本發明屬于中藥制劑領域，特別涉及一種抗運動性疲勞的中藥組合物，以及該中藥組合物的制備方法。
背景技術：
從中醫學角度來看，運動性疲勞屬于中醫學勞倦內傷之范疇。《黃帝內經》等中醫典籍認為，疲勞的癥狀與內傷虛勞病的發生有關，與脾、腎根本受損密切相關。中醫認為，脾在體合肉，主四肢，即脾氣的運化功能與肌肉的壯實及其功能發揮之間有著密切關系，脾氣健運，則四肢營養充足，活動輕勁有力，若脾失健運，轉輸無力，則四肢的營養缺乏。腎為先天之本,藏精,主骨生髓。腎藏精，精化氣，腎精足則腎氣足，腎精虧則腎氣衰。過度疲勞，腎精虧損,髓海不足,則精神萎靡,眩暈耳鳴,記憶力減退,思維遲鈍,腰膝酸軟,肢體屢弱不用,疲乏無力。人體的生、長、老、已的生命過程，都取決于腎精及腎氣的盛衰。
而運動性疲勞主要耗損脾腎元氣，使氣與血大量耗損，因此導致人體機能的減弱。氣為血之帥，血為氣之母。勞倦傷氣，氣虛則血行不暢，導致血瘀，經絡不和，因而出現肌肉酸痛、筋骨乏力等癥狀。根據中醫的整體觀，疲勞被認為是由血氣、精髓虛竭，脾胃氣弱，腎氣不足，或陰不足、陽有余等原因引起的陰虛生內熱。在某些特定情況下，人體容易感到疲勞，例如競技體育中高強度的訓練對骨肉和腑臟功能的影響很大，易引起疲勞，又如，月經期間，人體的能量損耗大，也易引起疲勞。
現代醫學認為，運動性疲勞是由于運動性刺激所引起的組織、器官甚至整個機體工作能力暫時下降的現象。過度疲勞或者疲勞消除不及時，都會影響著機體運動機能水平，導致中樞神經系統的疲勞、免疫功能下降、神經內分泌功能抑制、造血系統功能抑制、機體抗過氧化能力下降等。
目前，市面上用于治療運動性疲勞的藥物不多，其中中藥的療效明顯優于西藥，并且具有毒副作用小、適于長期使用、成本低等優點。現有技術中，用于抗運動性疲勞的中藥多以疏肝解郁、養血安神和補益脾腎為主，往往采用人參、紅景天、刺五加、三七、麥芽、當歸、熟地、龍眼肉等藥材。這些抗運動性疲勞的中藥雖然具有一定的療效，但是卻存在著顯效慢、療效偏低等缺陷。因此，通過發掘中醫藥寶庫，研制出更快速有效、無毒副作用的抗運動性疲勞的中藥制劑，不僅具有較高的學術價值，還能創造出良好的社會效益與經濟效益，具有廣闊的市場前景。
技術實現要素：
本發明的目的在于，提供一種抗運動性疲勞的中藥組合物，具有益氣養血、強筋健骨的功效，可有效治療運動性疲勞，顯效快，無毒副作用，從而彌補了現有技術的不足。
本發明采取的技術方案為：
一種抗運動性疲勞的中藥組合物，其特征在于，由以下重量百分比的中藥原料制備而成：紅景天15％～20％，人參10～20％，巴戟天20％～30％，三七10％～20％，黃芪20％～30％，雄蠶蛾10％～20％。
優選地，所述中藥組合物由以下重量百分比的中藥原料制備制成：紅景天20％，人參10％，巴戟天20％，三七20％，黃芪20％，雄蠶蛾10％。
本發明的另一目的在于，提供該抗運動性疲勞的中藥組合物的制備方法，該制備方法包括以下步驟：
(1)按配比稱取紅景天、人參、巴戟天、三七、黃芪和雄蠶蛾六味中藥，分別磨碎；
(2)以1:8的料液比，將磨好的紅景天粉末、人參粉末、三七粉末與體積濃度為70％的乙醇混合，然后在85℃下回流提取兩次，每次2h，收集并合并兩次回流提取的濾液，減壓回收乙醇，使濾液濃縮至稠膏，再將稠膏減壓干燥，得到藥粉備用；
(3)以1:6的料液比，將磨好的黃芪粉末與水混合，然后在100℃下回流提取三次，每次1.5h，收集并合并三次回流提取的濾液，加入體積濃度為80％的乙醇，濾液中析出沉淀物，再將沉淀物減壓干燥，得到黃芪藥粉備用。這一步采用了水提醇沉的方法，將黃芪中的多糖類等有效成分通過沉淀分離出來。
