本發明涉及植物提取物領域，特別涉及蛇莓葉提取物在制備治療急性髓系白血病方面的應用。

背景技術：

1、蛇莓(duchesnea?indica(andr.)focke)為薔薇科蛇莓屬的多年生草本植物，富含三萜、有機酸、酚類、黃酮類、甾體類等化學成分。蛇莓最早記載于《名醫別錄》：“蛇莓，主胸腹大熱不止”，具有清熱，涼血，消腫，解毒之功效。

2、急性髓系白血病(acute?myloid?leukemia,aml)是急性白血病的一種，是一類造血干細胞惡性克隆的血液疾病。aml的主要病發部位在骨髓和血液，中醫學認為aml發病多為氣血虧虛，內毒自生，另有外邪侵犯，致使內外合毒，損及臟腑，攻入骨髓，擾亂氣血，以致陰陽失調。中醫沒有白血病的稱謂，根據其臨床表現屬于虛勞、血虛、惡核的范疇。由于正氣虧虛(陰虛)，濕熱毒邪內侵，灼傷營陰，入血傷髓，導致了急性白血病的發生。因此，中醫學治療白血病以“清”和“補”為基本原則。因此，本發明以中藥龍葵為研究對象，經體外和體內實驗評價，挖掘具有抑制急性髓系白血病細胞增殖和改善急性髓系白血病小鼠狀態的蛇莓藥用部位。

技術實現思路

1、本發明的目的在于針對現有技術的缺點與不足，提供一種蛇莓葉提取物在制備治療急性髓系白血病藥物中的應用。

2、為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

3、一種蛇莓葉提取物的制備及其在制備治療急性髓系白血病中的應用。

4、本技術方案的原理以及優點在于：

5、發明人進行了大量的實驗驗證探究了一種蛇莓葉提取物在治療急性髓系白血病中的作用，葉優于其他藥用部位，具體如下：

6、(1)一種蛇莓根、莖、葉提取物的制備：將蛇莓的根、莖、葉粉碎，按料液比1：10，加入質量濃度為50％乙醇溶液，超聲輔助提取，浸泡過夜。次日，過濾后合并提取液，真空冷凍干燥，得干燥蛇莓根、莖、葉的50％乙醇提取物。

7、(2)一種蛇莓的根、莖、葉提取物對急性髓系白血病細胞的影響：分別采用40μg/ml的蛇莓根、莖、葉提取物與急性髓系白血病細胞c1498共孵育48h，利用活細胞計數試劑盒(cell?counting?kit,cck-8)檢測細胞的活性。

8、(3)一種蛇莓葉提取物對不同急性髓系白血病細胞的影響：采用不同濃度的蛇莓葉提取物與急性髓系白血病細胞c1498、hl-60和molm-13共孵育48h，cck-8法測定細胞活性并計算ic50值。

9、(4)一種蛇莓葉提取物對急性髓系白血病模型小鼠的影響：首先，采用血涂片觀察小鼠血液中的白細胞及原始細胞比例；統計小鼠的體重變化和生存期。其次，計算小鼠臟器的臟體比并采用h&e染色觀察小鼠臟器的差異。最后，ki67的蛋白免疫組化分析小鼠脾臟中惡性細胞的增殖情況。

10、與現有技術相比，本發明具有如下的優點和有效效果：

11、本發明首次報道了蛇莓葉提取物能夠抑制急性髓系白血病細胞的體外增殖，葉優于其他藥用部位。另外，本發明首次報道了蛇莓葉提取物可延長白血病小鼠的生存期以及可有效改善白血病小鼠的臟器病變。上述發現可提供一種急性髓系白血病藥物的治療藥物，為進一步研究急性髓系白血病的發病提供了新的思路；同時，蛇莓葉提取物可應用于新型的抗急性髓系白血病的藥物篩選和測試中，為開發出新型的治療急性髓系白血病藥物提供了指導。另外，本發明對蛇莓葉的提取方法簡單、工藝可控，且制備周期短，適合工業化的生產與調控。

技術特征：

1.一種蛇莓葉提取物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：分別將蛇莓葉粉碎，按料液比1：10，加入質量濃度為50％乙醇溶液，超聲輔助提取，浸泡過夜。次日，過濾后合并提取液，真空冷凍干燥，得干燥蛇莓葉的50％乙醇提取物。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于所述藥物為藥效最佳的蛇莓葉部位的提取物。

3.一種蛇莓葉提取物，其特征在于，采用權利要求1所述制備方法制得。

4.一種治療急性髓系白血病藥物的藥物組合物，其特征在于，包括權利要求2所述的蛇莓葉提取物及藥學上可接受的輔料或載體。

5.根據權利要求2所述蛇莓葉提取物在制備治療急性髓系白血病藥物中的應用。

6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述藥物為能抑制急性髓系白血病細胞c1498、hl-60和molm-13增殖的藥物。

7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述藥物為能延長急性髓系白血病小鼠的生存期，降低小鼠組織內白細胞浸潤，或抑制急性髓系白血病小鼠體內惡性細胞增殖，并改善小鼠生活狀態的藥物。

技術總結
本發明涉及植物提取物領域，具體公開了一種蛇莓葉提取物的制備及其在制備治療急性髓系白血病方面的應用。本發明的目的在于為制備治療急性髓系白血病提供一種新的藥物。本發明首次發現一種蛇莓葉提取物可有效抑制急性髓系白血病細胞增殖，葉優于其他藥用部位，蛇莓葉提取物延長急性髓系白血病小鼠的生存時間，抑制小鼠體內惡性細胞的增殖，改善小鼠的生存狀態。本發明為進一步研究急性髓系白血病藥物開發提供了新的思路。

技術研發人員：趙文華,師軍鳳,邢雯,王麗雪,李羽鏑,孫秀琳
受保護的技術使用者：首都醫科大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24