本發明涉及生物醫藥，具體涉及ccr5hi固有免疫記憶細胞在制備治療膿毒癥免疫治療藥物中的應用。

背景技術：

1、膿毒癥（sepsis）是由宿主對感染反應失調所引起的多器官功能障礙綜合征，其發病過程中伴隨著嚴重的免疫失衡。促炎與抑炎機制的失調破壞了機體穩態，導致疾病進展，甚至危及生命。目前，膿毒癥的治療主要依賴抗感染治療（如抗生素）、液體復蘇、器官支持等。然而，抗生素的過度使用已導致多重耐藥菌株的出現，甚至催生了對所有現有抗生素完全耐藥的“超級細菌”，這一現象使得傳統抗感染策略面臨嚴峻挑戰，凸顯了開發創新免疫治療策略以改善膿毒癥預后的迫切需求。

2、訓練免疫（ti）是一種新興的免疫調節策略，主要依賴于單核-巨噬細胞、nk細胞和ilc細胞等固有免疫細胞通過模式識別受體（prrs）感知病原相關分子模式（pamps），進而誘導表觀遺傳與代謝重編程，使其在再次遭遇相同或不同的病原刺激時產生更強的免疫反應，從而加速病原清除、恢復機體穩態。訓練免疫的免疫增強效應使其在抗病毒、抗細菌及抗真菌感染方面展現出廣闊的應用前景，尤其在膿毒癥的防治中表現出顯著的潛力。研究表明，誘導訓練免疫可增強膿毒癥小鼠的促炎反應，提高細菌清除能力，從而改善生存率。因此，開發有效的訓練免疫誘導策略，有望突破傳統抗生素治療的局限，為膿毒癥的免疫調控提供新思路。

3、許多生物制劑已被證實可誘導訓練免疫，其中，廣泛應用于結核預防的減毒活疫苗——卡介苗（bcg）是目前最成熟且應用最廣泛的訓練免疫誘導劑之一。作為經典的訓練免疫誘導劑，bcg通過toll樣受體（tlrs）等prrs驅動固有免疫細胞的代謝重編程和表觀遺傳重編程，增強宿主的非特異性免疫防御能力。近年來，bcg的免疫調節潛力逐漸擴展至癌癥、病毒感染及自身免疫性疾病等領域，其在膿毒癥防治中的作用亦備受關注。例如，新生兒bcg接種可促進緊急粒細胞生成，實現對膿毒癥早期感染的有效控制。

4、盡管bcg可通過訓練免疫增強抗感染能力，但其在膿毒癥治療中的應用仍存在局限性：①?bcg誘導的炎癥反應可能加劇膿毒癥患者的免疫失衡；②?其作用機制尚未完全明確，尤其是哪些固有免疫細胞在bcg誘導的膿毒癥保護過程中發揮關鍵作用仍不清楚；③傳統bcg接種存在一定的安全隱患，尤其在免疫缺陷個體中。

5、因此，開發更加安全、高效的訓練免疫誘導策略，并明確其核心效應細胞類型及作用機制，對于優化膿毒癥的免疫調控至關重要。

技術實現思路

1、針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種ccr5hi固有免疫記憶細胞在制備治療膿毒癥免疫治療藥物中的應用，本發明提供一種由卡介苗聯合細菌脂蛋白誘導訓練免疫產生的、對膿毒癥具有保護作用的固有免疫記憶細胞——ccr5hi單核細胞，通過單細胞測序分析及功能驗證精準鑒定其細胞亞群特征，闡明其功能機制，從而填補現有技術中“效應細胞身份不清、作用靶點不明”的關鍵空白，為膿毒癥的靶向免疫治療提供細胞層面的理論依據及技術方案。

2、為了實現上述目的，本發明采取如下技術方案：

3、本發明提供了一種ccr5hi固有免疫記憶細胞在制備治療膿毒癥免疫治療藥物中的應用。

4、具體的，所述ccr5hi固有免疫記憶細胞為卡介苗聯合細菌脂蛋白誘導訓練免疫產生的一類同時表達cd45+cd11b+ly6g-ly6c+ccr5hi的細胞亞群。

5、具體的，所述藥物的劑型為注射劑。

6、具體的，所述藥物的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射或皮下注射。

7、具體的，所述藥物還包括藥學上可接受的載體。

8、具體的，所述載體包括崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑、濕潤劑、矯味劑、助懸劑、表面活性劑和防腐劑中的一種或多種。