(4)將磨好的雄蠶蛾粉末、步驟(2)所得藥粉和步驟(3)所得黃芪藥粉混合均勻，得到的混合物即為所述中藥組合物。
進一步的技術方案為，該制備方法還包括步驟(5)：將步驟(4)所得混合物與糊精按2.5：1的質量比例混合均勻，噴入無水乙醇并迅速攪拌混合，制備成濕顆粒，將濕顆粒于60℃下干燥后，進行整粒，最后灌入膠囊，制成膠囊劑。
具體地，步驟(1)將六味中藥磨碎后，分別過40目篩，使藥材粉末達到足夠細，便于提取其有效成分。
具體地，步驟(5)中，利用18目篩制備濕顆粒；利用80目篩進行整粒。
該步驟(5)為制備膠囊劑的過程，將無水乙醇作為潤濕劑，以“握之成團、輕壓即散”為標準制軟材，濕法制粒，過18目篩，60℃干燥，80目整粒，得干燥顆粒內容物灌入膠囊。
本發明的內容還包括一種抗運動性疲勞的中藥制劑，該中藥制劑包括上述抗運動性疲勞的中藥組合物和藥學可接受的賦形劑。具體地，所述藥學可接受的賦形劑為預膠化淀粉、糊精和微晶纖維素中的一種或多種。
本發明的內容還包括上述抗運動性疲勞的中藥組合物在制備用于抗運動性疲勞的藥物中的應用。
人參為五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根和根莖，其味甘、微苦，微溫，歸脾、肺、心、腎經，可補氣、血、陰、陽，具有大補元氣，復脈固脫，補脾益肺，生津養血，安神益智的功效。人參的有效成份為人參皂苷和人參多糖。現代藥理研究表明，人參具有抗疲勞、改善記憶力、抗腫瘤、提高機體免疫力、抗衰老、抑制細胞凋亡等作用。運動性疲勞發生在中樞部位或外周部位，外周疲勞可能的作用機制之一是細胞膜受到損傷，線粒體內Ca2+外流，損傷線粒體呼吸鏈上的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶，導致ATP生成減少，產生疲勞。而人參總皂苷和人參皂苷Rb1均能改善骨骼肌細胞內鈣穩態失衡和膜電位下降的情況，使SOD活性顯著增加，MDA含量顯著降低。
黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根，其味甘、性溫，入肺、脾二經，具有補氣升陽、益衛固表、托毒生肌和利水退腫等功效。黃芪臨床用于脾肺氣虛、中氣下陷、表虛自汗、氣血不足、癰疽難潰、久潰不斂、氣虛血滯、浮腫尿少、半身不遂和痹痛麻木等癥。黃芪的主要成分為多糖類、皂苷類和黃酮類，此外還含有微量元素如鈣、磷、鎂、鐵、鉀等，游離氨基酸如谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、天冬酰胺等，以及有機物如甜菜堿、膽堿、異微凸劍葉莎醇、β-谷甾醇、亞油酸、香豆精等。研究表明，黃芪可促進細胞生理代謝，增強記憶力，增強免疫系統功能、雙向調節血壓、保護血管內皮細胞、保肝、抗腫瘤、清除自由基和抗衰老，增加心肌收縮力，顯著降低血小板粘附率而減少血栓形成，保護缺血缺氧心肌。
三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根莖，其味甘、微苦，溫，歸肝、胃經，具有散瘀止血，消腫定痛的功效。三七生吃，去瘀生新，消腫定痛，并有止血不留瘀血，行血不傷新的優點，熟服可補益健體。三七的主要成分為皂苷類、揮發油、黃酮類等。現代醫學研究認為，三七具有抗血栓、止血、補血、調節糖代謝、降血脂及防止動脈粥樣硬化等作用，三七皂苷能減少機體內血尿氮素、增加肝糖原儲備、降低血乳酸值，緩解運動性疲勞。
