本發明屬于培養基制備
技術領域：
，具體涉及一種牛大力誘導組織培養基。
背景技術：
：牛大力，別名豬腳笠、金鐘根、山蓮藕、倒吊金鐘、大力薯，為豆科豆科崖豆藤屬植物，其主要成分為蛋白質、淀粉質及生物堿等。牛大力以根入藥，全年可采挖，為傳統的藥食同源植物。牛大力性平、味甘，有補腎潤肺、強筋活絡的功效，常用于治療腰肌勞損、風濕性關節炎、肺結核、慢性支氣管炎、慢性肝炎等病癥。牛大力除了入藥煎劑外，亦常為廣東民間入湯做食療、藥膳之用。牛大力有效成分有高麗槐素、芒柄花素、查爾酮類化合物、異黃酮類、糠醛、牛大力多糖等，這些成分具有抗炎殺菌、免疫調節作用，并由一定抗氧化和清除自由基作用。牛大力經采挖后，經清洗、晾曬可直接入藥，也可用于食用，更可經深加工，制成牛大力保健酒、牛大力花茶等深加工產品。牛大力是制藥企業加工中成藥、保健品的常用原料，近年來，隨著我國中醫藥事業蓬勃發展，人們生活水平逐漸提高，保健意識不斷增強，牛大力的市場需求也在不斷擴大。目前，牛大力的繁殖方法主要有種子繁育、扦插繁育、組織培養繁育等幾種模式。種子繁育及扦插培養對牛大力種苗本身要求較高，且培育周期較長，不利于牛大力種植推廣；因此，選擇優良的牛大力種苗，采用組織培養的模式進行繁育，是一種高效繁育培養牛大力的方法，能大大縮短牛大力的培育時間，且提高牛大力幼苗的成活率，繁育所得植株健康，有利于提高牛大力的結薯能力及產量。在植物組織培養過程中，根據植物生長發育過程所需求的養分不同，可分為三種培養基，分別為誘導組織培養基、生根培養基、壯苗培養基。其中，誘導組織培養基起到誘導植物細胞形成愈傷組織的作用，直接決定了植物的分化效率。而針對不同的植物，誘導組織培養基的成分也應有所區別。以上
背景技術：
內容的公開僅用于輔助理解本發明的發明構思及技術方案，其并不必然屬于本專利申請的現有技術，在沒有明確的證據表明上述內容在本專利申請的申請日已經公開的情況下，上述
背景技術：
不應當用于評價本申請的新穎性和創造性。技術實現要素：本發明要解決的技術問題是提供一種牛大力誘導組織培養基，以實現牛大力外植體的高效誘導。為了解決以上技術問題，本發明采用以下技術方案：一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂50～180g、蔗糖16～48g、激素0.5～4g、無機鹽溶液1～10g、維生素0.2～1g、活性炭5～15g、抗壞血酸0.05～0.4g、青霉素0.1～1.2g、水解乳蛋白5～12g、有機物40～100g、三蒸水35～90g。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂60～160g、蔗糖18～42g、激素1～3.5g、無機鹽溶液2～7g、維生素0.3～0.8g、活性炭6～12g、抗壞血酸0.08～0.35g、青霉素0.2～1g、水解乳蛋白6～10g、有機物50～90g、三蒸水40～80g。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂70～140g、蔗糖20～36g、激素1.2～3g、無機鹽溶液3～6g、維生素0.5～0.7g、活性炭8～10g、抗壞血酸0.1～0.3g、青霉素0.3～0.9g、水解乳蛋白7～9g、有機物55～75g、三蒸水45～70g。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基，所述有機物包括牛奶、蘋果泥、香蕉泥中的一種。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基，所述激素包括6-ba、naa、iba、ggr6中的一種。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基，所述的無機鹽溶液中的無機鹽包括氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣中的一種或幾種。優選地，所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：激素先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的激素溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、有機物，充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為5～6.6；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌一段時間后，即制成誘導組織培養基。更優選地，所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法中，所使用的試劑級別均為分析純。更優選地，所述的牛大力生根培養基的制備方法，步驟s5中所述培養瓶為罐頭瓶。更優選地，所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，步驟s6中滅菌溫度為120～135℃，滅菌時間為5～15min。本發明具有以下有益效果：(1)本發明所述誘導組織培養基，其成分來源廣泛，制備方法易于操作，且儲存期長；(2)本發明所述的誘導組織培養基，誘導牛大力組織效率高，污染率低。具體實施方式下面結合具體實施方式對本發明作進一步詳細說明。應該強調的是，下述說明僅僅是示例性的，而不是為了限制本發明的范圍及其應用。實施例1：一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂50g、蔗糖16g、6-ba0.5g、含有氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂的溶液1g、維生素0.2g、活性炭5g、抗壞血酸0.05g、青霉素0.1g、水解乳蛋白5g、牛奶40g、三蒸水35g。