本發明涉及一種藥食兩用單體的制備方法，具體涉及一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法。

背景技術：

中醫藥治療高尿酸血癥和原發性痛風的報道較多。在臨床實踐和日常生活中，人們發現一些能治療高尿酸血癥的行之有效的單味中藥，其中很多藥物的活性成分及藥理作用已經被闡明。如萆薢、秦皮、白艾、朝鮮薊、威靈仙、車前子、黃柏、金錢草、秦艽等有一定的降尿酸作用^[1,2]。研究顯示，淫羊藿、薏苡仁、澤瀉、車前子、秦艽能增加尿酸排泄，秦艽還可增加尿酸的溶解；澤蘭、當歸可抑制尿酸合成。另有研究顯示，秦皮、車前草、大黃、蒼術可促尿酸從腎排除，大黃能促尿酸從大便排出體外；百合、山慈菇等具有類秋水仙堿樣作用，可抑制白細胞趨化性，從而減輕痛風性關節炎的炎癥反應；冬瓜皮、大腹皮、桑白皮、陳皮、木香、茯苓皮等行氣利水藥可提高內生肌酐清除率，增加尿量，排出尿酸，降低血尿酸^[3,4]。

菟絲子為旋花科植物南方菟絲子(Cuscuta australis R.Br.)或菟絲子(Cuscuta chinensis Lam.)的干燥成熟種子，甘、溫，歸腎、肝、脾經，具有滋補肝腎、固精縮尿、安胎、明目、止瀉之功效。菟絲子的主要化學成分為樹脂樣糖甙、膽甾醇、蕓苔甾醇(Campesterol)、谷甾醇、豆甾醇及三萜酸類、糖類等。菟絲子含有豐富的化學成分，在補腎壯陽、提高免疫能力、抗衰老、保肝明目、保胎、調節下丘腦-垂體-卵巢軸功能、調節內分泌、治療心血管疾病、促進性腺激素樣作用等方面具有廣泛的藥理作用。菟絲子有縮尿與抗遺尿作用，入腎經，“腎主水液”，味甘補腎，腎氣足則固攝有力，使膀胱開合有度，司尿液排泄；入肝脾經，脾主運化水液，肝協助水液代謝。菟絲子復方給予小鼠灌胃，能降低排尿量和減少排尿次數。

中藥治療高尿酸血癥及痛風的療效顯著，但中藥在使用過程中存在不足表現在幾個方面：1、常規制備及服用方法不方便，如煎煮法，耗時、服用時味道重，且因個人的煎煮時間和煎煮方法不同，療效不能完全保證；2、服用劑量大，煎煮或直接粉碎制備的劑型，組成成分包括了有效組分和無效組分，服用劑量大，不能達到專病專治的效果，且有可能產生毒副作用；3、運用現代分離純化技術獲取單體化合物產率低、成本高，不易實現規?；彤a業化；4、通過現代合成技術實現該單體化合物群尚有一定技術難度，且成本高。

[1]林偉青,謝健,王海東.白艾提取液對高尿酸血癥大鼠的實驗研究[J].中華風濕病學雜志,2005,9(8):509-510.

[2]林鳳平,任開明,宋恩峰等.威靈仙對尿酸性腎病大鼠的實驗研究[J].中成藥,2006,28(6):842-845.

[3]李表,孫林.現代腎臟病治療學[M].南昌:江西科學技術出版社,2000,537-543.

[4]沈慶法.中醫臨床腎臟病學[M].上海:上?？茖W技術文獻出版社,1998,206-211.

技術實現要素：

針對上述中藥在使用過程中存在不足表現的問題，本發明提供一種用量小、使用方便、不良反應少、成本低、功效明顯、易于工業化的防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法。

本發明的目的將通過以下技術方案實現：一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，粗提?。簩⑤私z子原料粉粹后，稱取一定質量的原料，加入20倍量60％乙醇加熱回流2h后，分離出藥渣，將藥渣中加入15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液，高速離心，棄去不溶物，減壓蒸餾乙醇得到粗提取液；

