一種馬尾藻再生植株的誘導方法
【專利摘要】本發明公開了一種馬尾藻再生植株的誘導方法，包括制備無菌外植體和將外植體接種于誘導培養基上誘導愈傷組織形成，誘導溫度為15-20℃、光強為4000-5000Lx，光周期為8h；馬尾藻假根于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min可以獲得無菌成活的外植體；1LPES培養基中添加ZT0.1-1mg、IAA1-2mg、抗壞血酸1-3g、蔗糖30g、瓊脂7g，高溫高壓滅菌10-20min后有利于馬尾藻形成芽。
【專利說明】一種馬尾藻再生植株的誘導方法【技術領域】
[0001]本發明涉及植物組織培養【技術領域】，具體涉及一種馬尾藻組織培養的方法。
【背景技術】
[0002]馬尾藻是一種大型經濟褐藻，藻體長度最大可達7 m以上，馬尾藻形成的自然藻場蘊藏著豐富的生物資源，是魚類、蝦蟹類良好的繁育場所，是海洋生產力最高的生態系統之一。馬尾藻富含糖類、脂類、蛋白質、維生素、礦物質和多種人體必需的微量元素，其開發利用前景非常廣闊。馬尾藻是一種多年生海藻，由于生長速度快、生物量大以及在淺海生態環境中重要的生態服務功能，可作為“藍色碳匯”、藻場重建、生態系統環境修復、人工魚礁和海洋牧場重要的構建物種之一，具有巨大的經濟效益、生態效益和社會效益。馬尾藻的種質資源比較匱乏，目前主要通過有性繁殖途徑進行人工育種，繁殖時間比較長，且需要大量的種藻作為采孢子的來源，目前馬尾藻的商業養殖尚不普及，主要以自然資源作為種質來源，不能為人工育種提供穩定、充足的種藻來源。
[0003]植物組織培養技術不但可以在短時間內繁殖出大量的愈傷組織或者叢生芽，且再生的植株與原始植株沒有遺傳差異性；而愈傷組織可以繼代增殖形成新的愈傷組織，愈傷組織也可以誘導形成芽或根從而形成新的植株，此種繁殖方法的繁殖系數很高，可以達到事半功倍的效果，是最有效的植物培養方法。而馬尾藻的組織培養技術目前還不成熟，還沒有成功的方法可以穩定的形成大量的愈傷組織或者叢生芽。

【發明內容】

[0004]針對現有技術存在的缺陷，本發明所要解決的技術問題是提供一種馬尾藻再生植株的誘導方法，通過在假根上誘導馬尾藻形成芽的途徑達到無性育種的目的。
[0005]為了解決上述技術問題，本發明的技術方案如下:
一種馬尾藻再生植株的誘導方法，包括如下步驟:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段，將切段接種于添加激素的固體PES培養基中，于光照強度為4000-5000LX、光照時間為8h、溫度為15-20°C的條件下培養20-30d至芽形成。
[0006]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.1-lmg、IAAl-2mg、抗壞血酸l_3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0007]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.lmg, IAAlmg,抗壞血酸lg、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0008]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0009]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg,抗壞血酸2g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。[0010]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0011]進一步的，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0012]本發明的有益效果是:
首次成功的以馬尾藻假根作為外植體誘導芽形成，且芽的誘導率可以達到42%，芽可以進一步發育形成馬尾藻植株，為馬尾藻藻場提供豐富的種質資源。
【具體實施方式】
[0013]以下通過實施例進一步闡述本發明的有益效果:
實施例1:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養基中，IL PES培養基中添加ZT 0.1mg> IAAlmg、抗壞血酸lg、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續培養28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有20塊外植體上有芽形成,芽的誘導率為20%。
[0014]實施例2:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養基中，IL PES培養基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g ;于光照強度為4000-5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續培養28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有40塊外植體上有芽形成,芽的誘導率為42%。
[0015]實施例3:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養基中，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗壞血酸2g、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續培養28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有30塊外植體上有芽形成，芽的誘導率為30%。
[0016]實施例4:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養基中，IL PES培養基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g ;于光照強度為4000-5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續培養28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有38塊外植體上有芽形成，芽的誘導率為38%。
[0017]實施例5:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養基中，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續培養28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有42塊外植體上有芽形成,芽的誘導率為42%。 [0018]上述實例只是為說明本發明的技術構思以及技術特點，并不能以此限制本發明的保護范圍。凡根據本發明的實質所做的等效變換或修飾，都應該涵蓋在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，包括如下步驟:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段，將切段接種于添加激素的固體PES培養基中，于光照強度為4000-5000LX、光照時間為8h、溫度為15_20°C的條件下培養20_30d至芽形成。
2.根據權利要求1所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.1-lmg, IAAl_2mg、抗壞血酸l_3g、蔗糖30g、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
3.根據權利要求1或權利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.11^、^^11!^、抗壞血酸18、蔗糖3(^、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
4.根據權利要求1或權利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 11^、^^21!^、抗壞血酸38、蔗糖3(^、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
5.根據權利要求1或權利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗壞血酸2g、蔗糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
6.根據權利要求1或權利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 11^、^^11!^、抗壞血酸38、蔗糖3(^、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
7.根據權利要求1或權利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導方法，其特征在于，所述的培養基的配置方法為，IL PES培養基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
【文檔編號】A01H4/00GK103621402SQ201310525496
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年10月31日 優先權日:2013年10月31日
【發明者】張亞峰 申請人:張亞峰