本發(fā)明屬于生物工程，尤其涉及到一種耐熱短小芽孢桿菌bacilluspumilus?p2-7及其在對(duì)蝦養(yǎng)殖病害防控中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、水體中銅綠假單胞菌(pseudomonas?aeruginosa)、海藻希瓦氏菌

2、(shewanella?algae)、類志賀鄰單胞菌(plesiomonas?shigelloides)、美人魚發(fā)光桿菌(photobacterium?damselae)、威尼斯不動(dòng)桿菌(acinetobacter?venetianus)、陰溝腸桿菌(enterobacter?cloacae)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌

3、(stenotrophomonas?maltophilia)、雷氏普羅威登菌(providencia?rettgeri)等潛在致病菌的存在已經(jīng)成為威脅對(duì)蝦養(yǎng)殖甚至人類的健康的重要因素。例如，威尼斯不動(dòng)桿菌能夠引起南美白對(duì)蝦紅腿病(huang?x，等.acinetobacter?venetianus,a?potentialpathogen?of?red?leg?disease?in?freshwater-cultured?whiteleg?shrimp?penaeusvannamei[j].aquaculture?reports,2020,18:100543.)，雷氏普羅威登菌能夠引起日本對(duì)蝦紅腿病(cao?h，等.phenotypic?and?genomic?characterization?of?pathogenicprovidencia?rettgeri?from?kuruma?shrimp?marsupenaeus?japonicus.transboundaryand?emerging?diseases,2022,1-11.)。因此，水體中這些致病菌的控制對(duì)對(duì)蝦養(yǎng)殖極其重要。

4、噬菌益生菌是一類具有噬菌特性的微生物，被譽(yù)為致病菌的天然生物控制因子。例如，噬菌蛭弧菌、噬菌弧菌等噬菌益生菌已經(jīng)被證實(shí)在對(duì)蝦養(yǎng)殖病害防控中已經(jīng)展示了良好的應(yīng)用效果(張呂平,等.噬菌蛭弧菌預(yù)防對(duì)蝦弧菌感染的應(yīng)用研究[j].漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展,2009,30(1):26-33.趙炎.食弧菌嗜鹽噬菌弧菌bl9菌劑的制備及其在南美白對(duì)蝦無抗養(yǎng)殖中的應(yīng)用[d].華僑大學(xué),2021.)。然而，這些噬菌益生菌均為革蘭氏陰性菌，作為革蘭氏陽性菌的噬菌益生菌及其在對(duì)蝦養(yǎng)殖病害防控中的應(yīng)用卻鮮有報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種耐熱短小芽孢桿菌p2-7及其在對(duì)蝦養(yǎng)殖病害防控中的應(yīng)用，該菌株通過噬菌方式發(fā)揮功效，能夠顯著清除/抑制水體中的致病菌，并且可有效防控對(duì)蝦希瓦菌病，對(duì)同時(shí)預(yù)防對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的敗血癥、急性肝胰腺壞死病、白斑綜合征、傳染性皮下及造血組織壞死癥也具有良好的效果。

2、為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7，于2024年11月4日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，中國(guó).廣東，保藏編號(hào)為gdmccno.65408。

3、作為優(yōu)選，所述耐熱短小芽孢桿菌p2-7的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

4、本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述技術(shù)方案所述的耐熱短小芽孢桿菌bacilluspumilus?p2-7在清除/抑制養(yǎng)殖水體中的致病菌中的應(yīng)用。

5、作為優(yōu)選，耐熱短小芽孢桿菌p2-7以噬菌方式抑菌。

6、作為優(yōu)選，所述致病菌選自銅綠假單胞菌(pseudomonas?aeruginosa)fj1-2、海藻希瓦氏菌(shewanella?algae)sfh3、類志賀鄰單胞菌(plesiomonas?shigelloides)bd1、美人魚發(fā)光桿菌(photobacterium?damselae)yj-1、威尼斯不動(dòng)桿菌(acinetobactervenetianus)shf1、陰溝腸桿菌(enterobacter?cloacae)ht2、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonas?maltophilia)wy1、雷氏普羅威登菌(providencia?rettgeri)s6中的至少一種。

7、本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述技術(shù)方案所述的耐熱短小芽孢桿菌bacilluspumilus?p2-7在對(duì)蝦希瓦菌病防控中的應(yīng)用。

8、作為優(yōu)選，在海藻希瓦菌sfh3的濃度為5.0×106cfu/ml時(shí)，加入0.8mg/l耐熱短小芽孢桿菌p2-7的菌粉能夠?qū)?duì)蝦預(yù)防希瓦菌病的保護(hù)率提升到82％以上。

