本發明涉及一種制備化合物的方法，具體涉及一種制備長春西汀的方法。

背景技術：

長春西汀(Vinpocetine，商品名為長春乙酯，康維腦)，亦稱做卡蘭Calan)，是從長春花(Vincamajor、Vincaminor，常見的類似藤本的長綠地被植物，分布于中南歐等地區，作為藥用植物已有近2000年的應用歷史，民間用于振作精神、恢復疲勞，特別是衰老有關的同類癥狀，也用作收斂劑等)中得到的一種吲哚生物堿類天然藥物。

長春西汀的結構式如下：

長春西汀能夠選擇性地改善大腦的血液循環，促進大腦的能量代謝，調節神經遞質系統功能，多方面保護大腦免受缺血缺氧性損害，特別適用于防止腦供血不足、中風以及與衰老有關的癥狀，并對認知和記憶有特別的效果。廣泛用于缺血性腦血管疾病的治療和預防，為腦循環代謝改善劑。長春西汀在臨床治療腦血管疾病有較好的療效，具有獨特的藥理作用，近年來，引起國內外有關專家的重視，并對其合成路線，制備工藝進行了廣泛的研究。

長春西汀的合成方法大致分為兩種：一種方法是以吲哚衍生物以及吲哚類生物堿為起始原料的化學全合成方法，路線一到路線五列舉了幾種先有技術中全合成長春西汀的路線，另一種方法是從長春胺植物中所提取的長春胺為原料的半合成方法，路線六和路線七列舉了從長春胺合成長春西汀的路線。對比兩種方法，半合成方法路線短、收率高、工藝簡單成熟、成本低。因而國內外生產長春西汀多采取半合成方法。

路線一^[1](期刊Tetrahedron Vol 39,No.22,pp 3737 to 3747,1983)

路線二^[2](期刊Liebigs Ann.Chem.1993,221-229)

路線三^[3](美國專利US 4316028)

路線四^[4](美國專利US 4316029)

路線五^[5](期刊，Arch.pharm.(Weinheim)316，1983，629-638)

路線六^[6](德國專利DE 10311850A1)

路線七^[7](期刊Synthetic Communications,24(6),759-766(1994))

從上述路線中可以看出，以吲哚類以及吲哚類生物堿為起始原料的全合成路線比較長，操作繁瑣，不適用于大生產。在以長春胺為起始原料的半合成路線中，有的路線雖然較短，但基本上也各有異同。有以長春胺為起始原料先水解、脫水、酯化再重結晶的；有以長春胺為起始原料先脫水、水解、酯化再重結晶得的；也有以長春胺為起始原料，先水解、酯化、脫水再重結晶的，各不相同。有的在脫水過程中需要用到苯或氯苯，有的需要用到濃硫酸，這些都給三廢處理和溶劑殘留帶來不利影響，因而不適合工業化大生產。也有以長春胺酸(長春胺的水解產物)為起始原料的合成方法，但通常會使用到濃硫酸、有機磺酸、二氨基吡啶等，容易造成環境污染；以長春胺酸為起始原料的合成方法中，有一種采用磺酸型陽離子或苯乙烯型陰離子交換樹脂進行酯化脫水并酯化得到目標產物的方法，此法產生三廢相對較少，路線簡短，但是也會使用到濃硫酸。

技術實現要素：

本發明的目的在于提供一種制備長春西汀的方法，該方法制備的長春西汀收率高，純度高。

為了實現本發明，本發明所采用的技術方案如下：

一種制備長春西汀的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)制備長春西汀粗品：

A)取原料阿樸長春胺的乙醇溶液，與乙醇鈉的乙醇溶液混合，乙醇鈉與原料阿樸長春胺的摩爾比為0.135～0.137：1，進行回流反應，至體系中阿樸長春胺剩余量少于原料阿樸長春胺的3％時，除去全部溶劑得反應中間料A；

B)將反應中間料A制成乙醇溶液，與乙醇鈉的乙醇溶液混合，乙醇鈉與所述的阿樸長春胺的摩爾比為0.033～0.035：1，進行回流反應，至體系中阿樸長春胺剩余量少于加入原料阿樸長春胺的0.3％時，熱過濾，除去濾液中部分溶劑至有固體析出，冷卻結晶，固液分離，洗滌，干燥，即得長春西汀粗品；