紅景天為景天科植物大花紅景天Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba的干燥根和根莖，其性甘、苦，平，歸肺、心經，具有益氣活血，通脈平喘的功效。現代醫學研究表明，紅景天具有抗氧化衰老、抗缺氧、抗疲勞、抗低溫、抗輻射、保護心肌等作用。紅景天的主要成分為苷類、黃酮類、多糖等，紅景天苷可拮抗耐力運動導致的血漿乳酸鹽脫氫酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血漿肌酸激酶(CK)活性的升高，提高機體內SOD、GSH-PX等抗氧化酶的活性，降低MDA含量，從而延緩耐力運動引起的肝、肌糖原的降低和防止運動后血糖的降低，加速乳酸的清除，抑制血氨的生成，緩解中樞疲勞。研究證實，紅景天的免疫補益作用強于人參、刺五加,服用時無人參燥熱不宜久服及刺五加易引起便秘的缺點,無副作用,無成癮性,能提高機體對環境的適應能力,使機體的生理功能在變化的環境中迅速得到調節。
巴戟天為茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的干燥根，其味甘、辛，微溫，歸腎、肝經，具有補腎陽，強筋骨，祛風濕的功效，用于中醫治療如腎虛陽痿、遺精早泄、少腹冷痛、小便不禁、宮冷不孕、風寒濕瘦、腰膝酸軟、風濕肢氣等癥。現代醫學研究表明，巴戟天具有提高機體免疫力、抗衰老、抗腫瘤、強壯骨骼、促進造血干細胞增殖和分化等作用，可抗疲勞和提高機體運動能力。巴戟天屬植物的主要成分為蒽醌類、環烯醚萜類、糖類、有機酸類和氨基酸等。血乳酸(BLA)、血清尿素氮(BUN)、肝糖原(LG)含量通常作為檢測疲勞的生化指標，巴戟天通過抑制BLA、BUN的生成和增加肝糖原儲備來延緩運動性疲勞的產生，通過抑制耐力運動造成的心肌線粒體氧化損傷，改善、延緩疲勞的發生。
雄蠶蛾為蠶科動物家蠶雄蟲的全體，性咸，溫，歸肝、腎經，具有補腎壯陽，澀精，止血，解毒消腫之功效。現代科學研究表明，蠶蛾體內含有豐富的生物活性物質,主要包括雄性激素、蛻皮激素、雌二醇、保幼激素、腦激素等。其中，雄性激素對增強人體免疫力和性功能效果顯著；蛻皮激素具有促進細胞生長,刺激真皮細胞分裂,產生新的生命細胞和生殖細胞的作用；雌二醇臨床用于卵巢功能不全或卵巢激素不足引起的各種癥狀,如功能性子宮出血、原發性閉經、絕經期綜合癥以及前列腺癌等；保幼激素有增加免冠動脈血流量、控制特異性蛋白質合成、促進生長、阻止老化的功效；腦激素對中老年人有極好的保健作用,服用一定量的腦激素可以促進細胞生長,刺激真皮細胞分裂,控制特異性蛋白合成,并推遲更年期的到來,達到延緩衰老的目的。此外，雄蠶蛾還含有豐富的細胞色素C、維生素、煙酸和蛻皮酮等多種成分,對調節人體機能有極好的功效。
上述六味藥材中，人參、黃芪合為君藥，能大補元氣，補氣升陽，生津養血；三七和紅景天為臣藥，能使益氣、活血相輔相成；巴戟天和雄蠶蛾為佐使藥，能強筋健骨，補肝益腎。總之，本發明的配方具有益氣補脾、養血和血、強筋健骨、補肝益腎、壯陽填精之功效，可有效治療運動性疲勞，顯效快，無毒副作用。
具體實施方式
【實施例1】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天20％，人參10％，巴戟天20％，三七20％，黃芪20％，雄蠶蛾10％。
該中藥組合物的制備方法依次包括以下步驟：
(1)按配比稱取紅景天、人參、巴戟天、三七、黃芪和雄蠶蛾六味中藥，分別磨碎后過40目篩；
