本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖,具體是一種褐藻多糖制劑及其制備方法和抗加州鱸腸炎的飼料。
背景技術(shù):
1、加州鱸(micropterus?salmonides)作為一種重要的淡水養(yǎng)殖魚類,在我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占據(jù)顯著地位,其肉質(zhì)鮮美,深受消費者喜愛,市場需求持續(xù)增長。然而,隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大與養(yǎng)殖密度的日益增加,加州鱸養(yǎng)殖面臨諸多挑戰(zhàn),其中腸炎疾病的頻繁爆發(fā)成為制約其產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。
2、腸炎疾病在加州鱸養(yǎng)殖過程中發(fā)病率高,主要由多種細菌、病毒以及環(huán)境應(yīng)激等因素引發(fā)。患病加州鱸通常表現(xiàn)出食欲不振、生長緩慢、腸道充血發(fā)炎等癥狀,嚴重時可導(dǎo)致大量死亡。傳統(tǒng)的防治方法多依賴抗生素類藥物,長期使用抗生素不僅容易引發(fā)細菌耐藥性問題,導(dǎo)致藥物療效降低,而且藥物殘留會對加州鱸品質(zhì)產(chǎn)生不良影響,危害消費者健康,同時也會對養(yǎng)殖水體環(huán)境造成污染,破壞水域生態(tài)平衡。
3、多糖作為一類從海藻中提取的天然生物大分子物質(zhì),具有多種生物活性,如免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗菌消炎等功能。褐藻多糖富含硫酸基,具有獨特的生理活性,有望從調(diào)節(jié)加州鱸腸道微生態(tài)平衡、增強腸道黏膜免疫功能以及抑制病原菌生長等多方面入手,有效預(yù)防和治療加州鱸腸炎疾病,同時避免抗生素帶來的諸多弊端,為加州鱸健康養(yǎng)殖提供一種綠色、安全、高效的新型解決方案,符合現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)發(fā)展的需求。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點和不足,而提供一種褐藻多糖制劑及其制備方法和利用該褐藻多糖制劑制備的抗加州鱸腸炎的飼料,以解決加州鱸養(yǎng)殖過程中腸炎頻發(fā)的問題,為其健康養(yǎng)殖提供有力支持。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下:
2、首先,本發(fā)明提供一種褐藻多糖制劑的制備方法,包括以下步驟:
3、s1.將干凈的褐藻在-50℃至-60℃下冷凍干燥24-48小時,直至褐藻脫水變脆,隨后,將脫水后的褐藻粉碎成粉末,過80-100目篩;
4、s2.將纖維素酶、褐藻酸酶和木聚糖酶復(fù)配得到復(fù)合酶制劑;
5、s3.將s1制備的褐藻粉末與去離子水按照1:20-1:30的質(zhì)量/體積比例混合,形成均勻的懸浮液,調(diào)節(jié)ph至5.0-5.5,然后加入復(fù)合酶制劑,酶的添加量為褐藻粉末質(zhì)量的1.0%-1.5%;
6、s4.在s3配置完成后進行持續(xù)酶解,酶解過程總計4-6小時,分為三個階段:
7、第一階段持續(xù)0-2小時,ph為5.0-5.5,溫度為45-50℃,第一階段結(jié)束時,進行固液分離,收集上清液;
8、第二階段在第一階段后持續(xù)0-2小時,ph調(diào)至5.5-6.0,溫度升高至50-55℃,第二階段結(jié)束時,進行固液分離,收集上清液;
9、第三階段在第二階段后持續(xù)0-2小時,ph調(diào)至6.0-6.5,降低溫度至45℃,第三階段結(jié)束時,進行固液分離,收集上清液;
10、s5.將s4中三個階段收集的上清液合并,使用截留相對分子質(zhì)量為100kda的超濾膜去除雜質(zhì),然后,將透過液通過截留相對分子質(zhì)量為10kda的超濾膜,進一步濃縮多糖溶液;
11、s6.對s5制備的濃縮多糖溶液進行脫鹽、純化處理,得到褐藻多糖制劑。