步驟二，色譜柱純化：將步驟一中粗提取液上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，即為提取液；

步驟三，檢測分析：將步驟二中的提取液用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，將所得洗脫液制備成產品。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述步驟一中，菟絲子包括菟絲子苷A、菟絲子苷B、新菟絲子苷A、新菟絲子苷B、新菟絲子苷C中的一種或多種。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述步驟三中，洗脫液加工的產品包括膠囊劑、片劑、合劑、食品添加劑以及保健茶。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述膠囊劑的制備方法為：真空濃縮，真空干燥或噴霧干燥得細粉，加6倍量20％淀粉糊，制粒裝膠囊。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述片劑的制備方法為：所得洗脫液真空干燥或噴霧干燥得細粉，加入6倍量20％淀粉糊、1倍量10％PVP(聚維酮)乙醇液，制粒，烘干，壓片。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述合劑的制備方法為：所得洗脫液濃縮或稀釋至相對密度1.2的浸膏，裝瓶制作口服液。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述食品添加劑的制備方法為：所得洗脫液真空濃縮，真空干燥或噴霧干燥得細粉，即可作為食品添加劑。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述食品添加劑的制備方法為：所得洗脫液濃縮為相對密度1.2的浸膏，即可作為保健食品添加劑。

優選的，所述的一種從菟絲子中提取防治高尿酸血癥及痛風藥食兩用單體的制備方法，所述保健茶的制備方法為：所得洗脫液減壓濃縮至相對密度1.2的浸膏，與鐵觀音茶葉按1：25的質量比混合，置于55℃條件下烘干8小時，再粉碎成20目，滅菌包裝入庫，制成6g一包的降尿酸保健茶。

本發明的有益效果是：本發明所述菟絲子含有苯丙素類化合物，本發明所述單體由雙駢四氫呋喃環連接糖基組成，在中等極性溶劑中如正丁醇、乙酸乙酯等溶解性較好，并且具有一定水溶性。本發明采用60％乙醇煎煮提取，極性大孔樹脂純化，有目的的富集目標單體化合物群，成本低，收率高，容易實現產業化和規?；?。該發明制備的膠囊劑、片劑、保健茶劑等，服用方便化、具有多元化特點。

附圖說明

圖1為本發明實施例6空白組的病理解剖圖；

圖2為本發明實施例6模型組的病理解剖圖；

圖3為本發明實施例6高劑量組的病理解剖圖。

具體實施方式

為更好地理解本發明，下面通過以下實施例對本發明作進一步具體的闡述，但不可理解為對本發明的限定，對于本領域的技術人員根據上述發明內容所作的一些非本質的改進與調整，也視為落在本發明的保護范圍內。

實施例1、基于本發明膠囊劑的制備

1)稱取原料藥菟絲子，3#空膠囊殼若干備用；

2)原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，真空干燥或噴霧干燥得細粉，加入6倍量的20％淀粉糊，制粒，烘干，裝入3#空膠囊殼，每?？漳z囊殼裝內容物約0.32g，潔凈、選粒，制成適當包裝規格的成品。

實施例2、基于本發明片劑的制備

1)稱取原料藥菟絲子備用；

2)原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，真空干燥或噴霧干燥得細粉，加入5倍量20％淀粉糊、1倍量10％PVP(聚維酮)乙醇液，制粒，烘干，壓制成片重為約0.4g的原片，包糖衣，選片，制成適當包裝規格的成品。

實施例3、基于本發明合劑的制備

1)稱取原料藥菟絲子，10ml規格口服液小瓶及瓶蓋備用；

2)原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，濃縮至相對密度1.2，加入甜味劑、防腐劑、澄清劑等，放置，濾過，取濾液，滅菌，灌裝成10ml/支的口服液，軋蓋，制成適當包裝規格的成品。

實施例4、基于本發明保健食品添加劑的制備

1)稱取原料藥菟絲子備用；

2)原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，濃縮至相對密度1.2，滅菌，適當容器密封，作為保健食品添加劑；或真空濃縮，真空干燥或噴霧干燥得細粉，適當容器密封，作為保健食品添加劑。

實施例5、基于本發明保健茶的制備

1)稱取原料藥菟絲子，鐵觀音茶若干備用；

2)原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，濃縮至相對密度1.2，與鐵觀音茶葉按1：25質量比混合，置于55℃條件下烘干8小時，再粉碎成20目，滅菌，制成6g一包的降尿酸保健茶。

實施例6、本發明改善痛風性腎病病理

實驗動物：KM小鼠，SPF級，雄性，體重18-22g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。正常飼養3天后供試。

藥物與試劑：菟絲子(廣州市藥材公司中藥飲片廠)。

本發明產品制備：原料藥材菟絲子加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，真空干燥或噴霧干燥得細粉，，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。

取KM小鼠80只，平均分為四組，，灌胃前禁食10h，禁水6h。每天灌胃兩次，每次0.6ml，連續14天，停藥后再觀察14天。本發明空白組：給予等量蒸餾水；模型組：別嘌呤醇0.04g/kg/d給藥，高劑量組：所述產品劑量為6.00g/kg/d，相當于人用量的3000倍。