2)精制長春西汀：

將長春西汀粗品依次用水、乙醇洗滌后，加入無水乙醇制成溶液，加入活性炭進行回流，熱過濾，濾液除去部分溶劑至有固體析出，冷卻結晶，固液分離，洗滌，干燥，即得精制長春西汀。

所述的原料阿樸長春胺的純度不低于97.5％。

所述的乙醇鈉乙醇溶液的濃度為0.5～2.0mol/L。優選的乙醇鈉乙醇溶液的濃度為1.0mol/L。

所述的阿樸長春胺乙醇溶液的濃度為每215g溶于2300～3000mL乙醇中。

所述阿樸長春胺加入乙醇中溶清制成溶液。

所述的制備長春西汀粗品過程中把乙醇鈉的乙醇溶液滴加到阿樸長春胺乙醇溶液中進行混合。

選用乙醇作為溶劑，乙醇溶劑大大過量，有利于酯交換反應的進行，同時選用乙醇鈉的乙醇溶液作為催化劑，促使乙醇鈉催化劑能夠快速均勻分散到溶液中，催化酯交換反應，隨著反應的進行，乙醇鈉的催化活性降低，除去溶劑后再次加入乙醇鈉乙醇溶液反應，可以使反應原料充分的轉化，提高反應最終的收率。

所述的制備長春西汀粗品步驟A)和步驟B)中判斷阿樸長春胺剩余量所用方法為高效液相色譜，色譜條件設置如下：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論踏板數至少為3000，以0.2mol/L醋酸銨緩沖液溶液-乙腈為流動相，醋酸銨緩沖液溶液與乙腈的體積比45：55，為檢測波長280nm。

所述的醋酸銨緩沖溶液配制方法為：把15.4g醋酸銨溶于950mL水中，加入冰醋酸調節pH為6，補加水至1000mL，過0.45μL濾膜，即得pH為6的0.2mol/L的醋酸銨緩沖溶液。

所述的十八烷基硅烷鍵合硅膠的規格為4.6x150mm；5μm。

所述精制長春西汀過程中，粗品長春西汀的質量在一些實施例中沒有測定，因此用原料阿樸長春胺的用量來限制活性炭的用量，所用活性炭的量為每2800g原料阿樸長春胺加入90～150g活性炭。

精制長春西汀過程選用乙醇作為重結晶的溶劑，主要是因為長春西汀微溶于甲醇、乙醚，不溶于水，溶于氯仿、二氯甲烷等。實驗過程中發現該化合物在冷的乙醇中溶解度很小，而在熱的乙醇中溶解度較大。甲醇、氯仿和二氯甲烷為二類溶劑，應該藥物合成中應該盡量限制使用。與乙醇類似，乙醚盡管亦為三類溶劑，但是具有強麻醉性、強揮發性及易燃性，也不宜選用。實驗結果中還發現，長春西汀粗品當中的主要雜質都可以被冷的乙醇溶解，從溶劑的角度來講，用乙醇作溶劑來精制提純長春西汀是合適的。另外，用乙醇重結晶的方法精制長春西汀時，產品損失少并且乙醇可以溶解長春西汀粗品中的大部分雜質，例如，阿樸長春胺酸，長春胺酸乙酯，甲氧基長春西汀，二氫長春西汀雜質，單次精制，產品純度可以提高0.5％左右，精制效果非常理想。

所述原料阿樸長春胺是由以下方法制備的：在0-5℃條件下，原料長春胺與二氯亞砜在N-甲基吡咯烷酮溶劑中反應，原料長春胺與二氯亞砜的摩爾比為1.55～1.65：1，反應至體系中剩余長春胺少于加入原料長春胺的1％后，加水淬滅反應，用氨水調節pH至7～8，析出固體，固液分離，洗滌、干燥，即得阿樸長春胺。

制備阿樸長春胺過程中，加入二氯亞砜的過程中是放熱反應，加入過程中控制體系溫度不超過20℃。

制備阿樸長春胺過程中，淬滅反應過程中，過量的二氯亞砜與加入的水劇烈反應，需要控制溫度不超過30℃。

制備阿樸長春胺過程中，用氨水調節pH過程中，氨水與體系中的副產物鹽酸反應，需要控制體系溫度不超過15℃。

所述加水淬滅所用水的量為每克原料長春胺需要加入2mL水。

所述的原料長春胺從小蔓長春花提取，具體提取過程為：取干燥小蔓長春花干燥，粉碎過篩，得小蔓長春花粉末，用甲醇浸提，除去甲醇，得膏狀提取物A；向膏狀提取物A中加入稀鹽酸至提取物溶解，過濾得濾液，用氨水調節濾液pH為8～9，二氯甲烷萃取，除去溶劑得粗品長春胺；粗品長春胺用甲醇重結晶即得長春胺。

