技術特征：

1.一種血必凈中間體有效成分的含量測定方法，其特征在于，步驟如下：

步驟一：以芍藥苷為內參物的相對校正因子的測定

a、標準溶液的制備：

分別精密稱取羥基紅花黃色素A對照品、芍藥苷對照品、阿魏酸對照品、苯甲酸對照品適量，置容量瓶中，以50％甲醇水溶液為溶劑，溶解并定容至刻度，制得含羥基紅花黃色素A、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸一定濃度的對照品混標濃溶液；將混標濃溶液進行七步梯度稀釋，使得各步稀釋后的標準溶液中各成分濃度分別在供試品限度濃度的40％、60％、80％、100％、120％、140％、160％；

b、各組分校正因子計算：

采用兩臺不同高效液相色譜儀，取步驟a中制得的7個不同濃度的標準溶液按步驟權利要求1給定色譜條件進樣，記錄色譜圖，分別以各成分相對應的濃度為橫坐標，相應峰面積為縱坐標，按最小二乘法進行線性回歸，繪制標準曲線，將羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苯甲酸標準曲線的斜率分別除以芍藥苷標準曲線的斜率，即為各成分相對芍藥苷的校正因子；

步驟二：按校正因子法測定供試品中羥基紅花黃色素A、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸含量：

a、對照品工作溶液制備：精密稱取芍藥苷對照品適量，置容量瓶中，以50％甲醇水溶液為溶劑，制得含芍藥苷濃度為C_R的對照品工作溶液；

b、供試品溶液制備：精密移取供試品，置容量瓶中，加50％甲醇水溶液稀釋至刻度搖勻，作為供試品溶液；

c、測定方法：分別精密量取對照品混標工作溶液、供試品溶液，分別注入液相色譜儀，按步驟(1)給定色譜條件進樣，記錄色譜圖，根據步驟一中確定的校正因子，按下述公式計算羥基紅花黃色素A、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸含量，

$X=\frac{C_R}{A_R}\×A_X\×\frac{1}{F}\×20$

式中：X——供試品中各成分的含量，mg/ml

C_R——對照品工作溶液中芍藥苷濃度，mg/ml

A_R——對照品工作溶液中芍藥苷峰面積

A_X——供試品溶液中各成分峰面積

F——各成分相對芍藥苷的校正因子

其中，液相色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，

流動相：甲醇：醋酸水溶液，000ml水中加入36％冰醋酸水溶液5ml，體積比10：90-30：70，

流速：0.8-1.2ml/min，

柱溫：30℃，

檢測波長：230nm，

進樣量：20μl，

運行時間：60min；

所述血必凈中間體多指標成分為羥基紅花黃色素A、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸。

2.如權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于，液相色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，

流動相：甲醇：醋酸水溶液，1000ml水中加入36％冰醋酸水溶液5ml，體積比：20：80

流速：1.0ml/min，

柱溫：30℃，

檢測波長：230nm，

進樣量：20μl，

運行時間：60min。

3.如權利要求2所述的含量測定方法，其特征在于，液相色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，

流動相：甲醇：醋酸水溶液，1000ml水中加入36％冰醋酸水溶液5ml，10：90

流速：0.8ml/min，

柱溫：30℃，

檢測波長：230nm，

進樣量：20μl，

運行時間：60min。

4.如權利要求2所述的含量測定方法，其特征在于，液相色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，

流動相：甲醇：醋酸水溶液，1000ml水中加入36％冰醋酸水溶液5ml，體積比：30：70，

流速：1.2ml/min，

柱溫：30℃，

檢測波長：230nm，

進樣量：20μl，

運行時間：60min。