檢測存在于草藥產品和植物藥中的馬兜鈴材料的方法

文檔序號：564989閱讀：569來源：國知局

專利名稱：檢測存在于草藥產品和植物藥中的馬兜鈴材料的方法
技術領域：
本發明涉及一種鑒別草藥產品和植物藥的方法。尤其涉及到一個以分子學方法鑒別馬兜鈴屬的植物材料與來自其他科的植物。這種方法是基于
葉綠體DNA的trnL - trnF片段和psbA - trnH片段的序列。
背景技術：
來自馬兜鈴屬的中草藥材料已知含有可誘發腎病和癌癥的馬兜鈴酸及相關化合物。在傳統中醫藥(TCM)中，來自馬兜鈴種的材料有時被用來作為諸如木香、木通、防己、白英、馬兜鈴和朱砂蓮之類的其他草藥產品和植物性藥物的替代品或偽品。有關資料如下
1)中藥木香可以是來自木香(Aucklandia lappa)和其他物種的菊科 (Compositae )以及青木香(Aristolochia debilis )及相關馬兜鈴種的才艮部。
2 )中藥木通可以是來自木通(Akebia quinata)、三葉木通(Aucklandia trifoliata)、三p十木通(Aucklandia trifoliata var. australis)、川木通(Clematis armandii)、鐵線蓮(Clematis montana)、關木通(Aristolochia manshuriensis ) 及相關馬兜鈴種的根部。
3 )中草藥防己可以是來自粉防己(Stephania tetrandra)和廣防己 (Aristolochia fangchi)及相關馬兜鈴種的才艮部。
4)中藥白英應來自白英(Solanum lyratum )，但它有時與來自綿毛馬兜鈴(Aristolochia mollissima)和相關馬兜鈴種的另一藥草尋骨風相混淆。
5)中藥馬兜鈴可以來自馬兜鈴(Aristolochia contorta )及青木香(Aristolochia debilis )的果實，或來自百合科大百合(Cardiocrinum)及相關類群的果實或種子。
6 )中草藥朱砂蓮可以來自馬兜鈴植物Aristolochia kaempferi及馬兜鈴的相關物種的根部，并可能與薯蕷科的薯蕷(Dioscorea cirrhosa)和相關的物種產生混淆。
自90年代初以來，在世界上許多地方有數以百計因進食了來自或含有馬兜鈴的草藥和植物藥而致的食物中毒個案。在馬兜鈴植物中的有毒物質為馬兜鈴酸及相關化合物。在許多國家和地區，植物材料源自馬兜鈴屬的中草藥產品和植物藥也被禁止使用，例如香港和臺灣。但是在中國大
陸，有些馬兜鈴種仍被允許使用作為草藥產品和植物藥。在那些允許使用馬兜鈴材料的地方，應提醒說這類材料的真正來源身份須被確定，這可以使部分醫生和病人用藥時特別謹慎。所有禁止使用馬兜鈴材料的國家，也有機會出現無心之裝運或混合來自馬兜鈴種材料的情況。因此，能測定某一特定草藥產品和含有植物性原料來自馬兜鈴屬植物是重要的。準確和
徹底的方法來揭露其存在的草藥產品和植物性藥物是需要的，以幫助保護消費者，以加強其優良制造規范(GMP),并產生證據進行法律訴訟。
現有確定中藥材的方法往往是基于感官的做法，是十分依賴督察或配藥員的主觀判斷。形態特征鑒定的價值通常有限，因為真正的中草藥物種及其偽品通常是非常相似。結構及化學鑒定(如薄層色譜法，高效液相色謙，氣相色譜-MS)的研究會受不同因素影響，如生長階段和收獲后的加工等。

發明內容
本發明的目的在于提供一種能夠判斷中草藥材料是否來源于馬兜鈴屬植物或者草藥產品和植物藥中是否含有源自馬兜鈴植物的原料的方法。
本發明的上述目的和其他目的通過以下方式實現利用葉綠體DNA 的trnL - trnF片段和psbA - trnH片段的序列信息來將馬兜鈴材料與傳統中草藥中常用的其他中草藥材料進行區分。根據本發明的實施方式，所述方法包括以下步驟(a)獲得一套標準DNA序列；(b )從一個或多個中藥樣品中提取總DNA; ( c )采用聚合酶鏈式反應(PCR)技術或其他技術擴增trnL - tmF片段和/或psbA - tmH 片段；(d)確定已擴增的DNA片段的核苷酸序列；(e)將所述樣品的核苷酸序列的trnL - tmF片段和psbA - trnH片段(或部分片段)與標準DNA 序列進行對照，以及(f)可選地根據所述樣品的核苷S吏序列的trnL-trnF 片段和psbA - trnH片段和所述的標準序列生成樹狀圖。在一種典型的實施例中，經DNA提取，PCR擴增和DNA序列分析步驟，就可以將得到的所述樣品的trnL - tmF和/或psbA - trnH序列與馬兜鈴草本植物的標準 DNA序列進行比較和匹配，如果相匹配，則所述樣品屬于馬兜鈴。
本文所用的術語"標準DNA序列"，是指這樣的DNA序列，該序列是已鑒定的植物物種的草藥原料的葉綠體DNA的trnL - tmF片段或 psbA - trnH片段，或者是包含了已鑒定的植物物種的草藥原料的葉綠體 DNA的trnL - tmF片段或psbA - trnH片段，或者是已鑒定的植物物種的草藥原料的葉綠體DNA的trnL - tmF片段或psbA - trnH片段的一部分。
適合于擴增trnL - trnF和/或psbA - trnH片段的方法和技術是眾所周知的，并且是本領域普通技術人員所知曉的；這正如采用諸如BioEdit和 MEGA之類的用于電腦程序進行DNA序列對照和生成樹狀圖的方法和技術一樣。
總之，采用本發明的方法，任何來自馬兜鈴屬的中藥材都可以從來自其他植物物種的中藥材中被^r測和區分開，以下將通過實施例予以具體說明。

圖la顯示木香和相關馬兜鈴種的trnL-tmF序列對照。圖lb顯示根據trnL - trnF序列對照構建的木香和相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖2a顯示木香和相關馬兜鈴種的psbA-trnH序列對照。
7圖2b顯示根據psbA - trnH序列對照構建的木香和相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖3a顯示木通及相關馬兜鈴物種的trnL-trnF序列對照。圖3b顯示根據tmL - trnF序列對照構建的木通及相關馬兜鈴物種的樹狀圖。
圖4a顯示木通及相關馬兜鈴物種的psbA-trnH序列對照。圖4b顯示根據psbA - trnH序列對照構建的木通及相關馬兜鈴物種的樹狀圖。
圖5a顯示防己及相關馬兜鈴種的trnL-trnF序列對照。圖5b顯示根據tmL - tmF序列對照構建的防己及相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖6a顯示防己及相關馬兜鈴種的psbA - tmH序列對照。圖6b顯示根據psbA - tmH序列對照構建的防己及相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖7a顯示白英及相關馬兜鈴種的trnL - trnF序列對照。圖7b顯示根據trnL - trnF序列對照構建的白英及相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖8a顯示白英及相關馬兜鈴種的psb A - trnH序列對照。
圖8b顯示根據psbA - tmH序列對照構建白英及相關馬兜鈴種的樹狀圖。
圖9a顯示馬兜鈴和相關物種的trnL-trnF序列對照。
圖9b顯示根據trnL - trnF序列對照構建的馬兜鈴和相關物種的樹狀圖。
圖10a顯示馬兜鈴和相關物種的psb A - trnH序列對照。圖10b顯示根據psbA - trnH序列對照構建的馬兜鈴和相關物種的樹狀圖。
