本發(fā)明涉及一種提取野葛莖中總黃酮的方法。

背景技術(shù)：

野葛是豆科蝶形花亞科多年生藤本落葉植物，素有參南葛”、“亞洲人參”之美稱，它是國家衛(wèi)生部批準的藥食同源植物。野葛富含葛根素、大豆苷元等多種黃酮類化合物，是野葛中的主要有效成分。現(xiàn)代醫(yī)學研究表明，野葛中的黃酮類化合物具有治療心腦血管疾病、抗血栓、改善微循環(huán)、防治神經(jīng)性頭痛、降低血糖血脂、增強心肌收縮力、增強免疫力和抗氧化等功效。

目前關(guān)于野葛總黃酮的提取工藝有很多，其中一些是直接利用水溶液來提取，但是這種方法材料降解不完全，提取率很低，而且提取液中混進的雜質(zhì)較多，不利于后期的純化包裝等處理；另外一些是在生產(chǎn)過程中加入纖維素酶和果膠酶等酶類物質(zhì)處理，但是這種方法的缺點是生產(chǎn)成本高，生產(chǎn)工藝安全性差，且加入的酶類物質(zhì)如果去除不完全，對后期產(chǎn)品的質(zhì)量也會產(chǎn)生影響。同時由于目前關(guān)于野葛總黃酮的提取多集中在葛根上，而對野葛莖等其他部位的利用率較少。因此，開發(fā)一種便捷且高效率利用野葛莖這個部位的總黃酮的提取方法意義重大。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供了一種便捷且高效率利用野葛莖這個部位的總黃酮的提取方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種提取野葛莖中總黃酮的方法，其特征在于提取步驟為：

a.原料采集：采集直徑在1～2.5cm之間無病蟲害的野葛莖，用修枝剪將采集的野葛莖剪成5～8cm的小節(jié)，烘干，粉碎；

b.溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:15～1:30的比例加入總黃酮提取液，浸提1.5～3小時，在功率為500～700瓦的微波爐中加熱45～90秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理；

c.洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸將酸堿度調(diào)為中性，過60～80目的聚酰胺粉柱，用80％～95％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位提取的總黃酮粉末。

優(yōu)選的，步驟a中所述的烘干溫度為65℃，烘干至恒重。

優(yōu)選的，步驟b中所述總黃酮提取液為酸堿度為9～10的naoh溶液。

提取野葛莖中總黃酮的含量計算：以葛根素作為對照，采用紫外分光光度法測定野葛莖中總黃酮含量，選取249nm作為試驗測定的檢測波長。精確吸取葛根素標準液0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml，移入10ml容量瓶中，加入90％乙醇至10ml，以90％的乙醇溶液作空白對照，在249nm處測定吸光度，繪制葛根素濃度與吸光度的標準曲線。根據(jù)吸光值計算獲得的總黃酮提取物中的葛根素在單位質(zhì)量野葛莖樣品中的含量比。

采用本發(fā)明的野葛莖的提取物，葛根素的含量比≥1.02％。

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，具體涉及一種采用堿裂解結(jié)合微波加熱的野葛莖中總黃酮的提取方法，具有如下有益效果：

1、本發(fā)明所述的一種提取野葛莖中總黃酮的方法，工藝流程簡單合理，提高了野葛總黃酮的提取率，縮短了提取時間。

2、本發(fā)明所述的一種提取野葛莖中總黃酮的方法，提取液的配制簡單，易操作，成本低，加入的稀鹽酸中和了提取液中的naoh，使后期的產(chǎn)品安全更好，質(zhì)量更高。

3、本發(fā)明所述的一種提取野葛莖中總黃酮的方法，充分利用了野葛資源，減少了浪費，提高了其利用率，值得推廣和應用。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進一步說明。

