技術特征：

1.一種水溶性的生物硫醇雙光子熒光探針，其特征在于，其結構式如式(I)所示：

2.一種權利要求1所述的水溶性的生物硫醇雙光子熒光探針的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟：

(1)將1mmol化合物1與1.2mmol 6-羥基萘醛在氮氣氛圍下加至反應瓶中，然后將0.5mL冰醋酸和30mL乙醇一次加至上述反應器中，于氮氣氛圍下在加熱回流6h后，點板檢測反應完全，反應液冷至室溫，析出沉淀，抽濾，得到粗產品，用無水乙醇重結晶，得到紅色產物NBI；所述化合物1的結構式如下所示：

所述化合物NBI的結構式如下：

(2)將1mol化合物NBI和0.5mL三乙胺溶解在干燥的20mL二氯甲烷中，冰浴條件下，逐滴滴入3mmol丙烯酰氯的二氯甲烷溶液，冰浴下反應1h后，室溫反應2h停止反應，有機相用二次水洗三次，干燥，抽濾，減壓濃縮，粗產品通過柱色譜分離即得到目標探針化合物。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中柱色譜分離提純所用洗脫劑配比為CH₂Cl₂:MeOH＝25:1。

4.一種權利要求1所述的生物硫醇雙光子熒光探針的應用，其特征在于，該熒光探針可用于水環境和生物體系中生物硫醇的傳感檢測；所述傳感檢測包含熒光檢測、細胞成像和組織成像的檢測。