,按照2500rpm,乳化30分鐘,得疫苗。

依照國家獸藥標準,驗證其結果:

安全檢驗: 用1-2月齡的黃羽肉雞15只,每只肌注疫苗0.5ml。觀察24小時,均應無異常反應。觀察10日后15只雞均未出現異常反應。

效力檢驗: 免疫組用1至2個月齡的健康易感黃羽肉雞(按92版獸用生物制品規程附錄第15頁做抑制紅細胞凝集試驗,抑制凝集價應小于1∶4)10只,每只肌注疫苗0.5ml,10至14天后,連同條件相同的未免疫對照雞3只,各肌肉注射10 4ELD50的北京株雞新城疫強毒1ml,觀察10至14天,對照雞全部發病死亡,免疫雞至少保護9只。

檢驗結果:對照雞全發病,免疫組全健活。

實施例2

所述的一種用于雞新城疫活疫苗的佐劑,包括按重量比的以下成分:明礬40、維生素E12、左旋咪唑3、羊毛脂20。

制備方法為:

(1)將明礬配制成10%的硫酸鋁鉀溶液;

(2)將維生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸鋁鉀溶液中,混合均勻,調pH到6.5得到佐劑。

將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中,按照2500rpm,乳化30分鐘,得疫苗。

依照國家獸藥標準,驗證其結果:

安全檢驗: 用1-2月齡的黃羽肉雞15只,每只肌注疫苗0.5ml。觀察24小時,均應無異常反應。觀察10日后15只三黃雞雞均未出現異常反應。

效力檢驗: 免疫組用1至2個月齡的健康易感黃羽肉雞(按92版獸用生物制品規程附錄第15頁做抑制紅細胞凝集試驗,抑制凝集價應小于1∶4)10只,每只肌注疫苗0.5ml,10至14天后,連同條件相同的未免疫對照雞3只,各肌肉注射10 4ELD50的北京株雞新城疫強毒1ml,觀察10至14天,對照雞全部發病死亡,免疫雞至少保護9只。

檢驗結果:對照雞全發病,免疫組全健活。

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