本發明屬于藥物領域，具體地，涉及一種預防和治療心肌缺血的藥物組合物及其制備方法和用途。
背景技術：
：現代社會由于生活節奏的加快、過量飲酒、營養攝入過剩、缺乏必要的運動及環境污染等，導致了心腦血管疾病成為威脅人類健康的常見病之一，具有高患病率、高致殘率和高死亡率的特點，據統計，目前心腦血管疾病已成為全世界人類死亡的首要原因。心肌缺血為心腦血管疾病的常見疾病之一，一般是指由于心臟的血液灌注的減少，導致了心臟的供氧減少，心肌能量代謝失常，從而不能支持心臟正常工作的病理狀態，臨床癥狀主要包括勞累或精神緊張時出現胸悶、心悸、氣短等，有發生心絞痛、心肌梗塞和猝死的風險。由于生活水平的提高，心肌缺血已經不再僅是老年人身體健康的威脅，開始呈現出年輕化的趨勢，在30歲以下的人群中也已開始出現心肌缺血的相關癥狀，從而嚴重威脅著人類的身體健康。心肌缺血是由于心臟的血液灌注的減少所誘發，因此，目前，針對于心肌缺血的治療主要集中于藥物治療及外科手術治療，其中藥物治療集中于使用硝酸酯類藥物等擴張冠狀動脈，增加心肌供血供氧；使用β受體阻斷劑減慢心率或使用鈣離子拮抗劑抑制心肌的收縮等，從而減少心肌的耗氧量；使用抗血小板藥物、他汀類藥物、溶栓藥物等，預防或溶解血栓等。上述藥物治療往往僅能起到緩解癥狀的效果，并且副作用較大，甚至還會加劇相應癥狀，因此，治療效果并不理想。1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine-1-phosphate，簡稱S1P)是鞘磷脂代謝的中間產物之一，具有重要的生理功能，其受體廣泛表達于內皮細胞、血管平滑肌細胞及心肌細胞等，因此，S1P可廣泛發揮血管內皮保護、心肌缺血/再灌注的保護等作用，還可以降低心室肌動作電位幅值、延長動作電位時程、增加心肌收縮力，從而可以在發揮心肌缺血/再灌注保護作用的同時，有利于糾正心肌缺血時心肌的非正常工作狀態。本發明即是針對1-磷酸鞘氨醇進行研究，致力于開發出一種心肌缺血預防和治療效果更好的藥物組合物。技術實現要素：本發明的一個目的是提供一種包含1-磷酸鞘氨醇的預防和治療心肌缺血的藥物組合物，所述藥物組合物以1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥為活性成分。其中所述藥物組合物中1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥的質量比為5-10∶5-10∶1-5，優選為6-8∶6-8∶2-4，更優選的為6∶6∶2、7∶7∶2、8∶8∶2、6∶6∶3、7∶7∶3、8：8∶3、6∶6∶4、7∶7∶4、8∶8∶4。所述抗凝藥選自：肝素、華法令、雙香豆素等。優選的所述抗凝藥為雙香豆素。本發明預防和治療心肌缺血的藥物組合物可以添加藥學上可接受的輔料制備成便于臨床使用的藥物劑型，所述藥物劑型包括口服藥物組合物或胃腸道藥物組合物，所述口服藥物組合物優選為片劑或膠囊劑，所述胃腸道外藥物組合物優選為注射劑或凍干粉針劑。在制備的本發明所述藥物組合物中，作為藥物活性成分的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥的含量為藥物組合物總重量的0.1-10％(重量)。在進一步優選的技術方案中，本發明預防和治療心肌缺血的藥物組合物為膠囊劑，所述膠囊劑包括：1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥和藥學上可接受的輔料，所述藥學上可接受的輔料包括：填充劑、潤滑劑和明膠膠囊殼，所述填充劑選自淀粉、糊精、乳糖或微晶纖維素，所述潤滑劑選自：滑石粉、硬脂酸鎂或微粉硅膠。在更優選的技術方案中，本發明預防和治療心肌缺血的膠囊劑具有以下組成：1-磷酸鞘氨醇4份；萘普生4份；雙香豆素2份；微晶纖維素89份；硬脂酸鎂1份。本發明的另一目的在于提供一種預防和治療心肌缺血的膠囊的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：a)按配比稱取潤滑劑、明膠膠囊殼以外的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥和填充劑混合均勻后粉碎，過50-100目篩，得混合粉，備用；b)在步驟a中制備的混合粉中添加潤滑劑后攪拌均勻得填充粉，備用；c)將步驟b制得的填充粉填充與明膠膠囊殼，即得。