所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：6-ba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的6-ba溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、牛奶，所加入的試劑均為分析純，然后充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為5.5；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中，在120℃下滅菌15min，即制成誘導組織培養基。實施例2一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂180g、蔗糖48g、naa4g、含有氯化銨、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液10g、維生素1g、活性炭15g、抗壞血酸0.4g、青霉素1.2g、水解乳蛋白12g、蘋果泥100g、三蒸水90g。所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：naa先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的naa溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、蘋果泥，所述試劑均為分析純，然后充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為5.8；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中，在135℃下滅菌5min，即制成誘導組織培養基。實施例3一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂60g、蔗糖18g、iba1g、含有氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鈣的無機鹽溶液2g、維生素0.3g、活性炭6g、抗壞血酸0.08g、青霉素0.2g、水解乳蛋白6g、香蕉泥50g、三蒸水40g。所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：iba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的iba溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、香蕉泥，所述試劑均為分析純級別，然后充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為6；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在130℃下滅菌10min，即制成誘導組織培養基。實施例4一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂160g、蔗糖42g、ggr63.5g、含有氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液7g、維生素0.8g、活性炭12g、抗壞血酸0.35g、青霉素1g、水解乳蛋白10g、牛奶90g、三蒸水80g。所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：ggr6先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的ggr6溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、牛奶，所述試劑均為分析純，充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為6.2；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在120℃下滅菌12min，即制成誘導組織培養基。實施例5一種牛大力誘導組織培養基，包括以下原料：瓊脂100g、蔗糖30g、6-ba1.5g、含有氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液5g、維生素0.6g、活性炭9g、抗壞血酸0.2g、青霉素0.5g、水解乳蛋白8g、蘋果泥65g、三蒸水55g。所述的牛大力誘導組織培養基的制備方法，包括以下步驟：s1：6-ba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的6-ba溶液、無機鹽溶液、維生素、活性炭、抗壞血酸、青霉素、水解乳蛋白、蘋果泥，所述試劑均為分析純級別，然后充分攪拌；s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節至體系ph值為5.8；s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養瓶中；s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在125℃下滅菌8min后，即制成誘導組織培養基。為了更詳細說明本發明的有益效果，以下還提供了具體的試驗結果。選取牛大力新鮮種子切片180份作為組織培養的外植體，隨機分為a、b、c、d、e、f六組，每組30份。其中a～e組經升汞消毒后分別接入采用本發明實施例1～5所述配方及方法制備成的誘導組織培養基中，f組經同樣方式消毒后接入市售普通誘導組織培養基中，培養7天后，比較各組的誘導分化率并檢測培養基的污染程度，如下表所述。組別誘導率/％污染率/％a68012b74514c72214d67915e69417f50733由此可見，本發明所述的牛大力誘導組織培養基與市售普通培養基相比，能夠提升牛大力外植體的誘導率，同時污染率較低。以上內容不能認定本發明的具體實施只局限于這些說明，對于本發明所屬
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬于本發明由所提交的權利要求書確定的專利保護范圍。當前第1頁12