本發明涉及分析檢測，尤其是涉及一種蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜構建方法。

背景技術：

1、蜜麩炒黨參(黨參)為黨參(黨參)藥材用蜜麩拌炒至黃色，篩去麩皮而得的炮制品。蜜麩炒黨參(黨參)標準湯劑是由藥材經炮制后按固定的制備工藝而成的凍干粉；蜜麩炒黨參(黨參)配方顆粒是藥材經炮制并按標準湯劑的主要質量指標加工制成的配方顆粒。

2、為了確保藥材、飲片、標準湯劑、配方顆粒質量的均一、穩定，本發明建立一種新的特征圖譜方法對其質量進行控制；并能與黨參(黨參)及其制劑進行明顯的鑒別。

技術實現思路

1、有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜構建方法，本發明構建的蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒uplc特征圖譜方法穩定，可靠，可以對蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒的質量進行控制。黨參在《中國藥典》2020年版中描述有黨參、素花黨參和川黨參三個基源，本發明研究的對象均采用以黨參為基源的原材料，全文中括號里表述的黨參均代表本發明研究對象的基源。

2、本發明建立了黨參(黨參)藥材、蜜麩炒黨參(黨參)飲片及其標準湯劑及配方顆粒uplc特征圖譜方法，為鑒別黨參(黨參)藥材、蜜麩炒黨參(黨參)飲片及其標準湯劑及配方顆粒提供科學的鑒別依據，并能與黨參及其制劑進行明顯的鑒別。

3、本發明提供了一種蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和/或黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜構建方法，包括：

4、a)將黨參(黨參)藥材加水煎煮，過濾，殘渣加水超聲處理，得到黨參(黨參)藥材待測液；

5、將蜜麩炒黨參(黨參)原料采用溶劑提取，得到蜜麩炒黨參(黨參)待測液；所述蜜麩炒黨參(黨參)原料包括蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒；

6、b)將黨參(黨參)藥材待測液采用高效液相色譜法測定，得到黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜；

7、將蜜麩炒黨參(黨參)待測液采用高效液相色譜法測定，得到蜜麩炒黨參(黨參)原料的uplc特征圖譜；

8、所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為c18柱；流動相a為乙腈，流動相b為0.2％甲酸，梯度洗脫；

9、所述梯度洗脫具體為：

10、0～15min，a相：0～2％、b相：100～98％；

11、15～30min，a相：2％～15％、b相：98％～85％；

12、30～40min，a相：15％～20％、b相：85％～80％；

13、40～50min，a相：20％～30％、b相：80％～70％。

14、本發明提供的蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜構建方法首先將黨參(黨參)藥材加水煎煮，過濾，殘渣加水超聲處理，得到黨參(黨參)藥材待測液；黨參(黨參)藥材加水煎煮的質量體積比為2g：100ml；所述黨參(黨參)藥材加水煎煮的時間為20～30min；優選為30min；超聲功率為600w，頻率為40khz，所述超聲時間為20～30min。

15、將蜜麩炒黨參(黨參)原料和溶劑混合超聲處理，得到蜜麩炒黨參(黨參)待測液；所述蜜麩炒黨參(黨參)原料包括蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒；

16、當蜜麩炒黨參(黨參)原料為蜜麩炒黨參飲片時，前處理為：蜜麩炒黨參(黨參)飲片加水煎煮，過濾，殘渣加水超聲處理，放冷，搖勻，濾過，即得；所述加水煎煮的時間為20～30min；優選為30min；超聲功率為600w，頻率為40khz，所述超聲時間為20～30min；

17、當蜜麩炒黨參(黨參)原料為蜜麩炒黨參(黨參)標準湯劑或配方顆粒時，前處理為：將蜜麩炒黨參(黨參)標準湯劑或配方顆粒加水超聲處理，放冷，搖勻，濾過，即得；超聲功率為600w，頻率為40khz，所述超聲時間為20～30min；優選為30min；蜜麩炒黨參(黨參)標準湯劑或配方顆粒和水的質量體積比為2g:25ml。

18、本發明采用上述提取溶劑色譜峰信息量大，效果好。

19、還包括制備對照品和對照藥材參照物溶液：

20、取黨參苷i對照品，采用甲醇溶解，得到對照品參照物溶液；

21、取黨參(黨參)對照藥材加水煮沸，過濾，殘渣加水超聲處理，放冷，搖勻，濾過，取濾液，得到對照藥材參照物溶液；

22、將所述對照品和對照藥材參照物溶液采用高效液相色譜法測定，分別得到對照品和對照藥材參照物的色譜圖；并根據對照品和對照藥材參照物的色譜圖對蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參藥材uplc特征圖譜的成分進行定性測定。

23、本發明所述流動相a為乙腈，流動相b為0.2％甲酸溶液，梯度洗脫。

24、本發明所述梯度洗脫優選具體為：

25、0～15min，a相：0～2％、b相：100～98％；

26、15～30min，a相：2％～15％、b相：98％～85％；

27、30～40min，a相：15％～20％、b相：85％～80％；

28、40～50min，a相：20％～30％、b相：80％～70％。

29、本發明在上述洗脫梯度下基線分離好，各個峰分離度好，基線平穩。

30、c18柱，規格為1.6μm～1.9μm，2.1×150mm；柱溫30℃。

31、本發明色譜柱優選為：hypersilgold?tm?a?q?2.1×150mm,1.9μm；acquitybehc182.1×150mm,1.6μm；shim-pack?gist-hp?c18-aq2.1×150mm,1.7μm。

