本發明涉及鹵蟲卵黃蛋白的提取方法及對斑馬魚傷口修復活性的應用，屬于生物醫藥領域。

背景技術：

1、鹵蟲(brine?shrimp)也稱鹽水豐年蟲，為甲殼亞門鰓足綱無甲目鹽水豐年蟲科鹵蟲屬(artemia))水生動物，主要分布在我國西藏和渤海灣地區，是當地重要的生物資源。鹵蟲一般以休眠卵存活，能抵御外界多種極端環境，且具有較長的存活期。鹵蟲休眠卵常作為水產養殖領域各類水產生物幼苗開口餌料在水產養殖行業內廣泛應用，具有營養價值高、使用方便等優勢。

2、鹵蟲雖然在水產養殖中被廣泛利用，但是針對孵化后其作為水生生物食物源提供的營養價值功效成分尚不清楚。由于不同種類的水生生物在不同生理狀態下的營養需求不同，有必要全面評估鹵蟲的功效成分，探明鹵蟲作為開口餌料的活性成分的含量和種類，進一步擴大鹵蟲卵在水產領域或新資源蛋白食品領域的應用范疇，以便針對性地制備水生生物所需的餌料成分，同時針對其功能活性成分，充分將當地的鹵蟲資源進行深入挖掘和合理使用。

技術實現思路

1、技術問題：鹵蟲對水生生物提供的營養價值功效成分尚不清楚，難以針對性地提供水生生物所需的餌料成分。

2、技術方案：為解決上述問題，本發明提供孵化后鹵蟲卵黃蛋白在斑馬魚組織傷口修復功能性中的應用。

3、本發明提供了以卵黃蛋白為主要活性物質的組合物在制備促進傷口修復的產品中的應用。

4、在一種實施方式中，所述卵黃蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。

5、在一種實施方式中，所述產品中，所述卵黃蛋白的含量不低于50mg/l或0.1mg/g。

6、在一種實施方式中，所述產品用于水生生物。

7、在一種實施方式中，所述水生生物包括但不限于斑馬魚。

8、在一種實施方式中，所述以卵黃蛋白為主要活性物質的組合物的制備方法為：

9、(1)將孵化后的鹵蟲溶解在含10-14％w/v氫氧化鈉和3％-6％w/v的尿素低共熔溶劑中，進行2-4次冷凍解凍循環，得到樣品1；

10、(2)將步驟(1)得到的樣品1溶解后，振蕩至少2h，離心收集沉淀；

11、(3)將步驟(2)得到的沉淀溶解于氯化鈉溶液，振蕩后離心收集濾液；

12、(4)將步驟(3)所述濾液的ph調節至3.9-4.7，得到卵黃粗蛋白；

13、(5)將步驟(4)所述卵黃粗蛋白進行透析、干燥，得到卵黃蛋白。

14、在一種實施方式中，所述產品包括飼料或藥品，所述藥品還含有常規載體和/或輔料。

15、在一種實施方式中，所述常規載體包含微囊、微球、納米粒和/或脂質體。

16、在一種實施方式中，所述輔料包含賦形劑和/或附加劑。

17、在一種實施方式中，所述藥品的劑型包括粉劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液。

18、本發明還提供了卵黃蛋白在制備具有抗氧化功能的產品中的應用，所述卵黃蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。

19、在一種實施方式中，所述產品包括飼料、藥品或保健品。

20、在一種實施方式中，所述抗氧化功能包括以下至少一種：

21、(1)提高超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的活力；

22、(2)降低丙二醛的活力。

23、有益效果：

24、本發明從鹵蟲卵中提取出卵黃蛋白，通過體內實驗證實，所述卵黃蛋白有利于斑馬魚的組織傷口修復，并提高了斑馬魚的抗氧化功能。

技術特征：

1.以卵黃蛋白為主要活性成分的組合物在制備促進傷口修復的產品中的應用，其特征在于，所述卵黃蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。

2.如權利要求1所述應用，其特征在于，所述產品中，所述卵黃蛋白的含量不低于50mg/l或0.1mg/g。

3.如權利要求2所述應用，其特征在于，所述產品應用于水生生物，所述水生生物包括但不限于斑馬魚。

4.如權利要求3所述應用，其特征在于，所述組合物的制備方法為：

5.如權利要求4所述應用，其特征在于，所述產品包括飼料或藥品；所述藥品還含有常規載體和/或輔料。

6.如權利要求5所述應用，其特征在于，所述常規載體包含微囊、微球、納米粒和/或脂質體。

7.如權利要求6所述應用，其特征在于，所述藥品的劑型包括粉劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液。

8.卵黃蛋白在制備具有抗氧化功能的產品中的應用，其特征在于，所述卵黃蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。

9.如權利要求8所述產品，其特征在于，所述產品包括飼料、藥品或保健品。

10.如權利要求9所述應用，其特征在于，所述抗氧化功能包括以下至少一種：

技術總結
本發明公開了鹵蟲卵黃蛋白的提取方法及對斑馬魚傷口修復活性的應用，屬于生物醫藥領域。本發明利用稀堿尿素復合溶液破壞鹵蟲外殼，采用等電沉淀的方法從鹵蟲體內中提取卵黃蛋白，并通過特異性染色和高分辨質譜技術鑒定該蛋白為一種含磷脂的糖蛋白。進一步的研究通過斑馬魚尾鰭傷口修復模型證實，鹵蟲卵黃蛋白能夠促進斑馬魚組織的損傷修復。這一作用主要通過促進炎癥因子的分泌和發揮組織氧化損傷自由基清除功能來實現。本研究不僅揭示了鹵蟲卵黃蛋白的生物學活性，還拓展了其在水產養殖領域的應用范圍。

技術研發人員：馮建慧,曹文浩,許波,李群英,王鵬飛,王振華
受保護的技術使用者：煙臺大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28