(2)以1:8的料液比，將磨好的紅景天粉末、人參粉末、三七粉末與體積濃度為70％的乙醇混合，然后在85℃下回流提取兩次，每次2h，收集并合并兩次回流提取的濾液，減壓回收乙醇，并使濾液濃縮至稠膏，再將稠膏減壓干燥，得到藥粉備用；
(3)以1:6的料液比，將磨好的黃芪粉末與水混合，然后在100℃下回流提取三次，每次1.5h，收集并合并三次回流提取的濾液，往濾液加入體積濃度為80％的乙醇，濾液中析出沉淀物，再將沉淀物減壓干燥，得到黃芪藥粉備用。
(4)將磨好的雄蠶蛾粉末、步驟(2)所得藥粉與步驟(3)所得黃芪藥粉混合均勻，得到的混合物即為所述中藥組合物。
(5)將步驟(4)所得混合物與糊精按2.5:1的比例混合均勻，噴入無水乙醇并迅速攪拌混合，利用18目篩制成濕顆粒，將濕顆粒于60℃下干燥，然后利用80目篩進行整粒，最后將整粒后的顆粒灌入膠囊，制備成膠囊劑。
【實施例2】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天15％，人參15％，巴戟天20％，三七15％，黃芪20％，雄蠶蛾15％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
【實施例3】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天15％，人參15％，巴戟天25％，三七10％，黃芪25％，雄蠶蛾10％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
【實施例4】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天16％，人參20％，巴戟天22％，三七10％，黃芪22％，雄蠶蛾10％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
【實施例5】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天18％，人參10％，巴戟天30％，三七12％，黃芪20％，雄蠶蛾10％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
【實施例6】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天15％，人參12％，巴戟天20％，三七10％，黃芪30％，雄蠶蛾13％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
【實施例7】
本實施例提供的抗運動性疲勞的中藥組合物，由以下重量百分比的中藥原料制成：紅景天15％，人參15％，巴戟天20％，三七10％，黃芪20％，雄蠶蛾20％。
該中藥組合物的制備方法與實施例1相同。
實施例1-7的中藥配方均具有治療運動疲勞癥狀的功效。本發明的實施方式不限于上述實施例，本發明的抗運動性疲勞的中藥組合物還可輔以藥學可接受的賦形劑，如預膠化淀粉、糊精和微晶纖維素等，制成除膠囊劑外的顆粒劑、丸劑、散劑、口服液等制劑。
【藥效學實驗】
1.實驗一：對H2O2誘導損傷的PC12細胞的保護
1.1實驗主要材料
PC12細胞(購于美國模式菌種收集中心ATCC)、新生牛血清、改良型RPMI-1640培養基、H2O2、MTT(購于美國Sigma公司)、96孔培養板(購于丹麥NUNC公司)、NU2500E型CO2培養箱(購于英國forma scientif公司)。
1.2實驗方法