圖lla顯示朱砂蓮及相關物種的tniL-tmF序列對照。
圖lib顯示根據trnL - tmF序列對照構建的朱砂蓮及相關物種的樹狀圖。
圖12a顯示朱砂蓮及相關物種的psbA-trnH序列對照。圖12b顯示根據psbA - tmH序列對照構建的朱砂蓮及相關物種的樹狀圖。
圖13顯示馬兜鈴摻雜品或替代品和真正的馬兜鈴物種的trnL - trnF 序列。
圖14顯示馬兜鈴摻雜品或替代品和真正的馬兜鈴物種的psbA - trnH 序列。
具體實施例方式
為了便于理解本發明，以下將結合本發明的具體實施方式
作為示例進行詳細說明。盡管本領域技術人員明白，為了清楚起見，對于本發明的理解不是特別重要的某些特征可以不顯示，但是對于本發明的示例性實施方式進行了詳細說明。另一方面，有關特定實施方式的具體細節僅僅是為了舉例說明，在不偏離本發明的精神和范圍的情況下，本領域技術人員可以據此進行各種變化和修改。
實施例1 :木香
根據中華人民共和國藥典(2005年版)中，中藥"木香"源自木香 (Aucklandia lappa)和菊科的某些物種。而且有時摻雜了青木香 (Aristolochiadebilis)的根部，后者含有致癌的馬兜鈴酸。利用trnL - trnF
序列(如圖la和lb所示)及psbA-trnH序列(如圖2a及2b所示)，
可以用來區分真正的木香與被摻雜的木香。
通過對照馬兜鈴的tniL - trnF序列與那些真正的木香物種的trnL-trnF序列(如圖la和lb所示)，很清楚地有許多分歧；更為突出的分歧廿口下所示
(1 )在馬兜鈴品種中為'TTAAAA',但在真正木香種中為 "TTAATAAAA"(即圖la中的堿基93-101 )，被稱為分子標記1 ;通過對照馬兜鈴的trnL-trnF序列和那些真正的木通物種的tmL-trnF 序列(如圖3a及3b),分歧是顯而易見的，更為突出的分歧如下所示
(1) 在馬兜鈴品種中為'AGAGTGGGA',但在真正木通種中為 'AGAAAGGA'(即圖3a中的堿基299-307 ),被稱為分子標記5 ;
(2 )在馬兜鈴品種中為'GACTATCA',但在真正木通種中為'AGTCA' (即圖3a中的堿基498-505 ),被稱為分子標記6 。
同樣，通過對照該馬兜鈴的psbA - trnH序列與那些真正木通種的 psbA隱trnH序列(如圖4a和4b),可以看到，在眾多的分歧點中比4交突出的如下所示
(1 )在馬兜鈴品種中缺失，但在真正木通種中存在'GAAAC '(即圖 4a中的堿基421-425 ),被稱為分子標記7;
(2) 在馬兜鈴品種中缺失，但在真正木通種中存在'TTTGAG'(即圖4a中的堿基608-613 ),被稱為分子標記8 。
實施例3 :防己
根據中華人民共和國藥典(2005年版)，防己來自粉防己(Stephania tetrandra)，而且有時摻雜了廣防己(Aristolochia fhagchi)及相關馬兜鈴種，其中含有致癌的馬兜鈴酸。防己也會與來自Cocculus trilobus及相關 Cocculus物種的木防己混淆。trnL - trnF序列(如圖5a和5b所示)及psbA -tmH序列(如圖6a和6b所示)可以用來區分馬兜鈴物種與其他用作防己的植物物種。
通過對照馬兜鈴的trnL - trnF序列和那些真正的防己種的trnL - trnF 序列(如圖5a和5b所示)，4艮清楚，有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'GTGGGA '，但在真正的防己種中為 'AAAGGA '(即圖5a中的堿基298-303 )，被稱為分子標記9;(2)在馬兜鈴品種中為'GTACTGAAATA '，但在真正木香種中為 'ATAATA'(即圖la中的堿基367-377 )，被稱為分子標記2 。
同樣地，對照馬兜鈴的psbA-tmH序列與那些真正木香物種的psbA -trnH序列(如圖2a及2b所示)，顯示有不少分歧點；更為突出的分歧如下所示
(1 )在馬兜鈴品種中為'GAAGGA'，但在真正木香種中為 'GAACTAAAAAAGGA'(即圖2a中的堿基106-119 ),被稱為分子標記3 ; (2 )在馬兜鈴品種中為'CAGG'，但在真正木香種中為
AAAATAAAATATAGTAATAGTAGATAATACTAGATAATAGG '(即圖 2a中的堿基335-468 ),被稱為分子標記4 。
實施例2 :木通
根據中華人民共和國藥典(2005年版)，木通來自植物品種木通 (Akebia quinata )、三p十木通(Akebia trifoliata )、三p十木通(Akebia trifoliate var. australis)，也可包括川木通(Clematis armandii)和鐵線蓮(Clematis montana)。木通有時摻雜了被稱為關木通(Aristolochia manshuriensis )的根部，其中含有致癌物質馬兜鈴酸。trnL-trnF序列(如圖3a及3b所示) 及psbA-trnH序列(如圖4a和4b所示)可以用來區分真正的木通和摻雜種的木通。雖然木通(Akebia quinata )的trnL - trnF片l殳的序列(GenBank 登錄AY651844; AF335297)，三葉木通(Akebia trifoliata)的trnL -加F 片段的序歹'J ( GenBank登錄AF335294 )及關木通(Aristolochia manshuriensis)的trnL - trnF片段的序列(GenBank登錄AY689184 )已經分別由三個獨立的研究小組(即Quandt等人于2004年；Wang等人于 2002年；Neinhuis等人于2005年)發表用于系統發育研究，但這些序列從來沒有被考慮過任何用作鑒定的目的。
ii(2) 在馬兜鈴品種中為'ATCGACTATCA '，但在真正防己種中為 'ATCAGTCA'(即圖5a中的堿基479-489 ),被稱為分子標記10;
(3) 在馬兜鈴品種中為'TTTTTCACTTACT',但在真正防己種中為 TTTCTCGTTCACT '(即圖5a中的堿基764-776 )，被稱為分子標記11;
(4) 在馬兜鈴物種中為'TCCATATATGG ',但在真正防己種中為 'TCT'(即圖5a中的堿基868-878 )，被稱為分子標記12;
(5) 在馬兜鈴品種中為'ATT'，但在真正防己種中為'ATTCCAAGG' (即圖5a中的堿基981-988 )，被稱為分子標記13;
(6) 在馬兜鈴品種中為'TAGTAGGA ',但在真正防己種中為 'TATGGGGA'(即圖5a中的堿基1096-1103 )，被稱為分子標記14 。
同樣，通過對照馬兜鈴的psbA - trnH序列與那些真正的防己種的 psbA-tmH序列(如圖6a和6b所示)，明顯存在許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'CGT'，但在真正防己種中為'CGTTGAA'(即圖6a中的堿基102-108)，稱為分子標記15;
(2 )在馬兜鈴品種中缺失，但在真正防己種中存在 'GTTTCCCGACATC '(即圖6a中的堿基385-397 ),稱為分子標記16 。
實施例4:白英
根據中華人民共和國藥典(1977年版)，白英來自茄科植物白英 (Solanum lyratum)。而且有時摻雜了尋骨風(Aristolochia mollissima)，后者含有致癌物質馬兜鈴酸。trnL-trnF序列(如圖7a及7b所示)和psbA -trnH序列(如圖8a及8b所示)可以用來區分真正的白英與摻雜的品種。