試驗結果：(1)空白組(10只)：由圖1可知，腎皮質內腎小球分布均勻，10倍物鏡下腎小球數量為15～20個，腎小管上皮細胞分布完整，腎小管管腔內未見管型，腎間質未見出血、炎細胞浸潤及尿酸鹽結晶。(2)模型組(10只)：由圖2可知，腎皮質腎小球數量有所減少，10倍物鏡下腎小球數量為5～10個，腎小管灶狀萎縮，個別腎小管管腔內見蛋白管型，未見尿酸鹽沉積，腎間質見出血及灶性淋巴細胞浸潤。(3)高劑量組(10只)：由圖3可知，腎小球減少程度、腎小管萎縮均較模型組為輕，腎小管管腔內未見管型及尿酸鹽結晶，腎間質未見出血及淋巴細胞浸潤。

試驗結論：本發明之單體可改善痛風性腎病

實施例7、本發明亞慢毒性試驗

實驗動物：KM小鼠，SPF級，雄性，體重18-22g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。正常飼養3天后供試。

藥物與試劑：菟絲子(廣州市藥材公司中藥飲片廠)。

本發明產品制備：原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，真空干燥或噴霧干燥得細粉，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。

取KM小鼠80只，平均分為四組，，灌胃前禁食10h，禁水6h。每天灌胃兩次，每次0.6ml，連續14天，停藥后再觀察14天。本發明藥物小劑量組：劑量為0.06g/kg/d，相當于人用量30倍；本發明藥物中劑量組：劑量為0.60g/kg/d，相當于人用量的300倍；本發明藥物大劑量組：劑量為6.00g/kg/d，相當于人用量的3000倍；對照組：給予等量蒸餾水。

試驗結果：各組小鼠動物給藥5h內食量減少，活動減弱，藥物色溏便等，停藥后恢復正常。各試驗組在給藥14d和停藥后第14天時的平均體重與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。試驗組小鼠的紅細胞總數、白細胞總數、血紅蛋白含量、血小板數在停藥后第1天及停藥后第14天與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。各個試驗組小鼠的血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶在停藥后第1天及停藥后第14天與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。在停藥后第1天和第14天，剖檢見各組心、肝、脾、肺、腎、胃和腸的形態、顏色、質地正常。病理組織學檢查。本發明的高、中、低劑量組和對照組小鼠均未見明顯病理變化。

經過實驗，本發明的高、中、低劑量組均高于臨床治療劑量，在相應療程內未發現任何亞慢性毒性反應。結合急性毒性試驗，其用量相當于人用量的3000倍也未見任何毒副反應，因此本發明可作為防治高尿酸血癥、痛風藥用保健食品兩用配方及制劑。

試驗結論：本發明之亞慢性毒性試驗表明本發明安全無毒。

實施例8、本發明急性毒性試驗

實驗動物：KM小鼠，SPF級，雄性，體重18-22g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。正常飼養3天后供試。

藥物與試劑：菟絲子(廣州市藥材公司中藥飲片廠)。

本發明產品制備：原料藥材加20倍量60％乙醇冷浸泡1d，加熱回流提取2h，藥渣加15倍量60％乙醇加熱回流1.5h，合并提取液次，減壓回收乙醇，高速離心濃縮液得濾液，上AB-8型大孔樹脂柱，靜態吸附2小時，用10BV水洗脫，棄去洗脫液，再用不同濃度乙醇由低至高依次洗脫，用薄層色譜法鑒別洗脫液中是否含有單體化合物群中某一單體及其相對含量，收集具有高占比目標化合物的洗脫液并合并，真空干燥或噴霧干燥得細粉，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。

取KM小鼠80只，平均分為四組，灌胃前禁食10h，禁水6h。每天灌胃兩次，每次0.6ml，連續7天。本發明藥物小劑量組：劑量為0.06g/kg/d，相當于人用量30倍；本發明藥物中劑量組：劑量為0.60g/kg/d，相當于人用量的300倍；本發明藥物大劑量組：劑量為6.00g/kg/d，相當于人用量的3000倍；對照組：給予等量蒸餾水。

試驗結果：實驗7天小鼠全部存活，僅見動物給藥5h內食量減少，活動減弱，藥物色溏便等，停藥后恢復正常。4組動物在飲水、毛色、體重、糞便、及心、肝、脾、肺、腎、胸腺、腦、舌、胃、腸、膀胱、性腺(子宮、卵巢或睪丸和附睪)等主要臟器的形態、大小、光滑度等方面均無明顯差異。以上說明，本發明毒副作用小，而且因受藥物濃度和體積限制，找不出引起小鼠死亡的劑量，故無法測出本發明的LD50。

實驗結論：本發明之急性毒性試驗表明本發明安全無毒。

以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。