所述過篩的孔徑為40目。

所述加入稀鹽酸的體積分數優選為2％。

與現有技術相比，本發明的優點在于：

1、本發明制備長春西汀的方法不僅適合實驗室克級的制備，也適合工業級規模千克級的制備。

2、本發明制備長春西汀過程中工業三廢容易處理。本發明制備長春西汀過程中沒有用到濃硫酸，氯苯等毒性較大、難以處理的試劑，主要涉及的有機溶劑為N-甲基吡咯烷酮(NMP)和無水乙醇。NMP溶解在大量水中，可以通過沉降、過濾、粗餾和精餾的方法回收處理。無水乙醇則完全可以通過蒸餾的方法充分回收。輔助試劑為二氯亞砜，經水分解后可堿中和后達標排放。在反應后處理過程中，有少量的氨氣溢出，通過引風和導流裝置，用稀鹽酸或稀硫酸吸收即可。

3、本發明制備的長春西汀溶劑殘留少，雜質含量少，長春西汀純度高，結果重現型好，其純度為99.4～99.8％。

附圖說明

圖1為小蔓長春花提取長春胺工藝流程圖；

圖2為制備阿樸長春胺工藝流程圖；

圖3為制備長春西汀及精制長春西汀工藝流程圖。

具體實施方式

1.1、本發明實施例所用試劑

本發明所用試劑及來源如表1所示。

表1試劑及其來源

1.2、本發明實施例所用溶劑配制方法如下：

1.2.1、配制1.0mol/L乙醇鈉乙醇溶液

選用3L干燥潔凈的三口燒瓶中安裝好冷凝回流管和干燥管，外置水浴冷卻，加入2L無水乙醇，開啟攪拌。取出金屬鈉塊，擦凈，切除黃色氧化層，稱取46g，剪切成鈉絲，加至上述備好的乙醇中。當鈉絲消失，乙醇鈉乙醇溶液冷至常溫后，迅速轉入棕色試劑瓶中密封保存，即為1mol/L乙醇鈉乙醇溶液

以同樣的方法配制所需的0.5～2.0mol/L的乙醇鈉乙醇溶液。

1.2.2、配制pH＝6.0的0.2mol/L醋酸銨緩沖溶液：

把15.4g醋酸銨溶于950mL水中，加入冰醋酸調節pH為6，補加水至1000mL，過0.45μL濾膜，即得。

1.3、提取長春胺

1.3.1、提取長春胺工藝流程圖

提取長春胺工藝流程圖如圖1所示。

1.3.2、提取長春胺工藝流程

取干燥過的小蔓長春花10Kg，粉碎，過40目篩，得小蔓長春花粉，將其置于500L提取器內，加200L甲醇充分浸提，減壓回收甲醇后，過濾，得到膏狀提取物。在該提取物中加2％稀鹽酸15L，充分攪拌，提取物溶解，再過濾去除不溶性雜質，收集濾液，用氨水調節pH為8-9，用二氯甲烷萃取2～3次，萃取劑用量為80～120L，合并二氯甲烷，在40℃下除去二氯甲烷，再得膏狀物，即為粗品長春胺。將粗品長春胺加入50L甲醇中，攪拌，升溫至回流，冷卻至常溫，析出結晶，過濾，甲醇充分淋洗，收集濾餅，干燥，即得長春胺。

1.3.3、長春胺的理化性質

長春胺理化性質及穩定性：黃色結晶；熔點232～233℃；旋光度+41°(吡啶)；小鼠靜脈注射LD₅₀75mg/kg；是由夾竹桃科植物蔓長春花(Vinca major)、小蔓長春花(V.minor)、直立長春花(V.erecta)、異形蔓長春花(V.dilormis)分離的生物堿。臨床用作血管舒張藥，適用于腦血管障礙、腦栓塞、腦血栓形成及出血后遺癥等。常溫下儲存穩定。