對照馬兜鈴的trnL - trnF序列和那些真正的白英物種的trnL - trnF序列(如圖7a及7b所示)，顯示有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述 (1 )在馬兜鈴品種中為'TAAAAA '，但在真正白英種中為，TAACAAAAA '(即圖7 a中的堿基94-102 ),被稱為分子標記17;(2)在馬兜鈴品種中為'GAAATA ',但在真正白英種中為 'GAATACTATA '(即圖7 a中的堿基370-379 ),被稱為分子標記18;
(3 )在馬兜鈴品種中為'ACTGTG ',但在真正白英種中為 'ACAAGCCTTTATG '(即圖7a中的堿基827-839 )，被稱為分子標記19;
(4)在馬兜鈴品種中為'TTTATTTAGGTAAGTTA',但在真正白英種中為'TTTGAGAAAATTTTTTA '(即圖7a中的堿基991-1007 )，被稱為分子標記20;
(5 )在馬兜鈴品種為'GAGAAT ',但在真正白英種中為 'GAGATTGGAAT '(即圖7中的堿基1108-1119a)，被稱為分子標記210。
同樣，通過對照馬兜鈴的psbA - tmH序列與那些真正白英的psbA -trnH序列(如圖8a及8b)，顯然有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'GAAGGA ',但在真正的白英種中為 'GAAAAGAAAGG'(即圖8a中的堿基106-117),稱為分子標記22;
(2)在馬兜鈴品種中缺失，但在真正白英種中存在 TGTTCCTCTTGTTGCTAAT GTTACTATATCTTTTTTATTTCATTTC
(即圖8a中的堿基327-419),稱為分子標記23;
(3 )在馬兜鈴品種中缺失，但在真正白英種中存在
CTTTA '(即圖8a中的堿基434-483 )，稱為分子標記24 。
實施例5 :馬兜鈴
根據中華人民共和國藥典(2005年版)，馬兜鈴來自植物物種馬兜鈴Aristolochia contorta和Aristolochia debilis ,其中含有致癌物質馬免鈴酸，因此必須使用得更審慎。它的替代品包括大百合(Cardiocrinum giganteum)和相關的百合科植物。tmL - tmF序歹'J (如圖9a及9b )和psbA-trnH序列(如圖10 a和10b )可以用來區分真正的馬兜鈴物種和馬兜鈴的替代物種。
通過對照馬兜鈴的trnL - trnF序列與那些大百合物種的trnL - trnF序列(如圖9a及9b),顯然有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1) 在馬兜鈴品種中為'TTTCACAAA ',但在大百合物種中為 'TTTAGTCTC '(即圖9 a的堿基807-815 ),稱為分子標記25;
(2 )在馬兜鈴種中為'TACGTACAAATGCCCATCCATATATGG '，但在大百合物種中缺失(即圖9a中的堿基865-891 )，稱為分子標記26 。
同樣，通過對照馬兜鈴的psbA - tmH序列與那些大百合種的psbA -trnH序列(如圖10a和10b)，明顯地存在許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'CG ',但在大百合種中為'CATTCT '(即圖 10a中的堿基82-87),被稱為分子標記27;
(2) 在馬兜鈴品種為'TACCCAA ',但在大百合物種中為
圖10a中的堿基120-164 )被稱為分子標記28;
(3 )在馬兜鈴品種中為'AAGG '，但在大百合物種中為 'AAGCTAAAATCTTTT AGCTAGA '(即圖10a中的堿基412-433 )被稱為分子標記29 。
實施例6 :朱石少蓮
據"關木通腎毒性研究"，朱砂蓮來自Aristolochiakaempferi和相關的物種。它的替代品包括來自被成為薯莨(Dioscorea cirrhosa)的根部以及 Dioscoreaceae科的相關物種。trnL - trnF序列(如圖1 la和11 b )和psbA -trnH序列(如圖12a及12b)可以用來區分真正的朱砂蓮和朱砂蓮的替代物種。
14通過對照馬兜鈴的trnL - trnF序列和薯萊物種的trriL - trnF序列(如圖lla和llb)，顯然有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'ATCCTGTT ',但在薯莨中為 'ATCTTTATTTGTT TTGTT '(即圖lla中的堿基118-135 )，被稱為分子標記30;
(2)在馬兜鈴品種中為'TCAGAAGCAGA '，但在薯萊中為 TCAACCGAAGTTGA'(即圖1 la中的堿基471-484 )，被稱為分子標記 31;
(3 )在馬兜鈴品種中為'ATCGACTATCACACCAGA '，但在薯策中為'ATCATTGATTCTAGA '(即圖lla中的堿基512-529 )，被稱為分子標記32;
(4)在馬兜鈴品種中為'TGCATCGAGAATGGTCGG'，但在薯萊中為'TGCGAGAAAAGAAAATGGTTGGG '(即圖lla中的堿基1074-1098) , ^皮稱為分子標記33 。
同樣，通過對照馬兜鈴的psbA - trnH序列與那些薯莨的psbA - trnH 序列(如圖12a及12b),顯然有許多分歧，較為突出的分歧如下列所述
(1 )在馬兜鈴品種中為'ACCTGGC '，但在薯莨中為'ACTTAGC '(即圖12a中的堿基38-44)，稱為分子標記34;
(2 )在馬兜鈴品種中為'ATACCCAAT ',但在薯萊中為 'ATATCAATA'(即圖12 a中的堿基115-123 ),稱為分子標記35 。
當把上述6個中草藥例子中的所有序列排在一起，可以發現，在一般情況，當與木香、木通、防己、白英、大百合和朱砂蓮的其他植物種比較時，馬兜鈴的trnL - trnF片段具有表征馬兜鈴屬的特定的序列片段(如圖 13)。特征片段的一些例子如下
(1 )馬兜鈴種的'AGTGGGATG'(即圖11中的堿基313-321 )，稱為分子標記36;
(2)馬兜鈴種的'AATTTCAGAAG'(即圖11中的堿基472-482), 稱為分子標記37;(3)馬兜鈴種的'ACTATCACACC'(即圖11中的堿基525-535 )，稱為分子標記38 。
同樣，當與木香、木通、防己、白英、大百合和朱砂蓮的其他植物種比較時，馬兜鈴的psbA - trnH片段具有表征馬兜鈴屬的特定的序列片段 (圖14)。其中一個例子是
(1 )馬兜鈴種的'CTCAATTCACTA '(即圖12中的堿基172-183 ), 稱為分子標記39 。
在上述情況中，每個分子標記(即分子標記1-39 )包含許多序列，每一個序列用于在相應的附圖中所定義和對照的特定物種。每一個分子標記的各序列具有相同或不同的長度，還在相應的圖有詳細說明。
前述實施例所舉例的本發明的方法在很多情況下可用于確定在植物藥或草藥產品中是否存在馬兜鈴，該方法通過以下步驟從所關注的樣品
