專利名稱：一種微生物油脂的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物轉(zhuǎn)化法制備油脂，具體地說是一種利用微生物轉(zhuǎn)化N-乙酰葡 糖胺和減葡糖胺制備油脂的方法。
背景技術(shù)：
長鏈脂肪酸甘油酯(油脂)是重要的食用品和化工原料。作為化工原料，油 脂可用于生產(chǎn)可生物降解的潤滑油、溶劑油、油漆和油墨溶劑、表面活性劑、粘 接劑等產(chǎn)品。近年來，油脂還廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)可再生能源產(chǎn)品生物柴油。因此， 油脂資源的需求量顯著增加。通常油脂來源于油料植物的種子禾棵實以及動物脂 肪組織，其中油料植物是提取油脂的主要原料。種植油料植物和油料作物需要占 用耕地，生產(chǎn)受到季節(jié)和自然條件的制約，不利于油脂原料穩(wěn)定和連續(xù)供應(yīng)。
許多微生物，如酵母、霉菌和藻類等在一定條件下，可以碳水化合物、碳氫 化合物等為碳源，在體內(nèi)合成并IG存大量脂肪酸甘油酯，這種油脂稱為微生物油 脂。微生物發(fā)酵底物范圍較廣，包括可直接利用的葡萄糖、果糖、蔗糖、糖蜜、 乳清以及淀粉和纖維素水解產(chǎn)物等(Ratledge C, Wynn J. The Biochemistiy and Molecular Biology of Lipid Accumulation in Oleaginous Microorganisms. Adv Appl Microbiol, 2002,51:1-51)。據(jù)報道，部分微生物能在菌體內(nèi)積累含量超過細胞干 重60%以上的油脂。部分微生物油脂和一般植物油具有相似的脂肪酸組成，仍以 (:16和<:18系脂肪酸為主。微生物油脂發(fā)酵不但可提供新的油脂生產(chǎn)方法，而且可合 理利用廢棄生物質(zhì)，降低油脂生產(chǎn)成本，保護環(huán)境。因此，微生物油脂是潛在的 動植物油脂替代資源，具有廣闊的應(yīng)用空間。
殼多糖(Chitin)又名甲殼質(zhì)，幾丁質(zhì)，廣泛存在于蝦、蟹等甲殼類動物外 骨骼中，是自然界中含量僅次于纖維素的一種多糖，也是地球上數(shù)量最大的含氮 有機化合物(Austin P民Brine C J, Castl J E, et al. Chitin: flew facets of research. Science, 1981,212: 749-753)。殼多糖是一類由結(jié)構(gòu)單顏-乙酰葡糖胺(2-乙醐安基 _2_脫氧^_!>葡萄糖)以"-l,4-糖苷鍵連接而形成的高聚物。殼多糖經(jīng)過酸7K解或酶水解可以得到N-乙酰葡糖胺和葡糖胺，這兩種單糖資源豐富，對工業(yè)微生物發(fā)酵 生產(chǎn)具有重要價值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種成本低、工藝簡便、方法易行的利用生物轉(zhuǎn)化法 制備微生物油脂的方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
一種微生物油脂的制備方法，其以N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺為主要原料進 行微生物發(fā)酵培養(yǎng)，獲得微生物油脂。
是將N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺作為培養(yǎng)基碳源，其中可添加少量其它微生
物生長必需營養(yǎng)成份，滅菌后接入產(chǎn)油微生物種子液，于20。C 37。C通氣培養(yǎng)， 發(fā)酵終止后分離收集菌體，提取獲得微生物油脂。利用本發(fā)明菌體含油率15% 66% (w/w)。
具體為(1)將N-乙酰葡糖胺和減葡糖胺制成總濃度為20g/L 200g/L的水 溶液，添加0 3 g/L常規(guī)微生物生長所需營養(yǎng)成份，如酵母粉、蛋白胨、麥牙汁、 磷酸鉀、硫酸鎂、硫酸鋅、硫酸亞鐵、硫酸錳、氯化,丐等，調(diào)節(jié)pH5.5 7.5，所 得培養(yǎng)基滅菌后備用；
(2) 產(chǎn)油微生物在液體種子培養(yǎng)基(葡萄糖20g/L，酵母粉10g/L，蛋白胨IO g/L，余量為水，pH5.5 6.0)中，于30。C， 180 200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)20小時 36小時，得每毫升含105 108個活細胞的種子液；
(3) 向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量 2% 20% (v/v)，在20 °C 37 °C下通氣培養(yǎng)36小時 240小時，發(fā)酵液中總還 原糖濃度可降至1%以下；
(4) 終止發(fā)酵，固液分離收集菌體，經(jīng)有機溶劑提取得到微生物油脂。
本發(fā)明可參照文獻(李植峰，張玲，沈曉京，等四種真菌油脂提取方法的比 較研究.微生物學(xué)通報，2001,28(6):72 75)使用酸熱法提取微生物油脂。按每克 菌體加入2 4mol/L鹽酸5 10mL，于78 。C水浴處理1小時，冷卻后加入甲醇 和氯仿萃取，收集氯仿層，7jC洗，以無7jC硫酸鈉干燥，過濾，濾液紹鄉(xiāng)除去低
4沸點有機溶劑，并在105 "C干燥得到微生物油脂。以油脂質(zhì)量除以提取時使用的
干菌體質(zhì)量得到菌體油脂含量(w/w)。按文獻方法(張峻,邢來君,王紅梅.Y—亞