9、與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

10、（1）本發明提供了一種由卡介苗（bcg）聯合細菌脂蛋白（blp）誘導訓練免疫產生的、具有固有免疫記憶特征的細胞群體——ccr5hi單核細胞，該細胞亞群具有抗菌活性和對炎癥反應能力增強的特征，在膿毒癥發生時迅速響應，增強機體的免疫防御能力，可顯著改善膿毒癥預后；本發明將有望突破現有抗生素治療的局限性，為訓練免疫的精準調控提供理論基礎，并為膿毒癥的免疫治療開辟新的方向。

11、（2）為克服bcg誘導訓練免疫在膿毒癥治療中的局限性，本發明提出bcg聯合細菌脂蛋白（blp）優化訓練免疫的策略。blp作為tlr2特異性激動劑，不同于lps-tlr4介導的強促炎反應，它可通過上調rab10促進巨噬細胞吞噬體成熟，并激活cxcl2-cxcr2通路招募中性粒細胞，從而繞過tlr4依賴的炎癥路徑，直接增強病原體清除能力，形成“低炎癥-高殺菌”免疫保護模式。為深入解析bcg+blp誘導的訓練免疫機制，本發明結合10x?genomics單細胞測序，鑒定出一種具有固有免疫記憶特征的ccr5hi單核細胞，該亞群在膿毒癥發生時迅速響應，增強宿主的免疫防御能力，并顯著改善膿毒癥預后；ccr5hi單核細胞可在感染前預先激活固有免疫，使宿主在接觸病原微生物后快速釋放適量炎癥因子，加速吞噬細胞募集與病原體識別，從而在感染失控前有效清除病原體，阻斷“炎癥失衡—組織損傷—繼發性炎癥加劇”的惡性循環，最終提高新生鼠膿毒癥的生存率；與糖皮質激素等傳統抗炎藥物的免疫調控模式不同，該策略不僅降低炎癥相關副作用，還能增強早期免疫應答，提高病原體清除能力。

12、（3）本發明為膿毒癥的治療提供了新的思路和方法，有望在臨床實踐中取得更好的治療效果，通過精準調節ccr5hi單核細胞，能夠更有效地控制膿毒癥的病情發展，降低膿毒癥的死亡率，改善患者的預后，具有重要的臨床應用價值和廣闊的市場前景。

13、（4）本發明明確了ccr5hi單核細胞作為效應細胞類群，能夠更加精準地進行治療干預，減少了對非相關細胞和組織的影響，降低了治療過程中的副作用和風險，提高了治療的安全性，克服了現有技術中對治療安全性和有效性認識不足的問題。

技術特征：

1.ccr5hi固有免疫記憶細胞在制備治療膿毒癥免疫治療藥物中的應用，其特征在于，所述ccr5hi固有免疫記憶細胞為卡介苗聯合細菌脂蛋白誘導訓練免疫產生的一類同時表達cd45+cd11b+ly6g-ly6c+ccr5hi的細胞亞群。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述藥物的劑型為注射劑。

3.據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述藥物的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射或皮下注射。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述藥物還包括藥學上可接受的載體。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述載體包括崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑、濕潤劑、矯味劑、助懸劑、表面活性劑和防腐劑中的一種或多種。

技術總結
本發明涉及生物醫藥技術領域，具體公開了CCR5<supgt;hi</supgt;固有免疫記憶細胞在制備治療膿毒癥免疫治療藥物中的應用，本發明提供一種由卡介苗聯合細菌脂蛋白誘導訓練免疫產生的、對膿毒癥具有保護作用的固有免疫記憶細胞——CD45<supgt;+</supgt;CD11b<supgt;+</supgt;Ly6G<supgt;?</supgt;Ly6C<supgt;+</supgt;CCR5<supgt;hi</supgt;單核細胞，通過單細胞測序分析及功能驗證精準鑒定其細胞亞群特征，闡明其功能機制，從而填補現有技術中“效應細胞身份不清、作用靶點不明”的關鍵空白，為膿毒癥的靶向免疫治療提供細胞層面的理論依據及技術方案，有望在臨床實踐中取得更好的治療效果。

技術研發人員：周慧婷,汪健,郝文燕,徐鈴琪,楊穎伊,潘朋,馬淑蓉
受保護的技術使用者：蘇州大學附屬兒童醫院
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28