中提取總DNA，然后利用聚合酶鏈式反應(PCR)擴增trnL - trnF片段和/或psbA - tmH片段，然后進行DNA序列測定。通過將所獲得的trnL -trnF序列和/或psbA - tmH序列與馬兜鈴材料的tmL - trnF和psbA -trnH序列進行比較和匹配，便知道相匹配的樣品屬于馬兜鈴。如前述的例子示范，在trnL-trnF片段及psbA-trnH的片段內有許多表征馬兜鈴屬植物的序列片段。在特定情況下，可不必擴增整個trnL-trnF片段和/或整個psbA - trnH片段，而只需要擴增和測序trnL - trnF片段和/或psbA - trnH 片段中的部分片段就足以在特定情況下達到某一特定目的。
對于trnL - trnF片段的PCR和DNA序列測定而言，正向引物是Tab C ( 5 '畫CGAAATCGGTAGACGCTACG -3 '),反向引物是Tab F ( 5'-ATTTGAACTGGTGACACGAG -3 ')。對于psbA - tmH片革殳的PCR和 DNA序列測定而言，正向引物是(5 ' - GGTATGCATGAACGTAATGCTC -3'),反向引物是(5 ' - CGCGCATGGTGGATTCACAAATC-3 ')。盡管本發明僅描述和指出了用于優選實施方式的基本的新特征，但是，可以理解，本領域普通技術人員在不偏離本發明的精神的前提下，可以對所舉例說明的工藝和方法的形式和細節進行各種省略、替換或者變化。對于以實質上相同的方式執行實質上相同的功能從而取得實質上相同
本發明不僅限于僅用作示例的上述實施方式，在所附的權利要求書所限定的保護范圍之內可以通過各種方式對上述實施方式進行變化。
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〈210〉 1 〈210 : 1031 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉青木香(Jn'Wo/oc/z/a flfe&fo)的/r"L-fr"F片段〈400〉 1
<formula>formula see original document page 20</formula>GTCAATACTGACMCMTGAAATITCTAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnTAGAAATCG TCAGGGTrCMGTCCCTCTATCCCCAATAAAATAAAAATCCCCAATAAAATAAAAGGCCT ArnTACTCCCTMGCATTTATCCTCrmTmTCATCAGTGGTTCAAAATrAGATTAG ATATGrmTCACnACTCTACTCnTCACAMTGGATCCAACCTGAAATCTTTCTCTCT TCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCAAAGA ATCTCTATrACGGAACCCTrCGCAGnCATATCATTACTCTTACACITCCATITACAAAG TCTCCCTnTGAAGATCCAAGAAATTACCGACnTAnTAGGTMGITMTGCnnTGA GTACrnTCATTGACATAGACCCMGCCmTCTTTTAGTAGGATCATGCATGGAGMTG GTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAMATCaCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210> :3 〈211〉 986 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉廣防己G4n'Wo/oc/ z'a/a"gcW)的/r"L-fr"F片段〈400〉 3
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTTGATTGGATTGAGCCTrGGTATGGAAACCTACTAAG
TGGTAACTrCCAAAnCAGAGAGACCCTGGAATTAAAAATGGGCMTCCTGAGCCAAATC
CTGTnTCAGAAAMAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAACGGAAGCTGTTCTAACGAATG
GGGTrGACnTACTACAlTGGTAGAAGMTCCITCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGAC
CCTAGATATGTACGTATACGTACTGMATATCAAAGATTAATCACGACCCGMTCCATAT ,rnTm.nTCTAAAMrrrCAGMGCAGMGGMGMTCGMTAGTCAGTGATCAMTC
GACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnTnMGGATTGATTAATCGAGTGAGACGAGA AT嵐GATAGAGTCCCATrCTACATGTCAATACTGACAACMTGAAATTTATAGTMGAG GAAAATCCGTCGACnTAGAAATCGTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCMTAAAATAA AAATCCCCAATAAAATAAAAGGCCTArnTACTCCCTAAGCATTTATCCTa'lTiTlT丄T TCATCTGTGGrrCAAMTTAGATrAGATATGrnTTCAOTACTCTACTCnTCACAAAA GGATCCMCCTGAAATCnTCTCTCTTCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATG CCCATCCATATATGGATGGGCAMGAATCTCTATTACGGAACCCTTCGCAGTrCATATCA TrACTaTACACTTCCATTrAC嵐GTCTCCCTnTGMGATACAAGAAATTAACGACTT TATITAGGTAAGTrAATGCTnTTGAGTACrnTCATrGACATAGACCCAAGCCrnTCT TITAGTAGGATCATGCATCGAGMTGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTG AAAATCCTCGTGTCACCAGTTC嵐T
〈210〉 4 〈211〉 957 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:馬兜鈴C4n'加/oc/n'"麵; /e"')的亂-加F片段〈400〉 4