實施例1

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，包括以下步驟：

1、材料采集：采集直徑為2.5cm無病蟲害的野葛莖以備用；用修枝剪將采集的野葛莖剪成5cm的小節(jié)，烘干，充分粉碎后以備用。

2、溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:30的比例加入酸堿度為9的naoh總黃酮提取液，浸提2小時，接下來在功率為700瓦的微波爐中加熱50秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理。

3、洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸調(diào)為中性酸堿度，過80目聚酰胺粉柱，用90％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位的總黃酮粉末。

4、經(jīng)過計算：單位質(zhì)量樣品中葛根素的含量比為1.15％。

實施例2

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，包括以下步驟：

1、材料采集：采集直徑為2.0cm無病蟲害的野葛莖以備用。用修枝剪將采集的野葛莖剪成6cm的小節(jié)，烘干，充分粉碎后以備用。

2、溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:20的比例加入酸堿度為10的naoh總黃酮提取液，浸提1.5小時，接下來在功率為600瓦的微波爐中加熱70秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理。

3、洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸調(diào)為中性酸堿度，過70目聚酰胺粉柱，用85％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位的總黃酮粉末。

4、經(jīng)過計算：單位質(zhì)量樣品中葛根素的含量比為1.08％。

實施例3

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，包括以下步驟：

1、材料采集：采集直徑為1.5cm無病蟲害的野葛莖以備用。用修枝剪將采集的野葛莖剪成7cm的小節(jié)，烘干，充分粉碎后以備用。

2、溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:15的比例加入酸堿度為9.5的naoh總黃酮提取液，浸提3小時，接下來在功率為500瓦的微波爐中加熱75秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理。

3、洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸調(diào)為中性酸堿度，過80目聚酰胺粉柱，用80％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位的總黃酮粉末。

4、經(jīng)過計算：單位質(zhì)量樣品中葛根素的含量比為1.12％。

實施例4

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，包括以下步驟：

1、材料采集：采集直徑為2.0cm無病蟲害的野葛莖以備用。用修枝剪將采集的野葛莖剪成8cm的小節(jié)，烘干，充分粉碎后以備用。

2、溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:20的比例加入酸堿度為9的naoh總黃酮提取液，浸提2.5小時，接下來在功率為500瓦的微波爐中加熱65秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理。

3、洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸調(diào)為中性酸堿度，過60目聚酰胺粉柱，用95％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位的總黃酮粉末。

4、經(jīng)過計算：單位質(zhì)量樣品中葛根素的含量比為1.09％。

實施例5

本發(fā)明一種提取野葛莖中總黃酮的方法，包括以下步驟：

1、材料采集：采集直徑為1.0cm無病蟲害的野葛莖以備用。用修枝剪將采集的野葛莖剪成5cm的小節(jié)，在溫度為65℃的烘干機中烘干至恒重，充分粉碎后以備用。

2、溶解提取：將烘干、充分粉粹后的野葛莖過100目篩子，按照固液比為1:25的比例加入酸堿度為10的naoh總黃酮提取液，浸提2小時，接下來在功率為700瓦的微波爐中加熱45秒，然后將提取液進行抽濾和減壓濃縮處理。

3、洗脫干燥：將處理后的提取液用稀鹽酸調(diào)為中性酸堿度，過70目聚酰胺粉柱，用85％的乙醇洗脫，洗脫液用液氮迅速冷凍固化，放入真空冷凍干燥儀進行干燥，得野葛莖部位的總黃酮粉末。

4、經(jīng)過計算：單位質(zhì)量樣品中葛根素的含量比為1.06％。

雖然以上描述了本發(fā)明的具體實施方式，但是本領域的技術(shù)人員應當理解，這些僅是舉例說明，本發(fā)明的保護范圍是由所附權(quán)利要求書限定的。本領域的技術(shù)人員在不背離本發(fā)明的原理和實質(zhì)的前提下，可以對這些實施方式作出多種變更或修改，但這些變更和修改均落入本發(fā)明的保護范圍。