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B30位蘇氨酸缺失人胰島素晶體的制備方法與流程

文檔序號:12399367閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種B30位蘇氨酸缺失人胰島素晶體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將B30位蘇氨酸缺失人胰島素溶解,加入有機溶劑、鋅離子、檸檬酸三鈉和無機鹽,得到結晶液;(2)調節結晶液的pH值,進行結晶,即得。

2.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述結晶液中檸檬酸三鈉的濃度為0.01-0.1M,優選為0.01-0.05M,最優選為0.025-0.05M。

3.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述結晶液中鋅離子與B30位蘇氨酸缺失人胰島素的摩爾比為7-20:1,優選為10-15:1,更優選為10-12:1,最優選為10-11:1;

所述鋅離子選自氯化鋅、醋酸鋅或碘化鋅中的任意一種,優選為氯化鋅或醋酸鋅中的任意一種。

4.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述結晶液中有機溶劑的體積百分比為5-20%,優選為8-18%,更優選為9-15%,最優選為10-15%;

所述有機溶劑選自丙酮、乙腈或2-甲基-2,4-戊二醇中的任意一種,優選為丙酮。

5.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述結晶液中無機鹽的濃度為0.01-0.05M,優選為0.01-0.03M,最優選為0.01-0.02M;

所述無機鹽選自氯化鈉、硫酸銨或醋酸銨中的任意一種或兩種,優選為氯化鈉。

6.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述結晶液中B30位蘇氨酸缺失人胰島素的濃度為3-9g/L,優選為3-5g/L。

7.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述溶解是用稀酸溶解B30位蘇氨酸缺失人胰島素;其中,所述稀酸的濃度為10-40mM,優選為15-30mM;最優選為20-25mM;

所述稀酸選自鹽酸、檸檬酸或醋酸中的任意一種。

8.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述調節結晶液的pH值包括:先調節結晶液的pH值為7.6-8.5,然后加入有機酸調節pH值為5.7-6.2;

優選為,先調節結晶液的pH值為7.8-8.0,然后加入有機酸調節pH值為5.8-6.0。

9.按照權利要求8所述的制備方法,其特征在于,所述有機酸為檸檬酸。

10.按照權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述結晶的方式選自①-②中的任意一種:

①室溫靜置15-50min,攪拌3-6h,然后2-8℃靜置5-9h,得到結晶;優選為,室溫靜置40-50min,攪拌3-4h,然后4℃靜置8-9h,得到結晶;

②室溫靜置5-6h,然后4℃靜置8-10h。

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