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACnGATTGGATTGAGCCTTGGTATGGAMCCTACTAAG TGGTAAdTCCAAATrCAGAGAAACCCTGGAATTGAAAATGGGCMTCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAAAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCMCGGMGCTGTTCTMCGAAT GGGGTTGACnTACTACATTGGTAGAAGAATCaTCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGA CCCTACGTATGTACGTATACGTACTGAAATATCAAAGATTAATCACGACCCGAATCCATA Tl'iTi'ri'i'i'CTAAAAATITCAGAAGCAGAAGGAAGAATCGMTAGTCAGTGATC嵐TCG ACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnTTTMGGATTGATTAATCGAGTGAGACGAGAA TAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATACTGACAACMTG嵐TTTATAGTAAGAGG AAAATCCGTCGACTTTAGAAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAATAAAAGGCC TATnTACTCCCTMGCAnTATCCTCn'i'n'iTnT丄'ATCCGTGGTTCAAAAlTAGATA TGTTnTCACTTACTCTACTCnTCACAAATGGATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCITCT CACTGTGATAGATATGATATACGTACAMTGCCCATCCATATATGGATGGGCAAAGAATC TCCATTACGGAACCnTCACAGTrCATATCATTACTCnACAOTACATTTACAAAGCCT CCTTnTGAAGATCCAACAAATTACCGACnTAnTAGGTAAGTrAATGOTnTAAGTC
21CCnTCATrGACATAGACCCAAGCTmTCmTAGTAGGATCATGCATCGAGAATGGTC GGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCTGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAMT
〈210〉 5 〈211〉 984 〈212〉 DNA 〈213〉植物、
〈223〉關木通(/4W加/oC附a"sAw/"/era/j)的,a""L-,a"mF片段〈400〉 5
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGATTGAGCaTGGTATGGMACCTACTMG TGGTAAaTCCAAATTCAGAGAMCCCTGGMTTAMAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGrnTCAGAMAAAAAMGGATAGGTGCAGAGACTCAACGGAAGCTGTTCTAACGTCT AACGAGMGCTGTTCTMCGAATGGGGTTGACnTACTACATrGGTAGMGMTCaTCT ATCGAAACTCCAGAGTGGGATGACCCTAGATATGTACGTATACGTACTGAAATATCAMG ATrAATCATGACCCGAATCCATA'i'iT丄Ti'i'lTCTATGATAAAAAnTCAGAAGCAGMGG AAGAATCGAATAGTCAGTGATC嵐TCGACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCnnTA AGGATTGATTMTCGAGTGAGACGAGAAAAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATAC TGACAACAATGAAAnTATAGTMGAGGAAAATCOGTCGACnTAG嵐TCGTGAGGGTT CAAGTCCCTCTATCCCCMTAAAAGGCCTATnTACTCCCTMGCATrTATCCTCnnT TTnTATCAGTGGTTCMAATrAGATATGTmTCACnACTCTACTCTITCACAAATGG ATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCTTATCACTGTGATAGATATGATATACGTACAAATGCC CATCCATATATGGATGGGCAAAGMTCCTCATTACGGAACCnTCACAGTTCATATCATT ACTCTTACACTTACAnTACAAAGTCTCCnnTGAAGATCCAACAAATTACCGACnTA nTAGGTAAGTTMTGCTnTTGAGTCCCnTCATrGACATAGACCCAAGaTnTCnT TAGTAGGATCATGCATCGAGMTGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAA MTCCTCGTGTCACCAGTTC嵐T
〈210〉 6 〈211〉 956 〈212〉 DNA 〈213> :植物
〈223〉:尋骨風(Jn'Wo/oc/n'a wo/fos/附a)的fr"L-fr"F片段〈400〉 6
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAClTGATTGGATrcAGCaTGGTATGGAAACCTACTAAG TGGTAACTrCCAAATTCAGAGAMCCCTGGAATTAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAMTC CTGTnTCAGAMAAAAAAAGGAT八GGTGCAGAGGCTCAACGGAAGCTGTTCTAACGAAT GGGGTTGACnTACTACATTGGTAGAAGAATCCnCTATCGAAACTCCAGAGTGGGATGA CCCTAGATATCTACGTATACGTACTGAAATATCAAAGATTAATCACGACCCGMTCCATA Ti'丄TlTlTi'CTAAAAATTTCAGAAGCAGAAGGAAGAATCGAATAGTCAGTGATC嵐TCG ACTATCACACCAGAGTCTGATAGATCTmTAAGGATTGATTAATCGAGTCAGACGAGAA TAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCAATACTGACAACMTGAAAnTATAGTAAGAGG AAAATCCGTCGACnTAGAAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCMTAAAAGGCC TATnTACTCCCTAAGCAnTATCCTCn'n'n'n'n'ATCAGTGGTTCAAAATTAGATAT GrmrCACnACTCTACTCnTCACAAATGGATCCGGCCAGAAATCnTCTCTCTTCTC ACTGTGATAGATATGATATACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCAMGAATCT CCATrACGGMCCnTCACAGTTCATATCATTACTCTTACACTrACATITACAAAGTCTC CTTnTGMGATCCAACAAATTACCGACnTATITAGGTAAGTr嵐GaTnTAAGTCC CnTCATTGACATAGACCCAAGCrnTTCmTAGTAGGATCATGCATCGAGAATGGTCG GGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 7 〈211〉 964 〈212〉 DNA〈213〉植物
