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一種提高絨促性素效價的方法與流程

文檔序號:11095840閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種絨促性素純化方法,采用三次層析進行純化,所述三次層析依次為親和層析、疏水層析和離子交換層析,最終得到高純度絨促性素固體。

2.根據權利要求1所述的絨促性素純化方法,其特征在于:所述親和層析的填料為 capto blue(high sub)、所述疏水層析的填料為Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)、所述離子交換層析的填料為DEAE Sepharose Fast Flow。

3.根據權利要求2所述的絨促性素純化方法,其特征在于:包括以下各步驟:

(1)預處理:絨促性素粗品溶于溶解液中,再加入乙醇溶液至混合溶液中存在低濃度乙醇后沉淀、取上清液,所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇,取沉淀得固體;

(2)第一步層析:步驟(1)得到的固體進行capto blue(high sub)親和層析得蛋白溶液A;

(3)第二步層析:步驟(2)得到的蛋白溶液A經Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)疏水層析得蛋白溶液B;

(4)第三步層析:將步驟(3)得到的蛋白溶液B經DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析得蛋白溶液C;

(5)后處理:步驟(4)得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇,沉淀后收集固體,即得絨促性素固體。

4.根據權利要求3所述的絨促性素純化方法,其特征在于:步驟(1)預處理:絨促性素粗品溶于溶解液中,加濃度為100%乙醇至混合溶液中乙醇濃度為45-55%,攪拌、沉淀后取上清液,所述上清液加濃度為100%乙醇至混合溶液中乙醇濃度為80-90%,取沉淀,離心,常溫減壓干燥,得固體。

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