本發明的再一個目的是提供1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥在制備預防和治療心肌缺血的藥物組合物中的用途，所述心肌缺血選自心絞痛、心肌梗死或缺血性心肌病。萘普生：又稱甲氧萘普酸，Naproxen，具有解熱、鎮痛、抗炎的效果，用于類風濕性關節炎、強直性脊椎炎、痛經等的治療，鎮痛效果持續時間長、安全性高。抗凝藥：是指具有阻止凝血過程效果的藥物，可用于預防或治療血栓，預防中風或其他血栓相關疾病，包括：肝素、香豆素類抗凝藥、抗血小板藥等。有益效果本發明預防和治療心肌缺血的藥物組合物中活性成分1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥協同作用，多通路的發揮預防和治療心肌缺血的作用，治療效果明確，且安全性高。本發明首次將具有解熱、鎮痛、抗炎作用的萘普生用于心肌缺血的預防和治療，萘普生與1-磷酸鞘氨醇和抗凝藥，如雙香豆素組合后多通路發揮心肌缺血的預防和治療作用，并協同增效，心肌缺血的預防和治療效果明確，且安全性高，可廣泛用于各類心肌缺血及其相關疾病的預防與治療。具體實施方式在下文中更詳細地描述了本發明以有助于對本發明的理解。應當理解的是，在說明書和權利要求書中使用的術語或詞語不應當理解為具有在字典中限定的含義，而應理解為在以下原則的基礎上具有與其在本發明上下文中的含義一致的含義：術語的概念可以適當地由發明人為了對本發明的最佳說明而限定。效果例1：本發明藥物組合物對大鼠的影響(1)大鼠心肌細胞原代培養方法：取出生24h內的SD乳鼠25只，心臟全部取出后，剔除心臟周邊的血凝及纖維組織，消化液(0.125％胰酶+0.05％II型膠原酶)消化，收集細胞，過濾除去未消化組織，接種于培養瓶中，置細胞培養箱(37℃，95％O2+5％CO2)中培養，用差速貼壁法去除纖維細胞，純化心肌細胞。2h后，吸出尚未貼壁的細胞懸液吹勻，調整密度至1×10-6植入24孔板中(每孔500μl)，使細胞均勻分布，加入Brdu至0.1mmol/L，24h換液一次，以后每3-4d換液一次。定期在倒置顯微鏡下觀察細胞生長的情況，培養48h后，隨機分組進行實驗。將細胞以1×106個/ml的密度接種于24孔板中，每孔500μl。37℃、5％CO2飽和濕度條件下培養。原代心肌細胞培養72h后，正常對照組和模型組以500μlDMEM培養液正常培養，各給藥組加入含10％藥液的DMEM培養液，孵育6h后，用冰冷PBS沖洗2遍，模型組及給藥組每孔加入500μl經95％N2-5％O2飽和的Tyrode液，然后將培養板放入一密閉容器內，持續通以混合氣體(95％N2-5％O2)30min后密閉容器，放入孵箱缺氧12h，模擬在體缺血模型。正常組洗凈舊培養基后加入含10g/L葡萄糖的Tyrode液500μl，CO2培養箱中培養12h。每孔加入終濃度為0.5mg/mlMTT無血清DMEM培養液500μl培養4h，然后傾去上清液，加入500μl的DMSO，振搖10min，用全自動酶標儀測定570nm處的吸光度值(OD570nm)，用于定量細胞存活率。將處理后的培養板每孔吸取200μl培養上清液，根據LDH檢測試劑盒說明，檢測LDH活性。(2)具體結果如下：各單味藥對缺氧缺糖的大鼠心肌細胞的影響，將丹參提取物為將丹參醇提和水提浸膏混合即得，刺五加和三七分別提取即得兩味藥的提取物，各提取物的制備方法同實施例1.細胞存活率(MTT)及LDH活性結果如下：分組LDH(U/L)細胞活性(％)對照組16.3±3.7100模型組136.8±11.9##50.6±2.7##給藥組183.6±8.4**66.9±3.6**給藥組297.5±7.3**61.3±3.4**給藥組3112.1±10.652.2±2.9給藥組491.5±9.4**64.7±4.1**給藥組5104.7±8.8*58.1±3.7*給藥組657.4±6.3**$$84.6±3.9**$$給藥組773.6±6.9**73.7±4.3**給藥組868.7±5.8**75.2±3.8**給藥組988.4±6.1**65.8±3.3**給藥組1093.8±7.4**61.2±3.7**＊＊表示經Oneway-ANOVA檢驗與模型組相比，P＜0.01；$$表示經Oneway-ANOVA檢驗與其他給藥組相比，P＜0.01。