〈223> :木香(Jz/cWa"Jz'a/appa)的^"L- r"F片段〈400> :7
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTrAATrGGATTCAGCCITGGTATGGAAACTTACTAAG TGATAACnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMlTAATAAAAATGGGCMTCCTGAGCCM ATCACGTnTCCGAAAAC雄CAAAGGlTCAG嵐GCGAAAATAAMAAGGATAGGTGCA GAGACTCGATGGAAGCTGlTCTAACGAATGGAGnGAlTGTaTACGTrGGTAGAGGAAT CCTTCTATCGAAACTTCATAMAGATGAAGGATAAACCTGTATACATAATATAGAAGAAT TGTTGTGAATCGATTCCG嵐GAATCGMTATTCATTGATCAAACAAnCACTCCATAAT CTGATAGATCTnTGAAGAACnATTMTCGGACGAGAATAMGATAGAGTCCCGTrCTA CATGTCMTACCGGCAACAATGAAAnTATAGTAAGAGGAAMTCCGTCGATTTAAAAM TCGTGAGGGTTCAAGTCCaCTATCCCCMTAAAATAAAMTCCCCAATAAAATAAAAGG CCTATnTACTCCCTMGCATITATCaa'丄Ti'iTr丄'丄'l'CATCAGTGGTrCAAAATTAGA TTAGATATGTTnTCACTTACTCTACTCnTCACAAAAGGATCCAACCTGMATCnTCT CTCITCTCACTGTGATAGATATGATCTACGTACAAATGCCCATCCATATATGGATGGGCA MGMTCTCTATTACGGAACCaTCGCAGTrCATATCAnACTCTTACACTTCCATITAC AAAGTCTCCCTnTGMGATACAAGAAATTMCGACTTTAnTAGGTMGTTAATGCnT TTGAGTACnnTATTGACATAGACCCAAGCCrnTCrnTAGTAGGATCATGCATCGAG AATGGTCGGGATAGCTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTC 嵐T
〈210〉 8 〈211〉 963 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉灰毛川木香(K/WmzWa var./m'ra6/fc)的化"L-加F片段
〈400〉 8
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITAATrGGATTGAGCCTTGGTATGGAAACnACTAAG TGATMCTTTCAAAnCAGAGAAACCCTGGAATTMTAAAMTGGGCAATCCTGAGCCM ATCACGrnTCCGAAAACAAACAMGGTTCAGAAAGCGAAMTCAAAAAGGATAGGTGCA GAGACTCGATGGMGCTGTTCTMCGAATGGAGTTGATrGTOTACGTTGGTAGAGGAAT CCTTCTATCG嵐CITCATAAAAGATGAAGGAT嵐CCTGTATACATMTATAGMGMT TGTTGTGAATCGATrCCATATTGAAGAAAGAATCGAATATrCATrGATCAAACMTrCAC TCCATAATCTGATAGATCTnTGMGAAOTATrMTCGGACGAGMTAMGATAGAGTC CCGTTCTACATGTCMTACCGGCMCAATGAAAnTATAGTMGAGGAAMTCCGTCGAT TrAAAAAATrGTGAGGGTrCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAATACCATITGACTCCCTMT TATrraCGTATCCTmTAnTATnTATCC'nTlT丄'CCTrAGCGGTTCAAAATTCCTr ATCmTCnTCTCATrCACTACTCnTATACATCATTCTCTGCTCnTATACAAATGGA TCTGAGCGGAAATGCTGTTCTOTATCACATGTGATATATATGATACATGTAC嵐TGAA CATCnTGAGCAAGGAATCCCCATITGAATGATrCACGATCGATATTnTATrCATACTG AAACTTACAAAGTTGTTCTnTGACAAATTATAGGACCTGGATGAGGCnTGTAATACCC TITCAA1TGACATAGACCCAAGTTATCTAGTAAAATGAAAGTGAGGATGAGACATCAGGA ATAGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCA AAT
〈210〉 9 〈211〉 1010 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉木通(i6—w'M她)的fr"L-fr"F片段〈400〉 9
CGMATCGGTAGACGCTACGGACTTGAATGGATTGAGCCTTGGTATGGAAACCTACTAGG TGATMCnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMTGAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATCCTGTnrCAGAAAAAAAAAGGTTCAGAAAGCGAGATTAAAAAAATAAAGGAAGGATAGGT GCAGAGACTCMTGGAAGCTGnCTMTGMTGGAGTTGGCTGCGTTGCGTrCGTAGAGG AATCCTTCTATTGAAACTCCAGAAAGGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGAnMTGACGATCAAAATArnTmTATATGAAAAACGGMGA ATTATTGTGAATCAATTTCAAGTrGMGGAAAAATCGAATATrCACTGATCAAATCAGTC ATTCCATAGTCTGATAGATCTnTGAAGMCTGACTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAG TCCCATTCTACATGTCAATACCGACAATAATG磁nTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCG ACnTAGAAATCGTGAGGGTTCAAGTCCaCTATCCCCAAGAAAAAGGCCCGTnTACTC aTAACTATACTATGTrATCC'丄Tn.iT丄'GTCAGCGGTTCCAAATTCGCTAAGnTCTCAT TCACTCCACTCTTTCACAAATGGATCGGAGCATAMTGTITCTaaTATCACAAGTCAA GTCITGTGATATATACGTACAAATGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCATrrGMTCAT TTAAnTACAGTCCATATGAnTACTrAAAaTACAAAGTTACAMGTCnUnTTTGM GATGCAAG組TTCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTAATGCrn'lT丄GAATCTCnTAAT TCACAT嵐CTCMGCCCTCTAGTGGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAG CTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉10