(1)PC12細胞培養
用含10％新生牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的RPMI-1640培養基在37℃、50ml/L CO2的條件下常規培養PC12細胞。
(2)分組
實驗分為空白組、正常組、模型組和給藥組。空白組無PC12細胞，正常組為不加藥的PC12細胞，模型組為加入H2O2培養的PC12細胞，給藥組為加入受試中藥樣品后再加入H2O2培養的PC12細胞，受試中藥樣品為實施例1所得的中藥組合物。各組的具體培養步驟如下：
空白組將160μL含血清的RPMI-1640培養液加到96孔細胞培養板的每個孔中。其余每組將60μL含血清的RPMI-1640培養液、100μL濃度為3.0×104cells/ml的PC12單細胞懸液，加到96孔細胞培養板的每個孔中。各組接種好的培養板放置于CO2培養箱內培養24h后給藥。空白組，正常組和模型組分別每孔加入RPMI-1640培養液40μL，而給藥組每孔加入含受試中藥樣品的RPMI-1640培養液40μL，輕輕震蕩搖勻。
給藥后各組繼續培養24h后，小心吸棄每組培養板的原培養液。空白組和正常組分別每孔加入200μL RPMI-1640培養液；模型組和給藥組分別每孔加入200μL含50μmol·L-1H2O2的RPMI-1640培養液，損傷2h，然后小心吸棄含H2O2的培養液，沿每孔孔壁邊緣緩慢地加入含血清的RPMI-1640培養液180μL。各組的培養板放置于CO2培養箱內繼續培養42h。
(3)PC12細胞存活率檢測：以細胞形態學和MTT法測定的細胞存活率。
1.3實驗結果
1.3.1細胞形態學觀察
與正常組比較，模型組細胞數量大量減少，多數細胞突起收回，胞體變圓，部分變圓細胞成團存在，胞體邊緣模糊，折光性減弱，貼壁能力降低，培養板底部可見細胞碎片；與模型組比較，給藥組整體細胞數量和梭形細胞數量顯著上升，細胞胞體較損傷組大，突起長，成團細胞數降低，細胞折光性和貼壁能力恢復良好。
1.3.2 MTT法測定的細胞存活率
數據處理結果以均數±標準差來表示，并用t檢驗對實驗數據進行統計學分析，結果如表1所示。
表1 PC12細胞存活率的實驗結果
注：模型組與正常組比較有統計學意義**P<0.01
給藥組與模型組比較有統計學意義##P<0.01
根據表1中結果所示，與正常組比較，經濃度為50μmol·L-1的H2O2-RPMI-1640培養液損傷2h后，模型組的細胞存活率為26.9％(P<0.01)；給藥組顯示受試中藥具有提高細胞存活率的趨勢，有極顯著意義(P<0.01)。
上述實驗結果表明：本發明的中藥組合物能有效保護H2O2誘導損傷的PC12細胞。
2.實驗二：臨床試驗
2.1.受試者概況
男性大學生運動員100人，均來自華南師范大學體育學院，年齡最大者23歲，最小者19歲。身體健康，經常規體檢未發現異常，個人主訴無任何不適。根據運動性疲勞病例選擇標準，從運動過后的所有運動員中，篩選出符合標準的90人，用于之后的分組給藥臨床試驗。
2.2.病例選擇標準
2.2.1.西醫診斷標準
參照《主觀體力感覺等級量表》(RPE)。
《主觀體力感覺等級量表》(RPE)是瑞典著名心理學家Borg根據運動時的中樞疲勞和周圍疲勞信號綜合制定的，作為判斷運動負荷和疲勞程度的一項指標，它已被世界各地廣泛地應用。
2.2.2.中醫診斷標準
參照《運動性疲勞中醫證候調查表》標準(運動性疲勞中醫證候特征的研究.[J]北京中醫藥大學學報,2008,31(6):369～372.)