1.3.4、長春胺質控標準

成品長春胺按照下列主要指標進行質控：

有關物質(HPLC)：不高于1.0％；

含量(高氯酸滴定法)：98.5-101.5％；

二氯甲烷：殘留量不高于600ppm；

甲醇：殘留量不高于3000ppm。

1.4、制備阿樸長春胺

1.4.1制備阿樸長春胺工藝流程圖

制備阿樸長春胺工藝流程圖如圖2所示。

1.4.2制備阿樸長春胺條件篩選

在0-5℃條件下，原料長春胺與二氯亞砜在N-甲基吡咯烷酮溶劑中反應，反應過程中監測體系中剩余長春胺少于加入原料長春胺的量，加水淬滅反應，用氨水調節pH，析出固體，固液分離，洗滌、干燥，即得阿樸長春胺。

表2制備阿樸長春西汀條件篩選

從表2可以看出，制備阿樸長春胺的優選條件為氯化亞砜與長春胺的摩爾比為1.55～1.65：1，其純度為93.3～95.0％。用氨水調節pH，優選的pH為7～8。加入水淬滅反應的優選條件為每克長春胺需要2mL純化水。

1.5、制備長春西汀

1.5.1制備長春西汀工藝流程圖

制備長春西汀工藝流程圖如圖3所示，包括制備長春西汀粗品和精制長春西汀。

1.5.2制備長春西汀粗品條件篩選

將阿樸長春胺的乙醇溶液，與乙醇鈉的乙醇溶液混合，進行回流反應，用液相色譜監測反應體系中阿樸長春胺的量，當阿樸長春胺殘留量不在減少時反應結束，熱過濾，除去濾液中部分溶劑至有固體析出，冷卻結晶，固液分離，洗滌，干燥，即得長春西汀粗品。

表3制備長春西汀粗品條件篩選

從表3可以看出，優選的催化劑為乙醇鈉。更進一步的優選方案催化劑為乙醇鈉的乙醇溶液。進一步的優選方案為乙醇鈉的用量與阿樸長春胺的摩爾比為0.17：1。更進一步的優選方案為乙醇鈉的乙醇溶液分兩次加入。更進一步的優選方案為乙醇鈉的乙醇溶液在阿樸長春胺的乙醇溶液在回流條件下加入。

最優的條件為乙醇鈉乙醇溶液分兩次加入回流的阿樸長春胺溶液，乙醇鈉與阿樸長春胺的摩爾比為0.17：1。

實施例1

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1)制備阿樸長春胺

在50mL干燥潔凈的單口燒瓶中投入NMP 15mL和長春胺5g，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，外置冰水浴降溫至0-5℃，滴加二氯亞砜1.62mL，控制內溫不超過20℃，半小時滴加完畢。撤去冰浴，約30min升溫至常溫(RT，20-25℃)，攪拌反應30min。用HPLC監測反應，原料長春胺剩余量小于1％時結束反應。再降溫至0-5℃，滴加純化水10mL，控制內溫不超過30℃，20分鐘滴完，加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水調pH＝7-8，控制內溫為15℃，攪拌熟化2小時，抽濾，濾餅用水淋洗一次，收集濾餅，干燥，即得阿樸長春胺，重量為4.7g，純度為97％。

反應液過程中監測長春胺剩余量用HPLC檢測方法，HPLC條件設置如下：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨緩沖溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(v/v＝45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2)制備長春西汀粗品

在50mL干燥潔凈的單口燒瓶中，阿樸長春胺1.8g和無水乙醇20mL，加熱至乙醇回流，溶清后，快速加入乙醇鈉乙醇溶液0.70mL(1mol/L)，攪拌回流反應1小時。取樣用HPLC監測反應，當阿樸長春胺含量少于3％時停止回流。適當冷卻，減壓移除全部溶劑，再重新加入新鮮無水乙醇20mL，回流溶清后再快速補充乙醇鈉乙醇溶液0.18mL，再回流反應30分鐘后補充10mL乙醇，趁熱過濾除去不溶物，收集濾液，自然冷卻降溫結晶，抽濾，淋洗，收集濾餅，即為長春西汀粗品，干重約1.3g，純度約99％。

