專利名稱：活性炭吸咐柱一次性分離十四種氨基酸的方法
技術領域：
本發明涉及從蛋白質水解液中分離氨基酸，特別是高收得率地分離一些難于分離的氨基酸的方法。
目前，從蛋白質水解液中分離氨基酸仍沿用傳統方法，由于大多數品種的氨基酸的理化性質近似，甚至相同，無法將它們逐一分開。一般是利用某種氨基酸在十七種氨基酸混合液中的相對量大，溶解度小的特點，才把它從混合液中放開；或者是利用某種氨基酸分子與某特殊結構的化學物質絡合沉淀而分開。這樣的分離結果，獲得的氨基酸品種少，收得率低。混在酸性水溶液中的氨基酸品種多，數量大，則無法利用，造成嚴重浪費，排放又造成環境污染。盡管CN85102242A專利申請“水解蛋白質分離氨基酸方法”，是將蛋白質水解液先直接通過活性炭吸附柱分離成A、B兩部分，A部分經解脫后再經樹脂柱最后分離成九種單一氨基酸品種；B部分尚有八種氨基酸未被分離出來，排放而浪費了。
本發明的目的是采用新的技術工藝，進一步提高氨基酸收得率和增加單一氨基酸的品種數。
本發明與CN85102242A現有技術比較，大幅度提高了該種色層分離技術工藝，其特征是把蛋白質水解液經稀釋和調節酸堿度后，一次性流經活性炭吸附柱，接著經水洗、酸性溶液和堿性乙醇溶液解脫，連續分段收集。相繼得到丙組份、脯組份、亮組份、精氨酸溶液。再用以下方法處理，最后將各組份氨基酸逐一分離成單一的氨基酸溶液將丙組份和脯組份氨基酸溶液分別流經717陰離子樹脂交換柱，相繼分離出①天門冬氨基酸；②谷氨酸；③絲氨酸；④蘇氨酸；⑤甘氨酸；⑥纈氨酸；⑦脯氨酸；⑧賴氨酸；⑨丙氨酸等九種單一氨基酸。
將亮組份用鄰二甲苯-4-磺酸沉淀出①亮氨酸后的氨基酸混合液再流經717陰離子樹脂交換柱，相繼分離出②蛋氨酸；③異亮氨酸；④組氨酸。
本發明的優點是對蛋白質水解液中的氨基酸進行了全分離過程，使分離到的氨基酸品種數在專利申請號85102242的九種基礎上增加到十四種，總得率從41％增加到52.1％，所以，本發明的分離效果好，收得率高。
本發明下面將結合實例作進一步詳述以100克人發置于800毫升圓底燒瓶中，加入250毫升鹽酸，加溫至110℃以上，并水解10小時，然后收集水解轉化生成的氨基酸混合液，加兩倍清水稀釋，液氨中和到PH值達7.0以上，然后讓其流經4.0cm×20cm內裝有GH-15顆粒活性炭的活性炭吸附柱，注入料液之后，接著以兩倍炭柱體積的清水洗滌，繼而以6至8倍炭柱體積0.05N-0.2N的鹽酸和50％左右乙醇液解脫，分段收集流經活性炭吸附柱的溶液，分別得到丙組份、脯組份、亮組份、精氨酸的氨基酸分離溶液。再將丙組份和脯組份調至PH值10以上，讓它們分別流經再生成H0-型的4.0cm×20cm717陰離子樹脂交換柱，分離到①天門冬氨酸；②谷氨酸；③絲氨酸；④蘇氨酸；⑤甘氨酸；⑥纈氨酸；⑦脯氨酸；⑧賴氨酸；⑨丙氨酸的單一氨基酸的溶液，然后再分別蒸發濃縮，得到天門冬氨酸4.1克，谷氨酸9.9克，絲氨酸6.1克，蘇氨酸4.2克，甘氨酸2.5克，丙氨酸2.3克，纈氨酸3.2克，脯氨酸4.8克，賴氨酸1.8克；用鄰二甲苯4-磺酸沉淀出①亮氨酸4.6克；剩下的混合液調PH值10以上讓其流經2.0cm×10.0cm的OH-型717陰離子樹脂交換柱，分離出①蛋氨酸0.4克，②異亮氨酸1.6克；將精氨酸溶液調PH值8.0讓其流經2.0cm×10.0cm的H+型732陽離子樹脂交換柱，得到①精氨酸6.2克，②組氨酸0.4克。以上十四種單一氨基酸總量為52.1克，總收得率為52.1％。
文獻現有技術中國發明專利申請號8510224權利要求
1.水解蛋白質分離氨基酸的方法，其特征是將蛋白質水解液加水稀釋2至4倍，并用液氨中和到PH值7.0以上后，讓其直接進入活性炭吸附柱。氨基酸液全部流經活性炭柱后，以活性炭柱2倍體積清水流經洗滌，接著以4至6倍活性炭柱體積的0.05N-0.2N鹽酸液流經活性炭柱，最后以1倍活性炭柱體積的0.2N鹽酸液和50％左右乙醇液流經活性炭柱。分段收集全部流經活性炭柱的氨基酸分離液，經分析判斷出丙組份、脯組份、亮組份、組氨酸、精氨酸等。①讓丙組份和脯組份分別流經717陰離子樹脂柱，分離得到絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天門冬氨酸、谷氨酸、纈氨酸、脯氨酸和賴氨酸等九種單一氨基酸；②用鄰二甲苯-4-磺酸絡合沉淀分離亮組份液得到亮氨酸、異亮氨酸和蛋氨酸。
2.根據權利要求1所述的水解蛋白質分離氨基酸方法，其特征蛋白質為人發、豬毛等角質蛋白質，或是畜血粉、明膠、骨膠、殘絲、蠶蛹蛋白、植物油餅等低價值的蛋白質。
3.根據權利要求1所述的水解蛋白質分離氨基酸的方法，其特征是分離氨基酸混合液成單一氨基酸的設備是活性炭吸附柱和717陰離子交換柱等色層分離裝置。
4.根據權利要求1所述的水解蛋白質分離氨基酸的方法，其特征是分離介質為活性炭、717陰離子樹脂、鄰二甲苯-4-磺酸等物質。
5.根據權利要求1所述的水解蛋白質分離氨基酸的方法，其特征作為分離解脫液是水、0.05N-0.2N鹽酸液、50％左右乙醇的0.2N鹽酸混合液以及1N氨液的70％-90％乙醇混合液。
6.根據權利要求1、3、4、5所述的水解蛋白質分離氨基酸的方法，其特征是采用分段收集法收集分離到的氨基酸溶液。
全文摘要
動植物蛋白質水解液經稀釋和調節酸堿度，一次性流經活性炭吸附柱，用水、酸液、乙醇配成解脫劑，連續分段收集，將丙組份、組份和亮組份的氨基酸混合解脫液，讓其流經陰離子交換柱；精氨酸混合解脫液流經陽離子交換柱，細分出單一品種的氨基酸。以人發為蛋白質水解原料，用本發明工藝方法進行色層分離，獲得14種單一氨基酸，總率為 52.1％。
文檔編號C07C227/00GK1515543SQ0213492
公開日2004年7月28日 申請日期2002年10月10日 優先權日2002年10月10日
發明者鄒學滿 申請人:黃洪銳, 鄒學滿