麻酸高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵產(chǎn)物的分離提取.微生物學(xué)通報，1993, 20 (3):
140 143)進行氣相色譜分析，構(gòu)成本發(fā)明所得到微生物油脂的脂肪酸包括碳鏈
長度含有12 22個碳原子的脂肪酸。原料對菌體得率在15% 45% (w/w)，菌
體含油率為15% 66% (w/w)。
所述N-乙酰葡糖胺和減葡糖胺7jC溶液可以是含殼多糖原料的水解液；所述 含殼多糖原料的水溶液為蟹殼、蝦殼和/或魚鱗的酸水解液或者酶水解液。
本發(fā)明使用的產(chǎn)油微生物包括圓紅冬孢酵母朋^/a^w誠wmton/"'tfey、彎曲 隱球酵母Q^ tococa^ wrra加、解脂亞羅酵母Farravi^ /z>o/,'ca、乳糖紅酵母
橘林油脂酵母Z^ow_ycas 發(fā)酵性絲孢酵母7h'c/zos;7oro" yfe層e"tora、健強地霉Gfeo/r/c/z謂ro6慮騰禾口深黃被孢霉MoWere〃a ira6函'/7a。
本發(fā)明的有益效果是(1)與傳統(tǒng)通過油料植物獲取油脂的方法相比，本發(fā)明 技術(shù)簡單有效，周期短，可連續(xù)操作，節(jié)約耕地，不受場地、季節(jié)、氣候變化的 影響；(2)與生物轉(zhuǎn)化其它淀粉質(zhì)和纖維質(zhì)糖源制備油脂的方法相比，本發(fā)明使用 的原料來源于殼多糖，資源豐富，成本低；(3)本發(fā)明可用于大量獲取油脂，有利 于資源綜合利用和環(huán)境保護，可獲得顯著的綜合效益。
具體實施例方式
下面是本發(fā)明的具體實施例，其中使用到的產(chǎn)油微生物圓紅冬孢酵母 i^ot/as/ on'^Mm torw/c^es AS 2.1389、解脂亞羅酵母！^rraw/" /z>o/,'mAS 2.1398、 小紅酵母i /Kx/otorw/a附/ra^a AS 2.277、乳糖紅酵母i /20abton^ /actoraAS 2.1514、 皮狀絲孢酵母7h'c/KW/ oraM AS 2.571和深黃被孢霉MoWe //<3
AS 3.3410購自中國普通微生物菌種保藏管理中心；橘林油脂酵母丄^o^ycm CICC 1714、發(fā)酵性絲孢酵母7h'c/zo^ora"/em^wtom CICC 1368和健 強地霉Geofr7'c/2Mm ra6M似w CICC 1256購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心； 彎曲隱球酵母C，tococc^ cwrra加ATCC 20509購自美國普通微生物菌種保藏管 理中心。通過實施例可進一步了解不同微生物轉(zhuǎn)化N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺生 產(chǎn)油脂的能力，但不以任何形式限制產(chǎn)油微生物的具體種屬。實施例l:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉0.1，調(diào)節(jié)pH5.5。 12rC滅菌15min后，以10。/。(v/v)接種量接入圓 紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于30。C通氣培養(yǎng)96小時，停止發(fā)酵，將發(fā)酵液 于6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，收集菌體，得到干菌體93g/L。
按每克干菌體加入3mol/L鹽酸8mL，于78 。C水浴處理1小時，冷卻，加 入甲醇和氯仿萃取，收集氯仿層，7jC洗，以無7jC硫酸鈉^B喿，過濾，濾液經(jīng)濃縮 除去低沸點有機溶劑，并在105。C干燥得至微生物油脂產(chǎn)品2.6g/L，菌體油脂含 量28% (w/w)。
實施例2:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺20， KH2PO40.7， MgS04.7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH6.0。 121 。C滅菌15min后，以5% (v/v)接種量接入圓 紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)36小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體5.5g/L，菌體油脂含量23%。
實施例3:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺100， KH2PO41.0， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH7.0。 121 。C滅菌15min后，以15% (v/v)接禾中量接入圓 紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)120小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體25g/L，菌體油脂含量30%。