3)精制長春西汀

長春西汀粗品1.3g加純化水30mL左右，常溫下攪拌2小時，過濾、用5mL×2純化水和3mL×2無水乙醇淋洗，抽干即得水洗產品。水洗產品再加無水乙醇20mL，回流溶清，加活性炭約50mg，再回流20分鐘，過濾，減壓蒸除部分乙醇后緩慢降溫重結晶，固體再過濾、用乙醇淋洗、抽干、干燥，即得精致長春西汀1.0g，其純度為99.5％。

實施例2

本實施例長春胺純度不低于99.3％。

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1)制備阿樸長春胺

在2000mL干燥潔凈的單口燒瓶中投入NMP 690mL和長春胺230g，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，外置冰水浴降溫至0-5℃，滴加二氯亞砜74.8mL，控制內溫不超過20℃，1小時左右滴完。撤去冰浴，攪拌約半小時升溫至常溫(RT，20-25℃)，用HPLC監測反應中長春胺的剩余量，當剩余小于1％時結束反應，再降溫至0-5℃，滴加純化水460mL，控制內溫不超過30℃，20分鐘左右滴完。加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水約320mL，調pH＝7-8，控制內溫15℃左右，攪拌熟化2小時，抽濾，純化水280mL×2充分淋洗，收集濾餅，濾餅再加純化水1150mL常溫攪拌2小時，再抽干，用純化水280mL×2淋洗，濾餅在60-65℃鼓風干燥24小時，即得阿樸長春胺，其重量為218g，純度為97.5％以上。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨緩沖溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2)制備長春西汀粗品

在5000mL干燥潔凈的三口燒瓶中，投入阿樸長春胺215g和無水乙醇2700mL，加熱至乙醇回流，溶清后快速加入乙醇鈉乙醇溶液86mL(1mol/L)，攪拌回流反應1小時。取樣用HPLC監測反應，當原料阿樸長春胺含量少于3％時停止回流。適當冷卻，減壓移除全部溶劑，再重新加入新鮮無水乙醇2700mL，回流溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液21.5mL，再回流反應30分鐘，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充適量乙醇，趁熱過濾去不溶物，收集濾液，減壓蒸除部分乙醇，至乙醇體積為2200mL左右時停止蒸餾，物料有少量析出，重新升溫回流溶清。自然冷卻降溫結晶，抽濾，淋洗，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

3)精制長春西汀

將步驟2)所得長春西汀粗品加入純化水3300mL常溫下攪拌2小時，再過濾抽干，400mL×2純化水和120mL×2無水乙醇淋洗，即得水洗產品。水洗產品再加2300mL無水乙醇溶清，加7g活性炭回流20分鐘左右，過濾之，減壓蒸除部分乙醇后緩慢降溫重結晶，固體再過濾、抽干、干燥，即為精制長春西汀，其重量為121.6g，純度為99.56％。

實施例3

本實施例長春胺純度不低于99.3％。

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1、制備阿樸長春胺

在2000mL干燥潔凈的單口燒瓶中投入NMP 690mL和長春胺230g，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，外置冰水浴降溫至0-5℃，滴加二氯亞砜74.8mL，控制內溫不超過20℃，1小時左右滴完。撤去冰浴，攪拌約半小時升溫至常溫(RT，20-25℃)，用HPLC監測反應中長春胺的剩余量，當剩余小于1％時結束反應，再降溫至0-5℃，滴加純化水460mL，控制內溫不超過30℃，20分鐘左右滴完。加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水約320mL，調pH＝7-8，控制內溫15℃左右，攪拌熟化2小時，抽濾，純化水280mL×2充分淋洗，收集濾餅，濾餅再加純化水1150mL常溫攪拌2小時，再抽干，用純化水280mL×2淋洗，濾餅在60-65℃鼓風干燥24小時，即得阿樸長春胺，其重量為216g，純度為98.0％以上。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨緩沖溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2、制備長春西汀粗品

在5000mL干燥潔凈的三口燒瓶中，投入阿樸長春胺215g和無水乙醇2700mL，加熱至乙醇回流，溶清后快速加入乙醇鈉乙醇溶液86mL(1mol/L)，攪拌回流反應1小時。取樣用HPLC監測反應，當原料阿樸長春胺含量少于3％時停止回流。適當冷卻，減壓移除全部溶劑，再重新加入新鮮無水乙醇2700mL，回流溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液21.5mL，再回流反應30分鐘，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充適量乙醇，趁熱過濾去不溶物，收集濾液，減壓蒸除部分乙醇，至乙醇體積為2200mL左右時停止蒸餾，物料有少量析出，重新升溫回流溶清。自然冷卻降溫結晶，抽濾，淋洗，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