32、本發明色譜柱在上述30℃條件下色譜峰對稱、分離度好，出峰時間適中。

33、流動相流速優選為0.2ml/min。

34、本發明發現流速0.2ml/min下各色譜峰分離較好，峰形較對稱，分離度適中，作為最優選方案。

35、本發明檢測波長優選為268nm。

36、本發明人發現，在268nm處色譜信息豐富，色譜峰信息量大，各成分均有較好吸收，響應值適中，各峰分離度較好，基線平穩。

37、本發明進樣量優選為1μl。

38、本發明的有益效果是，一個液相色譜條件下，以指紋圖譜控制蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的物質群，以黨參苷i對指紋圖譜進行定位；能夠大大降低檢測的成本，實現定性檢測。

39、采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統對蜜麩炒黨參飲片、標準湯劑及其配方顆粒uplc特征圖譜的相似度進行評價，得到由9個特征峰構成的蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒uplc標準特征圖譜，其中峰7(s)：黨參苷i；峰8：黨參炔苷寧；峰9：黨參炔苷；在所述蜜麩炒黨參(黨參)原料特征圖譜中，以黨參苷i峰為參照峰s峰，計算各特征峰與s峰的相對保留時間，所述相對保留時間在規定值的±10％之內，所述規定值分別為：0.23(峰1)、0.26(峰2)、0.31(峰3)、0.35(峰4)、0.42(峰5)、0.81(峰6)、1.14(峰8)、1.27(峰9)。

40、采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統對黨參(黨參)藥材uplc特征圖譜的相似度進行評價，得到由10個特征峰構成的黨參(黨參)藥材uplc標準特征圖譜，其中峰7(s)：黨參苷i；峰8：黨參炔苷寧；峰9：黨參炔苷；在所述黨參藥材特征圖譜中，以黨參苷i峰為參照峰s峰，計算各特征峰與s峰的相對保留時間，所述相對保留時間在規定值的±10％之內，所述規定值分別為：規定值為：0.23(峰1)、0.26(峰2)、0.31(峰3)、0.35(峰4)、0.42(峰5)、0.63(峰6)、0.81(峰7)、1.14(峰9)、1.27(峰10)。

41、質量判斷標準：取蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材樣品，按上述同法操作，得到蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒特征圖譜，采用國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統》2012版對蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒標準特征圖譜和樣品特征圖譜進行分析，相似度大于0.90。

42、本發明還提供了一種蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的鑒別方法，其特征在于，采用權利要求1～9任意一項所述的方法進行鑒別；黨參藥材uplc特征圖譜具有10個峰；蜜麩炒黨參(黨參)飲片及其標準湯劑、配方顆粒uplc特征圖譜具有9個峰；黨參(黨參)藥材相對于蜜麩炒黨參原料多了峰6，可以對二者進行鑒別。

43、本發明蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑及其配方顆粒uplc特征圖譜方法及從色譜峰中指認出的峰有：峰7(s)：黨參苷i；峰8：黨參炔苷寧；峰9：黨參炔苷；黨參(黨參)藥材uplc特征圖譜方法及從色譜峰中指認出的峰有：峰8(s)：黨參苷i；峰9：黨參炔苷寧；峰10：黨參炔苷；

44、黨參(黨參)藥材uplc特征圖譜具有10個峰；蜜麩炒黨參(黨參)飲片及其標準湯劑、配方顆粒uplc特征圖譜具有9個峰；

45、黨參(黨參)藥材有10個峰，比蜜麩炒黨參(黨參)飲片及其標準湯劑、配方顆粒多了峰6，能對黨參(黨參)及蜜麩炒黨參(黨參)進行明顯的鑒別。

46、采用本發明所提供的方法能有效的監控不同批次蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參藥材的質量，使其質量穩定，方法具有精密度高、重現性好等特點，有利于全面監控產品的質量。

47、本發明建立的蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材特征圖譜以黨參苷i，為參照物，注重各個特征峰的順序和與藥材及中間產品的相關性，能全面評價產品的整體質量面貌特征，方法科學可靠。

48、本發明新建的特征圖譜方法，供試品制備方法簡單容易操作，指認特征峰相對較多?？蓪γ埯煶袋h參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材進行準確、可靠的特征圖譜檢測。對蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的真實性和質量的一致性以及穩定性均可有效地加以檢測和控制。為有效控制和較全面評價蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的質量提供依據。確保蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材質量的均一、穩定。

49、本發明提供了一種蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜構建方法，包括：a)將黨參藥材加水煎煮，過濾，殘渣加水超聲處理，得到黨參(黨參)藥材待測液；將蜜麩炒黨參(黨參)原料和溶劑混合超聲處理，得到蜜麩炒黨參(黨參)待測液；所述蜜麩炒黨參(黨參)原料包括蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒；b)將黨參(黨參)藥材待測液采用高效液相色譜法測定，得到黨參(黨參)藥材的uplc特征圖譜；將蜜麩炒黨參(黨參)待測液采用高效液相色譜法測定，得到蜜麩炒黨參(黨參)原料的uplc特征圖譜；所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為c18柱；流動相a為乙腈，流動相b為0.2％甲酸，梯度洗脫；所述梯度洗脫具體為：0～15min，a相：0～2％、b相：100～98％；15～30min，a相：2％～15％、b相：98％～85％；30～40min，a相：15％～20％、b相：85％～80％40～50min，a相：20％～30％、b相：80％～70％。本發明采用高效液相色譜法，選用乙腈-0.2％甲酸為流動相進行梯度洗脫，以黨參苷i為參照物，建立了蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒和黨參(黨參)藥材uplc特征圖譜，重復性、精密度好，方法穩定，可靠，可以對蜜麩炒黨參(黨參)飲片、標準湯劑、配方顆粒的質量進行控制和鑒別。