實施例4:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺200， KH2P04 1.7， MgS04.7H20 0.4，酵母粉0.5，調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以20% (v/v)接種量接入圓 紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于30。C通氣培養(yǎng)168小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體45g/L，菌體油脂含量32%。
實施例5:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2P041.2， MgS04'7H20 0.4，酵母粉0.5，調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以20%(v/v)接種量接入圓 紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于37 °C通氣培養(yǎng)96小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體9.1g/L，菌體油脂含量21%。
實施例6:培養(yǎng)基組成(g/L):葡糖胺70， KH2P041.2， MgS04.7H20 0.4， 酵母粉0.5，調(diào)節(jié)pH7.0。 121 。C滅菌15min后，以20% (v/v)接種量接入圓紅冬 孢酵母AS 2.1389種子液，于37 °C通氣培養(yǎng)108小時，按實施例1的方法后處理， 得到干菌體10.3 g/L，菌體油脂含量18%。實施例7:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO41.0， MgS04.7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH5.5。 121 。C滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入解 脂亞羅酵母AS 2.1398種子液，于30 。C通氣培養(yǎng)108小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體10.2g/L，菌體油脂含量35%。
實施例8:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2P041.5， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入彎 曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)120小時，按實施例1的方 法后處理，得到干菌體13.5 g/L，菌體油脂含量52%。
實施例9:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉1.0， CaCl2 0.04， FeS04'7H20 0.005 ， ZnS04.7H20 0.001 ， MnS04 0.0007， 調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以10%&/力接禾中量接入彎曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30。C通氣培養(yǎng)168小時，按實施例1的方法后處理，得到干菌 體24.5g/L，菌體油脂含量65%。
實施例10:培養(yǎng)基組成(g/L):葡糖胺100， KH2PO40.7， MgSO(7H2O0.2， 酵母粉0.5，調(diào)節(jié)pH7.5。 121 r滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入彎曲隱 球酵母ATCC 20509種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)120小時，按實施例1的方法后 處理，得到干菌體17.5 g/L，菌體油脂含量25%。
實施例ll:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04.7H20 0.2，調(diào)節(jié)pH 6.5。 121 。C滅菌15 min后，以10% (v/v)接禾中量接入小紅酵母AS 2.277 種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)72小時，按實施例1的方法后處理，得到干菌體8.0 g/L， 菌體油脂含量20%。
實施例12:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04.7H20 0.2，酵母粉O.l,調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以10% (v/v)接種量接入乳 糖紅酵母AS 2.1514種子液，于30 。C通氣培養(yǎng)96小時，按實施例1的方法后處 理，得到干菌體15.0g/L，菌體油脂含量32%。
實施例13:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH7.5。 121 。C滅菌15min后，以10。/。(v/v)接種量接入皮 狀絲孢酵母AS 2.571種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)120小時，按實施例1的方法后處理，得到干菌體14.8 g/L，菌體油脂含量40%。
