本發明屬于香蕉組織培養技術領域,尤其涉及一種具有led增強光源的香蕉誘導方法的篩選方法。
背景技術:
香蕉(學名:musananalour.)芭蕉科芭蕉屬植物,又指其果實。熱帶地區廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養,終年可收獲,在溫帶地區也很受重視。植株為大型草本,從根狀莖發出,由葉鞘下部形成高3~6公尺(10~20尺)的假桿;葉長圓形至橢圓形,有的長達3~3.5公尺(10~11.5尺),寬65公分(26寸),10~20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂[1],由假桿頂端抽出,花多數,淡黃色;果序彎垂,結果10~20串,約50~150個。植株結果后枯死,由根狀莖長出的吸根繼續繁殖,每一根株可活多年。原產亞洲東南部:中國臺灣、海南、廣東、廣西等地區均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果,也是部分地區的主要糧食,擁有極大市場需求量,對香蕉進行快速繁殖的研究具有一定的必要性,不僅能解決龐大的市場需求量,也能在一定程度上保存優良的香蕉品種,組織培養是香蕉快速繁殖的方法之一,然而現有的香蕉培養基中極少有通過增強光源調節香蕉生長的技術。
綠色植物是一部以光為動力的機器,許多生理生化過程受光的調節控制,形態構建受光作用的誘導。不同光質對植物的光形態建成、生理生化過程的調節已有報道。在日光燈光照條件下,輔助不同光質的光照,對香蕉組培誘導生長進行調整,提高香蕉組織培養的生產效率。
鈰是周期系第ιιι族副族鑭系元素,一種稀土元素。原子序數58。穩定同位素:136、138、140、142。灰色金屬,有展性。密度:正方晶體6.9,立方晶體6.7。熔點799℃,沸點3426℃。鈰是一種銀灰色的活潑金屬,粉末在空氣中易自燃,易溶于酸。鈰的名稱來源于小行星谷神星的英文名。鈰在地殼中的含量約0.0046%,是稀土元素中豐度最高的。
技術實現要素:
基于現有技術存在上述問題,本發明提供一種具有led增強光源的香蕉誘導方法的篩選方法,通過使用單一變量法調整測試增強光源的波長對香蕉組織培養苗的生理影響,確定最適增強光源波長,并根據不同波長光源對香蕉組培苗的影響,確定不同波長光源出組合,并通過保持增強光源不變方向確定基礎培養基,同時引入組培苗的生長量作為篩選標準,更加適合商業工廠化生產。
一種具有led增強光源的香蕉誘導方法的篩選方法,其包括以下步驟:
步驟s10確定初步篩選范圍,檢索查閱相關文獻資料,對比其他植物物種組培誘導過程中添加增強光源種類并確定光源波長的初步篩選范圍;
步驟s20選擇外植體,選擇健康、生長環境一致并且生長狀態相似的香蕉花藥作為外植體,對外植體進行同一的消毒滅菌處理;
步驟s30對照培養,以n6培養基作為基礎培養基,添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.5mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為2.5mg/l、活性炭的濃度為0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為3g/l,維生素的濃度為0.3mg/l,瓊脂粉的濃度為10g/l、白砂糖的濃度為7g/l,配制成測試用培養基,分別接種相同量的香蕉花藥,并進行常規誘導組織培養作為對照組,在常規培養的基礎上條件不同波段增強增強光源作為實驗組,對照組和實驗組都設置多個平行組;
步驟s40記錄檢測參數,培養30天后統計每個實驗組和對照組的萌發的數量和褐化的數量,并計算萌發率和褐化率;
步驟s50生長量計算,分別將相同實驗組或者對照組的愈傷組織取出,用清水沖洗干凈,擦干表面水分并對愈傷組織進行稱重,記錄重量;
步驟s60計算評估因數,將重量數值縮小10倍,再加上萌發率減去褐化率計算出評估因數,對比不同濃度梯度的評估因數,挑選出數值最大的評估因數對應的增強光源波長;
步驟s70縮小篩選范圍,使用步驟s60中挑選出的增強光源波長范圍重復進行步驟s10-s60縮小篩選范圍或者確定最適波長范圍;
步驟s80方向篩選基礎培養基,使用步驟s70確定的最適波長范圍搭配不同基礎培養基,重復步驟s40和步驟s50,并使用步驟s60的計算方法計算評估因數,確定最適基礎培養基;
步驟s90不同波長組合篩選,通過單一因數確定不同波長對香蕉花藥誘導的生理參數影響,調整最適合波長組合。
優選地,所述的步驟s30中每個實驗組或者對照組設置5-15個平行組。
優選地,所述的步驟s70中重復的次數是2-3次。
優選地,所述的步驟s80中不同的基礎培養基包括ms培養基、n6培養基、b5培養基、nitsh培養基、white培養基和miller培養基。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步的描述。
一種具有led增強光源的香蕉誘導方法的篩選方法,其包括以下步驟:
步驟s10確定初步篩選范圍,檢索查閱相關文獻資料,對比其他植物物種組培誘導過程中添加增強光源種類并確定光源波長的初步篩選范圍;
步驟s20選擇外植體,選擇健康、生長環境一致并且生長狀態相似的香蕉花藥作為外植體,對外植體進行同一的消毒滅菌處理;
步驟s30對照培養,以n6培養基作為基礎培養基,添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.5mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為2.5mg/l、活性炭的濃度為0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為3g/l,維生素的濃度為0.3mg/l,瓊脂粉的濃度為10g/l、白砂糖的濃度為7g/l,配制成測試用培養基,分別接種相同量的香蕉花藥,并進行常規誘導組織培養作為對照組,在常規培養的基礎上條件不同波段增強增強光源作為實驗組,對照組和實驗組都設置多個平行組;
步驟s40記錄檢測參數,培養30天后統計每個實驗組和對照組的萌發的數量和褐化的數量,并計算萌發率和褐化率;
步驟s50生長量計算,分別將相同實驗組或者對照組的愈傷組織取出,用清水沖洗干凈,擦干表面水分并對愈傷組織進行稱重,記錄重量;
步驟s60計算評估因數,將重量數值縮小10倍,再加上萌發率減去褐化率計算出評估因數,對比不同濃度梯度的評估因數,挑選出數值最大的評估因數對應的增強光源波長;
步驟s70縮小篩選范圍,使用步驟s60中挑選出的增強光源波長范圍重復進行步驟s10-s60縮小篩選范圍或者確定最適波長范圍;
步驟s80方向篩選基礎培養基,使用步驟s70確定的最適波長范圍搭配不同基礎培養基,重復步驟s40和步驟s50,并使用步驟s60的計算方法計算評估因數,確定最適基礎培養基;
步驟s90不同波長組合篩選,通過單一因數確定不同波長對香蕉花藥誘導的生理參數影響,調整最適合波長組合。
作為優選實施例,所述的步驟s30中每個實驗組或者對照組設置10個平行組。
作為優選實施例,所述的步驟s70中重復的次數是3次。
作為優選實施例,所述的步驟s80中不同的基礎培養基包括ms培養基、n6培養基、b5培養基、nitsh培養基、white培養基和miller培養基。
經過篩選確定如下增強光源具有比更高的誘導率和生長質量:在接種后一周內添加紅色增強光源,紅色光源是波段為650nm-670nm的紅光led燈,一周之后增加藍色增強光源,藍色光源是波段為450nm-470nm的藍光led燈。