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一種全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒及提取方法與流程

文檔序號:11145194閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,包括裂解液1、裂解液2、結合液和磁珠,其特征是:其中裂解液1包括以下組分:鹽酸胍2~8mol/L,1%~10%的曲拉通-100(V/V),1%~10%的吐溫-20(V/V), 1%~10%的chelex-100 (m/V),2~10mmol/L的乙二胺四乙酸二鈉,20~100mmol/L的三羥甲基氨基甲烷,鹽酸調節溶液pH至4.5,溶劑為去離子水;裂解液2包括以下組分:20mg/ml的蛋白酶K,50mmol/L的三甲基氨基甲烷,鹽酸調節溶液pH至8.0;結合液包括以下組分:1~3mol/L的氯化鈉,40%~90%的異丙醇 (V/V),溶劑為去離子水。

2.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:還包括洗滌液I,洗滌液I包括以下組分:2~8mol/L的鹽酸胍,1~3mol/L的氯化鈉,20%~30%的異丙醇(V/V),20%~30%的乙醇(V/V),1~4mol/L的PEG-6000,2~10mmol/L的乙二胺四乙酸二鈉,20~100mmol/L的三羥甲基氨基甲烷,溶劑為去離子水,鹽酸調節溶液pH至4.5。

3.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:還包括洗滌液II,洗滌液II為60%~80%的乙醇 (V/V)。

4.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:還包括洗脫液,洗脫液包括以下組分:1~20mmol/L的乙二胺四乙酸二鈉,1~20mmol/L的三羥甲基氨基甲烷,溶劑為去離子水,鹽酸調節pH至8.0。

5.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:所述磁珠為洛陽吉恩特生物科技有限公司生產的DNA提取磁珠,固含量為50~100mg/ml。

6.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:還包括耗材,所述耗材包括96孔深孔板、96針攪拌套和磁力板,所述96孔深孔板分離的設置在磁力板上,所述96針攪拌套設置在96孔深孔板內。

7.根據權利要求1所述的全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒,其特征是:所述去離子水的用量根據所需體積而定量。

8.一種全血基因組DNA高通量板式提取試劑盒及提取方法,具體包括以下步驟:

(1)、將全血樣本送至96孔深孔板內,加入裂解液1和裂解液2,金屬浴37度,30min后取下;

(2)、接上一步驟,加入結合液與磁珠,利用96針攪拌套進行攪拌,將96孔深孔板置于磁力板上,等待磁分離完全后,吸棄廢液;

(3)、接上一步驟,加入洗滌液I,利用96針攪拌套進行攪拌,將96孔深孔板置于磁力板上,等待磁分離完全后,吸棄廢液;

(4)、接上一步驟,加入洗滌液II,利用96針攪拌套進行攪拌,將96孔深孔板置于磁力板上,等待磁分離完全后,吸棄廢液;

(5)、接上一步驟,將96孔深孔板置于37度金屬浴,5min后取下,加入洗脫液,利用96針攪拌套進行攪拌,將96孔深孔板置于37度金屬浴,10min后取下;將96孔深孔板置于磁力板上,磁分離完全后,將上清轉移至新板中,進行下游實驗。

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