實施例14:培養(yǎng)基組成(gl):葡糖胺70， KH2PO40.7， MgSO4.7H2O0.2， 酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH7.5。 121 。C滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入皮狀絲 孢酵母AS 2.571種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)120小時，按實施例1的方法后處理， 得到干菌體B.5 g/L，菌體油脂含量33%。
實施例15:培養(yǎng)基組成(g/L): N畫乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH6.5。 121 。C滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入橘 林油脂酵母CICC 1714種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)168小時，按實施例1的方法 后處理，得到干菌體12.3 g/L，菌體油脂含量28%。
實施例16:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH7.5。 121 。C滅菌15min后，以10%(v/v)接種量接入發(fā) 酵性絲孢酵母CICC 1368種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)144小時，按實施例1的方 法后處理，得到干菌體17.6g/L，菌體油脂含量45%。
實施例17:培養(yǎng)基組成(g/L): N畫乙酰葡禾唐胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH6.5。 12rC滅菌15min后，以10%(v/v)接禾中量接入健 強地霉CICC 1256種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)132小時，按實施例1的方法后處 理，得到干菌體15.8g/L，菌體油脂含量33%。
實施例18:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺70， KH2PO40.7， MgS04'7H20 0.2，酵母粉O.l，調(diào)節(jié)pH6.0。 12rC滅菌15min后，以10% (v/v)接禾中量接入深 黃被孢霉AS 3.3410種子液，于20 °C通氣培養(yǎng)240小時，按實施例1的方法后處 理，得到干菌體18.0g/L，菌體油脂含量37%。
實施例19:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺20，葡糖胺50， KH2PO40.7， MgSO4.7H2O0.2，酵母粉1.0，蛋白胨0.1，調(diào)節(jié)pH7.0。 121。C滅菌15min后， 以10% (v/v)接種量接入彎曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30 。C通氣培養(yǎng)120 小時，按實施例l的方法后處理，得到干菌體14.5 g/L，菌體油脂含量37%。
實施例20:培養(yǎng)基組成(g/L): N-乙酰葡糖胺45，葡糖胺25， KH2PO40.7， MgSO4.7H2O0.2，酵母粉1.0，蛋白胨O.l，調(diào)節(jié)pH7.0。 121 。C滅菌15min后， 以10% (v/v)接種量接入彎曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30 。C通氣培養(yǎng)120
8小時，按實施例l的方法后處理，得到干菌體20.5g/L，菌體油脂含量43%。
實施例21:以殼多糖(購自Sigma，貨號C9213)為原料，參照文獻方法 (Pichyangkura Kudan S， Kuttiyawong K， Sukwattanasinitt M, Aiba S, Quantitative production of 2隱acetamido-2-deoxy-d隱glucose from crystalline chitin by bacterial chitinase, Carbohydrate Research, 2002， 337， 557-559)進行酶水解處理，調(diào)整N-乙 酰葡糖胺濃度為20g/L，添加酵母粉1.0g/L， pH6.5，于121 。C滅菌15 min后， 以10% (v/v)接種量接入彎曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30 °C通氣培養(yǎng)36 小時，按實施例l的方法后處理，得到干菌體6.5g/L，菌體油脂含量50%。
實施例22:以蟹殼為原料，參照文獻方法(Muzzarelli，R.A.A.Chitin in nature and technology, Pleum Press, New Yorb 1986)進行酸7jC解處理，得到7夂解液，調(diào) 整總還原糖濃度為50g/L，其中N-乙酰葡糖胺35g/L，葡糖胺10g/L，添加酵母 粉0.6g/L， KH2P04 0.3 g/L， MgSOWKOO.l g/L， pH6.5，于121 。C滅菌15 min 后，以10%(v/v)接種量接入彎曲隱球酵母ATCC 20509種子液，于30。C通氣培 養(yǎng)48小時，按實施例1的方法后處理，得到干菌體8,2g/L,菌體油脂含量45%。