3、精制長春西汀

將步驟2)所得長春西汀粗品加入純化水3300mL常溫下攪拌2小時，再過濾抽干，400mL×2純化水和120mL×2無水乙醇淋洗，即得水洗產品。水洗產品再加2300mL無水乙醇溶清，加7g活性炭回流20分鐘左右，過濾之，減壓蒸除部分乙醇后緩慢降溫重結晶，固體再過濾、抽干、干燥，即為精制長春西汀，其重量為123.1g，純度為99.44％。

實施例4

本實施例長春胺純度不低于99.3％。

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1)制備長春西汀粗品

在5000mL干燥潔凈的三口燒瓶中，投入阿樸長春胺215g和無水乙醇2700mL，加熱至乙醇回流，溶清后快速加入乙醇鈉乙醇溶液86mL(1mol/L)，攪拌回流反應1小時。取樣用HPLC監測反應，當原料阿樸長春胺含量少于3％時停止回流。適當冷卻，減壓移除全部溶劑，再重新加入新鮮無水乙醇2700mL，回流溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液21.5mL，再回流反應30分鐘，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充適量乙醇，趁熱過濾去不溶物，收集濾液，減壓蒸除部分乙醇，至乙醇體積為2200mL左右時停止蒸餾，物料有少量析出，重新升溫回流溶清。自然冷卻降溫結晶，抽濾，淋洗，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2)精制長春西汀

將步驟2)所得長春西汀粗品加入純化水3300mL常溫下攪拌2小時，再過濾抽干，400mL×2純化水和120mL×2無水乙醇淋洗，即得水洗產品。水洗產品再加2300mL無水乙醇溶清，加7g活性炭回流20分鐘左右，過濾之，減壓蒸除部分乙醇后緩慢降溫重結晶，固體再過濾、抽干、干燥，即為精制長春西汀，其重量為126.1g，純度為99.39％。

實施例3～5連續投料三批重現性實驗表明，該工藝在實驗室放大階段具有良好的穩定性和重現性，并且反應溫和、平穩、可控，操作性強，應用上述方法可得到符合長春西汀質量標準的合格產品。

實施例5

本實施例長春胺純度不低于99.3％。

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1、制備阿樸長春胺

攪拌下，依次在反應釜中投入12.0L溶劑NMP和長春胺4.00kg，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，然后夾套通冷凍鹽水降溫至0-5℃時，滴加二氯亞砜1.30L，控制溫度不超過20℃，1小時左右滴加完畢。然后開啟自來水，約半小時升溫至常溫(RT,20-25℃，下同)，攪拌反應半小時，用HPLC監測反應，長春胺剩余含量為0.0384％，結束反應，進行后處理。用冷凍鹽水再將體系冷卻至0-5℃后，滴加純化水8L，控制溫度不超過30℃，20分鐘左右滴完。加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水約5.6L，調pH＝7-8，滴加過程中控制溫度15℃左右，然后再攪熟化2小時，放料，抽干，用純化水5L×2分次充分淋洗，抽干至不再滴出液滴為止，收集濾餅。將濾餅重新投入釜內，加純化水20L，攪拌2小時，放料，抽干，純化水5L×2分次充分淋洗，抽干，濾餅在65℃熱風循環電汽烘箱中連續干燥不少于24小時，收料即得阿樸長春胺，其重量為3.80kg，純度98.0％以上。

本實施例制備阿樸長春胺的工藝流程圖如圖2所示。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2、制備長春西汀粗品

在攪拌下，在100L反應釜中投入阿樸長春胺3.80kg和無水乙醇46L，加熱至乙醇回流，直至物料基本溶清，然后加入乙醇鈉乙醇溶液1.45L，回流攪拌反應1小時。取樣用HPLC監測反應，原料阿樸長春胺含量為0.659％時(少于3％)停止回流。用自來水降溫至40℃左右，減壓移除全部溶劑，得固狀物，再重新加入新鮮無水乙醇46L，再熱至回流，直至溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液0.35L，再回流反應30分鐘。再監測，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充乙醇40-60L，回流溶清。用預熱至60-70℃的D40不銹鋼多孔快速過濾器趁熱過濾反應液，去除不溶物。將濾液轉移至干燥潔凈的100L反應釜中，物料會析出，再溶清后蒸出部分乙醇，控制釜內乙醇余量為35-43L。在攪拌下，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套自來水并繼續攪拌2小時熟化結晶。放料，抽干，用無水乙醇6L×2分次充分淋洗，抽干，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