2.2.3.納入標準
①年齡為19～23歲，身體健康，經常規體檢未發現異常。
②800米全力跑之后可以達到中度或重度運動性疲勞判斷標準者。
2.2.4.排除標準
①800米全力跑之后無法達到中等或以上運動性疲勞判斷標準者。
②在近期有運動損傷，尚未能恢復正常訓練者。
③不能嚴格按照實驗要求完成治療者。
2.3.臨床試驗方法
(1)分組
將90名受試者分成治療組30人，對照組30人，空白組30人。三組受試者的年齡、身高及體重情況經t檢驗等統計學分析，無顯著性差異(P﹥0.05)，具有可比性，數據結果以均數±標準差(x±s)來表示，見表2。
表2受試者一般情況比較
(2)服藥方法
治療組服用實施例1制備所得的膠囊，一次10克(以有效成分計量)，一日3次，6天為一療程；對照組服用市售的消疲靈顆粒，開水沖服。一次10克(以有效成分計量)，一日3次，6天為一療程。空白組不服用藥物。
2.4.觀察指標
2.4.1.療效性指標
①血乳酸，采用日本京都血乳酸測定儀(ARKRAY株式會社制造)測定。
②肺活量。
2.4.2.癥狀指標
采用瑞典著名心理學家Borg制定的《主觀體力感覺等級量表》(簡稱RPE)以問卷的方式對受試者進行主觀體力感覺問卷評分，具體參見表3。
表3主觀體力感覺等級量表
2.4.3.統計學方法：
所得數據運用SPSS 11.0軟件進行處理分析，數據結果以均數±標準差(x±s)來表示，采用t檢驗。
2.5.療效評定標準
①臨床治愈：自我感覺無任何不適，呼吸平穩，動作輕穩，注意力比較好。
②顯效：自我感覺無任何不適，呼吸中等加快，動作輕穩，注意力比較好。
③有效：自我感覺疲乏、腿痛、心悸，呼吸顯著較快，步伐搖擺不穩，注意力不易集中。
④無效：治療前后的各項體征沒有改變。
2.6.療效分析
表4有氧運動結束10分鐘后的血乳酸清除效果比較
注：與運動前比較，*P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05。
有氧運動時，肌肉劇烈收縮，由于供氧不足單靠有氧氧化不能滿足能量需要，會產生大量的乳酸，使得肌肉酸堿值降低，產生一系列的生化反應，這是引起疲勞的重要原因之一。
根據表4中結果所示，治療組與空白組相比有顯著差異，且治療組在運動前后的血乳酸值也有顯著差異，而對照組卻沒有明顯差異，因此證明本發明的中藥組合物具有較強的血乳酸清除效果，能延緩疲勞產生。
表5有氧運動前和有氧運動結束10分鐘后的肺活量比較
注：與運動前比較，*P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05。
根據表5中結果顯示，治療組與空白組相比有顯著差異，且治療組在運動前后的肺活量也有顯著差異，而對照組卻沒有明顯差異，因此證明本發明的中藥組合物具有較強的增強肺活量效果，能治療疲勞癥狀。
表6主要癥狀體征改善比較
注：“前”表示用藥前具有相應癥狀的例數，“后”表示用藥后具有相應癥狀的例數，“％”表示用藥后相應癥狀的恢復率，具體為
根據表6中結果所示，與空白組比較，治療組和對照組都有顯著差異，而治療組運動性疲勞癥狀的改善效果明顯優于對照組。
表7臨床效果比較
注：與對照組比較，*P﹤0.05；
根據表7中結果所示，治療組與對照組相比有顯著差異，說明本發明的中藥組合物能有效治療運動性疲勞。
2.7.結果分析
表6和表7顯示，本發明的中藥組合物能夠較為有效地改善運動性疲勞的癥狀，按照公認的療效標準，總體治療運動性疲勞癥狀具有較好的臨床療效，并且與對照組藥物相比較，差異性具有顯著性意義(P﹤0.05)。
在臨床觀察過程中，未發現本藥物有任何不良毒副反應，標明本藥物為一種安全有效的制劑。
總而言之，相對于現有技術，本發明抗運動性疲勞的中藥組合物，具有益氣補脾、養血和血、強筋健骨、補肝益腎、壯陽填精之功效，可有效治療運動性疲勞，顯效快，并且無毒副作用。