各給藥組組成為：效果例2：本發明藥物組合物對垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠心電圖的影響1.1實驗藥物(1)本發明藥物組合物：按照8∶8∶4的比例稱取1-磷酸鞘氨醇、萘普生和雙香豆素，混合后添加純凈水配制成含量為20％、10％、5％的高劑量、中劑量和低劑量組混懸液；(2)1-磷酸鞘氨醇組：稱取1-磷酸鞘氨醇后添加純凈水配制成含量為20％的混懸液；(3)萘普生組：稱取萘普生后添加純凈水配制成含量為20％的混懸液；(4)雙香豆素組：稱取雙香豆素后添加純凈水配制成含量為20％的混懸液。1.2實驗方法篩選心電圖正常的SD大鼠70只，雌雄各半，隨機分為7組，每組10只，具體為：空白組、本發明高劑量組、本發明中劑量組、本發明低劑量組、1-磷酸鞘氨醇組、萘普生組和雙香豆素組，每組每天給藥一次，灌胃相應藥物3mL，其中空白組灌胃等體積純凈水。灌胃給藥10天，末次給藥1小時后舌下靜脈注射垂體后葉素1U/Kg，記錄大鼠心電圖，測量注射垂體后葉素30秒內大鼠ST段、T波變化，計算ST段變化抑制率與T波變化抑制率，采用玻片法測量凝血時間，計算凝血抑制率，具體實驗結果見表1、表2。其中ST段變化抑制率＝(空白組-實驗組)/空白組；T波變化抑制率＝(空白組-實驗組)/空白組；凝血抑制率＝(實驗組-空白組)/空白組。1.3試驗結果表1實驗結果顯示了空白組大鼠在注射垂體后葉素后ST段、T波均被明顯抬高，從而表明本實驗模型構建成功。各給藥組的實驗結果則顯示了單獨給予1-磷酸鞘氨醇、萘普生與雙香豆素后，僅1-磷酸鞘氨醇顯示出了改善垂體后葉素致心電圖變化的效果，注射萘普生與雙香豆素后均未顯示出改善垂體后葉素致心電圖變化的效果，從而表明了單獨使用萘普生與雙香豆素時其并不具有改善急性心肌缺血性心電圖變化的作用。而本發明的藥物組合物高、中、低劑量組則均顯示出顯著的改善急性心肌缺血性心電圖變化的作用，其中低劑量組的相應效果與1-磷酸鞘氨醇組大致相當，而本發明藥物組合物低劑量組的給藥量僅為與1-磷酸鞘氨醇組的1/4，從而表明了本發明藥物組合物改善急性心肌缺血性心電圖的變化的效果并非僅依賴于1-磷酸鞘氨醇，而與1-磷酸鞘氨醇組給藥劑量相同的本發明藥物高劑量組的ST段變化抑制率、T波變化抑制率均為1-磷酸鞘氨醇組的兩倍，該實驗結果更加充分的顯示了本發明藥物組合物中1-磷酸鞘氨醇、萘普生與雙香豆素組合后協同發揮了改善急性心肌缺血性大鼠心電圖變化的作用。實驗藥物對垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠心電圖的影響注：與空白組比較：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。實驗藥物對大鼠凝血時間的影響注：與空白組比較：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。表2實驗結果顯示了雙香豆素具有抗凝血作用，而1-磷酸鞘氨醇與萘普生均未顯示出抗凝血效果，但本發明包含1-磷酸鞘氨醇、萘普生與雙香豆素的藥物組合物則顯示出明顯更強的抗凝血作用，其中本發明藥物組合物低劑量組具有與雙香豆素類似的抗凝血作用，但其給藥劑量僅為雙香豆素組的1/4，本發明藥物組合物高劑量組的凝血抑制率明顯高于雙香豆素組，從而表也明了本發明藥物組合物還具有協同抗凝血的效果。實施例1、預防和治療心肌缺血的膠囊劑所述膠囊劑具有以下組成：1-磷酸鞘氨醇4份；萘普生4份；雙香豆素2份；微晶纖維素89份；硬脂酸鎂1份。按照如下步驟制備：a)按配比稱取潤滑劑、明膠膠囊殼以外的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝藥和填充劑混合均勻后粉碎，過100目篩，得混合粉，備用；b)在步驟a中制備的混合粉中添加潤滑劑后攪拌均勻得填充粉，備用；c)將步驟b制得的填充粉填充與明膠膠囊殼，即得。當前第1頁1 2 3