〈211〉1010
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉三葉木通
〈400〉10
的^T7L-^"F片段
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGATTGAGCaTGGTATGGAAACCTACTAAG TGATAACnTCAAATTCAGAG嵐CCCTGGAATGAAAMTGGGCMTCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAMAAAGGTrCAGAAAGCGAGATTAAAAAAATAAAGGATGGATAGGT GCAGAGACTCMTGGAAGCTGITCTAACGAATGGAGlTGGCTGCGrrGCGITCGTAGAGG MTCOTCTATTGAAACTCCAGAAAGGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGATTAATGACGATCAAAATATnTTnTATATGAAMACGGMGA AnAlTGTGAATCMTTrCAAGCTGMGGAMAATCGAATATTCACTGATCAAATCAGTC ATTCCATAGTCTGATAGATCTnTGMGAACTGACTMTCGGACGAGMTAAAGATAGAG TCCCATTCTACATGTCAATACCGACMTAATGAAATITATAGTAAGAGGAAAATCCGTCG ACnTAGMATCGTGAGGGTrCMGTCCCTCTATCCCCAAGAAMAGGCCCGTnTACTC CTTAACTATAaATGTTATCCnTn'iTGTCAGCGGlTCCAAArrCGCTAAGnTCTCAT TCACTCCACTCnTCACAAATGGATCGGAGCATAAATGnTCTCTOTATCACMGTCM GTCTTGTGATATATACGTACAAATGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCAnTGAATCAT TTAAnTACAGTCCATATGATTTACTr嵐OTACAAAGTTACAAAGTCTTCnnTGAA GATGCAAGAMITCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTMTGCnTnTGAATCTCTTTAAT TGACATAAACTCAAGCCCTCTAGTAGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAG CTCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 11 〈211〉聽〈212〉 DNA 〈213〉竺物
〈223> :三葉木通(Jfe6Za的/o/z'ato var. awWrafo)的fr"L々"F片段〈400> :11
GG嵐TCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGGAITGAGCCTTGGTATGGAAACCTACTMG TGATMCnTCAAATTCAGAGAAACCCTGGMTGAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGTnTCAGAAAAAAAAAGGTrCAGAAAGCGAGATTAAAAAMTAAAGGAAGGATAGGT GCAGAGAaCAATGGAAGCTGTrCTMCGAATGGAGTTGGCTGCGTTGCGTTCGTAGAGG MTCCTTCTATTG嵐CTCCAG嵐GGATGAAGGATGAACCTATATACGTACGTATACGT ACTGAAATATCAAAAGATTAATGACGATCAAAATAITCTnTATATGAAAAACGGAAGAA TTATrGTGAATCAAnTCAAGTTGAAGGAAAAATCGAATATTCACTGATCAMTCAGTCA TTCCATAGTCTGATAGATCTnTGMGAACTGACTAATCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCATTCTACATGTCMTACCGACAATAATGAAATTTATAGTMGAGGAAAATCCGTCGA CnTGGAMTCGTCAGGGnCAAGTCCCTCTATCCCCAAGAAMAGGCCCGTnTACTCC nAACTATACTATGnATCCrnTnTGTCAGCGGTTCCAAATTCGCTAAGTITCTCArr CACTCCACTCnTCACAAATGGATCGGAGCATAAATGnTCTCTCTTATCACAAGTCAAG TCrTGTGATATATACGTAC嵐TGCACACCTATGAGCAAGGAATCCCCATITGAATCAIT TMnTACAGTCCATATGAnTAOTAAAaTACAAAGmCAAAGTaTCnnTGATG ATGCAAGAMTTCCCGGGCCTGGGTACGACnTGTAATGCnTnTGMTCTCnTAATT GACATAAACTCAAGCCCTCTAGTAGTATAGAGATGATGCATCGGGAAAGGTCGGGATAGC TCAGCTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGnCAAAT
〈210〉12
〈211〉779
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉鐵線蓮
〈400〉12
的/mL-fr"F片段
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGGlTGGATTGCAGCdTGCATATGGCAAACATACT AAGGTGATAACTTTCAAATTCAGAGAAACCCCGGMTAAAMATGGGCMTCCTGAGCCA MTCCTnTTTCAGAAAACAAAAGGGOTCAGAAAGCMGAATAAAMMAAAGGATAGG TGCAG織CTAAATGGAAGCTGTTCTAACGMTAGAGTTGACTGCGlTGATCGAGGArrC ClTCTAnT嵐CTACAGAAAGGATGAACCCGTATACATATAAAAATATMAAGATrAAT GACAATCAAAATArnTnTOTATATGATATGCAAAATGTAAGAArraTGTGATGTGA ATTCATTCAAAGnTAAGTAAGAATCGAATAlTCACTGATCAAATAAGTCACTCTATAAT CTGATAGATCrnTAAAGAACTMTTGGACGAGMTAAAGATAGAGTCCCATTATACATG TCAACATCMTACTGACAAAAATG嵐TITATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnnTA AATCGTGAGGGnCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAAMGnTACTGTACCCCCCMCTAT
