1.一種膠狀溶桿菌OH17遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法包括如下步驟：
A）確定目的基因：根據(jù)基因組的序列分析，在膠狀溶桿菌OH17的基因組中定位指定基因的同源序列，確定為目的基因；
B）構(gòu)建基因敲除重組載體：采用PCR擴(kuò)增目的基因的上游和下游片段，酶切這些片段，純化回收后連接到自殺性質(zhì)粒上，得到基因敲除重組載體，所用的自殺性質(zhì)粒為pJQ200SK；
C）構(gòu)建基因敲除突變株：基因敲除重組載體通過電擊轉(zhuǎn)化的方式進(jìn)入到OH17感受態(tài)細(xì)胞中，進(jìn)行同源雙交換，采用LA培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，經(jīng)PCR驗證后獲得基因敲除突變株；
D）構(gòu)建回補(bǔ)菌株的重組載體：采用PCR擴(kuò)增目的基因及其自身啟動子的片段，酶切這些片段，純化回收后連接到質(zhì)粒上，得到回補(bǔ)菌株的重組載體，所用的質(zhì)粒為pSEVA321CM；
E）構(gòu)建回補(bǔ)菌株：回補(bǔ)菌株的重組載體通過電擊轉(zhuǎn)化的方式進(jìn)入到步驟C）得到的基因敲除突變株感受態(tài)細(xì)胞中，采用LA培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，經(jīng)PCR驗證后獲得回補(bǔ)菌株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠狀溶桿菌OH17遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的自殺性質(zhì)粒pJQ200SK攜帶慶大霉素的抗性基因Gm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的膠狀溶桿菌OH17遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的步驟B）的操作過程中，得到的基因敲除重組載體需要經(jīng)過驗證，驗證方法如下：將自殺性質(zhì)粒通過熱激轉(zhuǎn)化到檢測菌株上，采用LA培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并進(jìn)行PCR和雙酶切驗證，得到正確的基因敲除重組載體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠狀溶桿菌OH17遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的步驟D）的操作過程中，得到的回補(bǔ)菌株的重組載體需要經(jīng)過驗證，驗證方法如下：將質(zhì)粒通過熱激轉(zhuǎn)化到檢測菌株上，采用LA培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并進(jìn)行PCR和雙酶切驗證，得到正確的回補(bǔ)菌株的重組載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠狀溶桿菌OH17遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟B）和步驟D）中采用檢測菌株為大腸桿菌DH5α。