12、作為優(yōu)選,在上述步驟s6中,采用離子交換色譜法,使用強酸性陽離子交換樹脂和強堿性陰離子交換樹脂,依次去除溶液中的陽離子和陰離子;再將脫鹽后的多糖溶液通過凝膠滲透色譜柱進行純化,根據(jù)多糖分子的大小和形狀差異進行分離,收集單一洗脫峰對應(yīng)的多糖溶液。
13、作為優(yōu)選,在上述步驟s2中,纖維素酶、褐藻酸酶和木聚糖酶按照3:2:1的質(zhì)量比進行復(fù)配。
14、上述提取制備海帶多糖制劑的方法具有以下優(yōu)點:
15、1.高提取率與純度:通過精準的復(fù)合酶系選擇和酶解條件控制,以及動態(tài)分段提取策略,能夠充分釋放海帶中的多糖成分,顯著提高多糖的提取率,相比傳統(tǒng)方法可提高20%-30%。同時,通過多步分離純化技術(shù),能夠有效去除雜質(zhì),得到高純度的海帶多糖,純度可達95%以上。
16、2.獨特結(jié)構(gòu)與功能:動態(tài)分段提取和結(jié)構(gòu)修飾技術(shù)使得制備的海帶多糖具有獨特的結(jié)構(gòu)特征,如特定的分子量分布、硫酸化程度和取代位置等,這些結(jié)構(gòu)特征賦予多糖獨特的生物活性,如更強的抗氧化能力、免疫調(diào)節(jié)活性和抗腫瘤活性等,在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域具有更廣闊的應(yīng)用前景。
17、3.綠色環(huán)保與可持續(xù)性:本方法采用溫和的酶解條件,避免了傳統(tǒng)化學(xué)提取方法中使用大量強酸、強堿和有機溶劑,減少了環(huán)境污染和能耗。同時,海帶作為一種豐富的可再生資源,為大規(guī)模制備海帶多糖提供了可持續(xù)的原料來源。
18、第二方面,本發(fā)明提供一種褐藻多糖制劑,其采用上述的褐藻多糖制劑的制備方法制備得到。
19、第三方面,本發(fā)明提供一種抗加州鱸腸炎的飼料,包括如上所述的褐藻多糖制劑,常規(guī)的加州鱸飼料大致包括魚粉、豆粕、魚油、小麥粉、維生素預(yù)混料、礦物質(zhì)預(yù)混料等成分,本褐藻多糖制劑直接與其按質(zhì)量比混合即可。
20、作為優(yōu)選,所述褐藻多糖制劑在飼料中的添加量為飼料總質(zhì)量的0.1-0.3%。
21、作為最優(yōu)選,所述褐藻多糖制劑在飼料中的添加量為飼料總質(zhì)量的0.2%。
22、本發(fā)明的有益效果如下:本發(fā)明提供的褐藻多糖制劑可應(yīng)用于制備預(yù)防和/或治療加州鱸腸炎的飼料添加劑。該褐藻多糖制劑添加在飼料中,能夠在加州鱸攝食過程中進入腸道發(fā)揮作用,通過調(diào)節(jié)腸道、增強腸道功能,有效預(yù)防腸炎的發(fā)生;并且在加州鱸已患腸炎時,能夠促進腸道組織的修復(fù),減輕炎癥反應(yīng),提高加州鱸的康復(fù)速度。
23、經(jīng)實驗驗證,在加州鱸養(yǎng)殖過程中,將本發(fā)明提供的褐藻多糖制劑添加到加州鱸飼料中,在養(yǎng)殖實踐中,按照0.1%-0.3%添加量投喂加州鱸,經(jīng)過一段時間后,可顯著降低加州鱸腸炎的發(fā)病率。
1.一種褐藻多糖制劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種褐藻多糖制劑的制備方法,其特征在于,步驟s6中,采用離子交換色譜法,使用強酸性陽離子交換樹脂和強堿性陰離子交換樹脂,依次去除溶液中的陽離子和陰離子;再將脫鹽后的多糖溶液通過凝膠滲透色譜柱進行純化,根據(jù)多糖分子的大小和形狀差異進行分離,收集單一洗脫峰對應(yīng)的多糖溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種褐藻多糖制劑的制備方法,其特征在于,步驟s2中,纖維素酶、褐藻酸酶和木聚糖酶按照3:2:1的質(zhì)量比進行復(fù)配。
4.一種褐藻多糖制劑,采用如權(quán)利要求1-3任一項所述的褐藻多糖制劑的制備方法制備得到。
5.一種抗加州鱸腸炎的飼料,包括如權(quán)利要求4所述的一種褐藻多糖制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗加州鱸腸炎的飼料,其特征在于:所述褐藻多糖制劑在飼料中的添加量為飼料總質(zhì)量的0.1-0.3%。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗加州鱸腸炎的飼料,其特征在于:所述褐藻多糖制劑在飼料中的添加量為飼料總質(zhì)量的0.2%。