實施例23:以蝦殼為原料，參照文獻方法(李南，李繼絎.D-氨基葡萄糖鹽酸 鹽的制備研究.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1997, 28(1), 56-58)進行酸7夂解處理，得到水 解液，調(diào)整總還原糖濃度為55 g/L，其中N-乙酰葡糖胺5g/L，葡糖胺48g/L，添 加酵母粉1.0g/L，KH2PO40.7g/L，MgSO4'7H2O0.2g/L，pH6.2， 121 。C滅菌15min 后，以10% (v/v)接種量接入圓紅冬孢酵母AS 2.1389種子液，于30。C通氣培養(yǎng) 60小時，按實施例l的方法后處理，得到干菌體93^L，菌體油脂含量38%。
每100 gN-乙酰葡糖胺和減葡糖胺可獲得含油率為15 66%的產(chǎn)油酵母干菌 體12.0 g 45.0 g。與傳統(tǒng)通過油料植物獲取油脂的方法相比，本發(fā)明技術(shù)簡單有 效，周期短，可連續(xù)操作，節(jié)約耕地；與生物轉(zhuǎn)化其它淀粉質(zhì)和纖維質(zhì)糖源制備 油脂的方法相比，本發(fā)明使用的原料來源于含殼多糖的生物原料，如蟹殼、蝦殼 或魚鱗等，具有資源豐富、價格低廉的特點，并且發(fā)酵獲取油脂工藝簡便、方法 易行，成本低，是一種利用可再生資源、幾乎不額外占用耕地、可連續(xù)生產(chǎn)的微 生物油脂制備新途徑，同時也為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)廢棄物高值化禾傭開辟了新的方向。
9
權(quán)利要求
1. 一種微生物油脂的制備方法，其特征在于其以N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺為原料進行微生物發(fā)酵培養(yǎng)，獲得微生物油脂。
2. 按照權(quán)利要求1所述微生物油脂的制備方法，其特征在于是將N-乙酰葡糖胺和減葡糖胺制成總濃度為20 200 g/L的7jC溶液，滅菌處理，接入產(chǎn)油微 生物種子液，通空氣培養(yǎng)后分離菌體，提取獲得微生物油脂。
3. 按照權(quán)利要求2所述微生物油脂的制備方法，其特征在于具體過程如下，(1) 所述N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺水溶液pH5.5 7.5，其中還可含有0 3.0 g/L常規(guī)微生物生長所需營養(yǎng)成份；(2) 所述產(chǎn)油微生物的培養(yǎng)條件為:接種量v/v為2 20%,MH20eC 37°C， 培養(yǎng)時間為36小時 240小時；(3) 所述產(chǎn)油微生物培養(yǎng)終止后經(jīng)固液分離收集菌體，菌體破碎，按常規(guī)方法 提取，得到微生物油脂。
4. 按照權(quán)禾腰求3所述微生物油脂的制備方法，其特征在于所述常規(guī)微生 物生長所需營養(yǎng)成份為酵母粉、蛋白胨、麥牙汁、磷酸鉀、硫酸鎂、硫酸鋅、硫 酸錳、氯化f丐和/或硫酸亞鐵。
5. 按照權(quán)禾腰求2所述微生物油脂的制備方法，其特征還在于所述N-乙 酰葡糖胺和/或葡糖胺水溶液可以是含殼多糖原料的7jC解液。
6. 按照權(quán)利要求5所述微生物油脂的制備方法，其特征還在于所述含殼多 糖原料的水溶液為蟹殼、蝦殼和/或魚鱗的酸水解液或者酶7拙牟液。
7. 按照權(quán)利要求1或2所述微生物油脂的制備方法，其特征還在于所用產(chǎn)油微生物為圓紅冬孢酵母朋ot/o^onVZ/ww tora/oWes、彎曲隱球酵母 Co^tococcMS cwrraft^、角牟月旨亞羅酵母rarraWa/^0/yft'ca、乳糖紅酵母7 /zc^otorw/a /actora、小紅酵母朋ocfotorw/a附/wwto、橘林油月旨酵母丄zjw附y(tǒng)cas fo"o"ewfe ae、皮 狀絲孢酵母7h'c/z，o訓(xùn)c齒"eww、發(fā)酵性絲 包酵母7Hc/zospo謂，膨"tora、健 強地霉Geo/n'c/zw附ra6us似附禾口/或深黃l皮f包霉Aforfere〃a is"&〃/wa。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種微生物油脂的制備方法，首先將N-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺制成總濃度為20～200g/L的水溶液，添加0～3g/L其它營養(yǎng)成份，滅菌后接入產(chǎn)油微生物種子液，接種量v/v為2％～20％，于20～37℃通氣培養(yǎng)36～240小時，停止發(fā)酵，離心收集菌體，破碎菌體，經(jīng)有機溶劑提取獲得微生物油脂。每100gN-乙酰葡糖胺和/或葡糖胺可獲得含油率為15～66％的產(chǎn)油酵母干菌體12.0g～45.0g。本方法使用的原料具有來源豐富、價格低廉的特點，并且發(fā)酵獲取油脂工藝簡便、方法易行，是一種利用可再生資源、幾乎不額外占用耕地、可連續(xù)生產(chǎn)的微生物油脂制備新途徑。
文檔編號C12P7/64GK101497902SQ200810010348
公開日2009年8月5日 申請日期2008年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月3日
發(fā)明者吳思國, 趙宗保 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所