9、本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述技術(shù)方案所述的耐熱短小芽孢桿菌bacilluspumilus?p2-7在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的病害防控中的應(yīng)用。

10、作為優(yōu)選，在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中，同時(shí)潑灑0.4mg/l耐熱短小芽孢桿菌p2-7菌粉和投喂含有20g/kg飼料的耐熱短小芽孢桿菌p2-7菌粉的飼料，能夠同時(shí)預(yù)防敗血癥、急性肝胰腺壞死病、白斑綜合征、傳染性皮下及造血組織壞死癥的發(fā)生。

11、本發(fā)明還提供了一種養(yǎng)殖飼料，其特征在于，含有上述技術(shù)方案所述的耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7作為飼料原料。

12、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果在于：

13、1、本發(fā)明從對(duì)蝦養(yǎng)殖底泥中分離鑒定出一株具有廣譜噬菌活性的耐熱短小芽孢桿菌p2-7，其對(duì)銅綠假單胞菌fj1-2、海藻希瓦氏菌sfh3、類志賀鄰單胞菌bd1、美人魚發(fā)光桿菌yj-1、威尼斯不動(dòng)桿菌shf1、陰溝腸桿菌ht2、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌wy1、雷氏普羅威登菌s6等致病菌均具有良好的噬菌效果，能夠顯著清除/抑制水體中的上述致病菌。

14、2、本發(fā)明提供的耐熱短小芽孢桿菌p2-7與傳統(tǒng)抗菌芽孢桿菌的拮抗方式不同，不能分泌具有抗菌活性的代謝產(chǎn)物，而是通過噬菌作用發(fā)揮功效，可有效防控對(duì)蝦希瓦菌病，并且同時(shí)預(yù)防對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的敗血癥、急性肝胰腺壞死病、白斑綜合征、傳染性皮下及造血組織壞死癥也具有良好的效果。

技術(shù)特征：

1.耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7，其特征在于，于2024年11月4日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號(hào)為gdmcc?no.65408。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7，其特征在于，其核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7在清除/抑制養(yǎng)殖水體中的致病菌中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，耐熱短小芽孢桿菌p2-7以噬菌方式抑菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述致病菌選自銅綠假單胞菌(pseudomonas?aeruginosa)fj1-2、海藻希瓦氏菌(shewanella?algae)sfh3、類志賀鄰單胞菌(plesiomonas?shigelloides)bd1、美人魚發(fā)光桿菌(photobacterium?damselae)yj-1、威尼斯不動(dòng)桿菌(acinetobacter?venetianus)shf1、陰溝腸桿菌(enterobacter?cloacae)ht2、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonas?maltophilia)wy1、雷氏普羅威登菌(providencia?rettgeri)s6中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7在對(duì)蝦希瓦菌病防控中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，在海藻希瓦菌sfh3的濃度為5.0×106cfu/ml時(shí)，加入0.8mg/l耐熱短小芽孢桿菌p2-7的菌粉能夠?qū)?duì)蝦預(yù)防希瓦菌病的保護(hù)率提升到82％以上。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱短小芽孢桿菌bacillus?pumilus?p2-7在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的病害防控中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中，同時(shí)潑灑0.4mg/l耐熱短小芽孢桿菌p2-7菌粉和投喂含有20g/kg飼料耐熱短小芽孢桿菌p2-7菌粉的飼料，能夠同時(shí)預(yù)防敗血癥、急性肝胰腺壞死病、白斑綜合征、傳染性皮下及造血組織壞死癥的發(fā)生。

10.養(yǎng)殖飼料，其特征在于，含有權(quán)利要求1所述的耐熱短小芽孢桿菌bacilluspumilus?p2-7作為飼料原料。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種耐熱短小芽孢桿菌P2?7及其在對(duì)蝦養(yǎng)殖病害防控中的應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的耐熱短小芽孢桿菌P2?7于2024年11月4日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號(hào)為GDMCC?NO.65408。該菌株與傳統(tǒng)抗菌芽孢桿菌的拮抗方式不同，不能分泌具有抗菌活性的代謝產(chǎn)物，而是通過噬菌方式發(fā)揮功效，能夠顯著清除/抑制水體中的致病菌，并且可有效防控對(duì)蝦希瓦菌病，對(duì)同時(shí)預(yù)防對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的敗血癥、急性肝胰腺壞死病、白斑綜合征、傳染性皮下及造血組織壞死癥也具有良好的效果。

技術(shù)研發(fā)人員：蓋春蕾,曹海鵬,楊月琪,何莉,許拉,王友紅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東省海洋科學(xué)研究院（青島國(guó)家海洋科學(xué)研究中心）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/3/20