3、精制長春西汀

將長春西汀粗品重新投入釜內，加純化水48L，攪拌2小時，再放料抽干，先用純化水6L×2分次充分淋洗，抽干，再用無水乙醇2L×2分次淋洗，抽干，即得水洗產品。再將其用44L無水乙醇加熱溶清，使溶液稍冷后，加入活性炭140g，攪拌20-30分鐘后趁熱過濾之，將濾液轉移至50L反應釜中。物料會析出，重新升溫回流溶清，再在常壓下蒸除少量溶劑，控制反應釜剩余乙醇約28L，然后繼續攪拌，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套冷卻水并繼續攪拌2小時熟化結晶，放料，抽干，用無水乙醇4L×2分次充分淋洗，收集濾餅，置于熱風循環電汽烘箱中，于65-70℃下連續干燥不少于24小時，得精制長春西汀，重1.93kg，純度約99.8％。

本實施例制備長春西汀和精制長春西汀的工藝流程圖如圖3所示。

實施例6

本實施例長春胺純度不低于99.3％。

本實施以長春胺為原料，首先制備阿樸長春胺，再以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1、制備阿樸長春胺

攪拌下，依次在反應釜中投入12.0L溶劑NMP和長春胺4.00kg，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，然后夾套通冷凍鹽水降溫至0-5℃時，滴加二氯亞砜1.30L，控制溫度不超過20℃，1小時左右滴加完畢。然后開啟自來水，約半小時升溫至常溫(RT,20-25℃，下同)，攪拌反應半小時，用HPLC監測反應，長春胺剩余含量為0.0527％，結束反應，進行后處理。用冷凍鹽水再將體系冷卻至0-5℃后，滴加純化水8L，控制溫度不超過30℃，20分鐘左右滴完。加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水約5.6L，調pH＝7-8，滴加過程中控制溫度15℃左右，然后再攪拌熟化2小時，放料，抽干，用純化水5L×2分次充分淋洗，抽干至不再滴出液滴為止，收集濾餅。將濾餅重新投入釜內，加純化水20L，攪拌2小時，放料，抽干，純化水5L×2分次充分淋洗，抽干，濾餅在65℃熱風循環電汽烘箱中連續干燥不少于24小時，收料即為阿樸長春胺，重量為3.76kg，純度為98.5％。

HPLC檢測方法：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2、制備長春西汀粗品

在攪拌下，在100L反應釜中投入阿樸長春胺3.76kg和無水乙醇46L，加熱至乙醇回流，直至物料基本溶清，然后加入乙醇鈉乙醇溶液1.45L，回流攪拌反應1小時。取樣用HPLC監測反應，原料阿樸長春胺含量為1.89％(少于3％)，停止回流。用自來水降溫至40℃左右，減壓移除全部溶劑，得固狀物，再重新加入新鮮無水乙醇46L，再熱至回流，直至溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液0.35L，再回流反應30分鐘。再監測，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充乙醇40-60L，回流溶清。用預熱至60-70℃的D40不銹鋼多孔快速過濾器趁熱過濾反應液，去除不溶物。將濾液轉移至干燥潔凈的100L反應釜中，物料會析出，再溶清后蒸出部分乙醇，控制釜內乙醇余量為35-43L。在攪拌下，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套自來水并繼續攪拌2小時熟化結晶。放料，抽干，用無水乙醇6L×2分次充分淋洗，抽干，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

3、精制長春西汀

將長春西汀粗品重新投入釜內，加純化水48L，攪拌2小時，再放料抽干，先用純化水6L×2分次充分淋洗，抽干，再用無水乙醇2L×2分次淋洗，抽干，即得水洗產品。再將其用44L無水乙醇加熱溶清，使溶液稍冷后，加入活性炭140g，攪拌20-30分鐘后趁熱過濾之，將濾液轉移至50L反應釜中。物料會析出，重新升溫回流溶清，再在常壓下蒸除少量溶劑，控制反應釜剩余乙醇約28L，然后繼續攪拌，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套冷卻水并繼續攪拌2小時熟化結晶，放料，抽干，用無水乙醇4L×2分次充分淋洗，收集濾餅，置于熱風循環電汽烘箱中，于65-70℃下連續干燥不少于24小時，得精制長春西汀，重1.91kg，純度約99.6％。

實施例7

本實施例的阿樸長春胺的純度不低于97.5％。

本實施以阿樸長春胺為原料制備長春西汀。

本實施例制備長春西汀的方法包括如下步驟：

1)制備長春西汀粗品

在攪拌下，在100L反應釜中投入阿樸長春胺3.76kg和無水乙醇46L，加熱至乙醇回流，直至物料基本溶清，然后加入乙醇鈉乙醇溶液1.45L，回流攪拌反應1小時。取樣用HPLC監測反應，原料阿樸長春胺含量為1.05％(少于3％)，停止回流。用自來水降溫至40℃左右，減壓移除全部溶劑，得固狀物，再重新加入新鮮無水乙醇46L，再熱至回流，直至溶清，補充乙醇鈉乙醇溶液0.35L，再回流反應30分鐘。再監測，當原料阿樸長春胺含量少于0.3％時立即結束反應。補充乙醇40-60L，回流溶清。用預熱至60-70℃的D40不銹鋼多孔快速過濾器趁熱過濾反應液，去除不溶物。將濾液轉移至干燥潔凈的100L反應釜中，物料會析出，再溶清后蒸出部分乙醇，控制釜內乙醇余量為35-43L。在攪拌下，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套自來水并繼續攪拌2小時熟化結晶。放料，抽干，用無水乙醇6L×2分次充分淋洗，抽干，收集濾餅，即為長春西汀粗品。

HPLC檢測方法的條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH至6.0)-乙腈(45：55)為流動相，檢測波長280nm。

2)精制長春西汀

將長春西汀粗品重新投入釜內，加純化水48L，攪拌2小時，再放料抽干，先用純化水6L×2分次充分淋洗，抽干，再用無水乙醇2L×2分次淋洗，抽干，即得水洗產品。再將其用44L無水乙醇加熱溶清，使溶液稍冷后，加入活性炭140g，攪拌20-30分鐘后趁熱過濾之，將濾液轉移至50L反應釜中。物料會析出，重新升溫回流溶清，再在常壓下蒸除少量溶劑，控制反應釜剩余乙醇約28L，然后繼續攪拌，經過約10-12小時自然冷卻降溫至接近常溫，再開啟夾套冷卻水并繼續攪拌2小時熟化結晶，放料，抽干，用無水乙醇4L×2分次充分淋洗，收集濾餅，置于熱風循環電汽烘箱中，于65-70℃下連續干燥不少于24小時，得精制長春西汀，重1.96kg，純度約99.4％。

實驗結果

參照歐洲藥典EP6.0和瑞士進口注冊標準，對實施例6～8制備的長春西汀中的已知雜質進行了補充研究，長春西汀原料中可能存在的已知雜質包括長春胺酸乙酯(EP雜質A)，阿樸長春胺(EP雜質B),甲氧基長春西汀(EP雜質C)，二氫長春西汀(EP雜質D)，阿樸長春胺酸(EP中未收載)。經過對長期留樣近30個月的樣品用液相色譜質譜聯用儀對雜質進行測定，發現樣品中只存在長春胺酸乙酯(EP雜質A)，阿樸長春胺(EP雜質B),甲氧基長春西汀(EP雜質C)，不存在二氫長春西汀(EP雜質D)和阿樸長春胺酸，同時對樣品中存在的已知雜質進行了方法學研究，包括系統適用性、線性、精密度、檢測限、定量限等進行了系統研究，并將存在的三個已知雜質參照歐洲藥典EP6.0定入質量標準，限度同歐洲藥典6.0，工藝驗證三批的樣品(放置18個月)經測定均符合要求。

工藝驗證

對實施例6～8制備的長春西汀的方法進行驗證，其驗證的質量標準的項目、測定方法和限度如表4所示，驗證的結果如表5所示。

表4制備長春西汀方法驗證

表5實施例5-7制備的長春西汀全檢驗證結果概況

從表5可以看出，本發明的制備長春西汀的方法制備的長春西汀的熔點，比旋度，殘留溶劑，單一雜質含量，總雜質含量，干燥失重，灼燒殘渣，重金屬含量，性狀等都符合歐洲藥典EP6.0標準。