rrAGTrAArrMTTcn'n'n'n'no'n'nTCTMGACTrnTAATGcn'rnTAGTCT
ArnMrrGATATACCCAACMGCACTCTAAATAGAGTGGGGATGCCGCATCGAGMGAG TCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 13 〈211〉 776 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉川木通(C/emafe wjo"ta"a)的fr"L-fr"F片段〈400〉 13
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGGTTGGATrGAGCaTGATATGGAAACATACTAAG TGATAAOTTCAAATrCAGAG嵐CCCCGGMTAAAAAATGGGCMTCCTGAGCCMATC CnTnTCAGAAAACAAAAGGGOTCAGAAAGCAAGAATAAAAAAAAAGGATAGGTGCAG AGACTAAATGGAAGCTGTTCTMCGAATAGAGTTGACTACGTrGATCGAGGArrCCTrCT ATITAMCTACAGAMGGATGAACCCGTATACATATAAAAATATAAMGATrAATCACAA TCAAAATATTTTnTCTTATATGATATGCAAAATGTAAGAATTCTrGTCATGTGAATCGA TTCAAAGnTAAGTAAGAATCAAATA7TCACTGATCAAATAAGTCACTCTATAATCTGAT AGATCTnTAAAGMCTAATTGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCATTATACATGTCAAC ATCAATACTGACAAAAATGAAATTTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACrnTTAAATCG TCAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAAAAAAAAGTITACTGTACCCCCCAACTATrTAGT
TAATTMTTa'n'n'rrn'm'cnTn'rcTMGAcnTTTMTGcn'n'n'AGTCTAiT
TAAnGATATACCCAACAAGCACTCTAMTAGAGTGGGGATGCCGCATCGGGAAGAGTCG GGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
〈210〉 14 〈211〉 1034 〈212〉 DNA
25〈213〉植物
〈223〉木防己(Coccm/us or6Zcw/aftw)的^"L-Zr"F片段〈400〉 14
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACTTGATTCGATrcAGCaTGGTATGGAMCCTACTAAG TGAAAACTTTCAAATTCAGAGAAACCCTGGAATTAAAAATGGGCMTCCTGAGCC嵐TC CTGrnTCAGAMACAAAAAAGAGrrCAGAAAGCGAGACTCAAAMTGGATAGGTGCAGA GACTCMTGGAAGCTGTTCTAACAAATGGAGTTGATrGCGlTGCGTrAGTAGAGTAATCC TTCTATTG嵐CTCCAGAAAGGATGAACTTATCTATATACATACGTCTACGTACTG嵐T ATCAAAGATrCATGATGATCCGAATCTGTAnTATGMAMTGGAAGAATTnTGTGAAT CMCTCCMGrTAAAGGMGAGTCGMCATTCACTGATCAMTCAGTCACTCCATAGTCT GATAGATCTnTGMGMCTGACTAATCGGACGAGMTAAAGATAGAGTCCCAlTCTACA TGTCMTACCGACAACAATG嵐nTATAGTAAGAGGAAAATCCGTCGACnTAGAAATC GTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCAATAAAMTAAAAGGCCCACnTACTCCCTAATr AGTTATCCITGTATrcnTCTnTCGGCAGCAATrCAAAAmGCTATGnTCTCGrrCA CTCTACTCnTCACMATGGATCGGMGGGMG丁GTTTCTCTOTATCACMGTATTGTG ATATATACACTATACGTACAAATGAGCATCTATGGGCMGGMTCCCMnTGMTCATT CACAGTCCGTATCATrArnTAAACGTCMAAGTATTCTGnTGAAGATCCMGAMTTC CMGGACTGGGTAAAACnTGTTTrcTAATGCn'n'iTAGCCTCTTTATl'nT歸CTC nTMTCGACATAGGCCCMGAATTGACATAGGCCCMGCCCTCTAGTAGTATGGGGATG ATGCATCGAGAGGGGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGMAATCCTCGTG TCACCAGTTCAAAT
〈210〉 15 〈211〉 1022 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉防己OSte/^a"Za fe/ra"flfra)的&ml-fr"F片段〈400〉 15
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACTrGATrGGATTGAGCCTTGGT八TGG八TACCTACTAAG TGMAACnTCAAAlTCAGAGMCCCCTGGAATTAMAATGGGCAATCCTGAGCCAAATC CTGrnTCAGAAAACAMAAAGGGTTTAGMTAGGAGACTCAAAMTGGATAGGTGCAGA GACTCAATGGAAGCTGTTCTAAGAAATGGAGTTCAnGanTGCGlTAGTGGAGGAATCC TTCTATTG嵐CTCCAGTAAAGGATGAAOTATCTATATACATACGTCTACGTACTG嵐 TATCAMGAnCATGATGATCCGAATCTGTATTTATGAAAAATGGAAGAATITGTGTTTT TGTAAATCAATTCCAAGTrGAAGGAAGMTCGMCATrCACTGATCAAATCAGTCACTCC ATAGTCTGATAGGTCnTTGAAGAACTGACTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCA TTCTACGTGTCMTACCGACAACAATGAAAnTATAGTAAGAGGAAMTCCGTCGACnT AG嵐TCGTGAGGGTTCAAGTCCCTCTATCCCCMGAAAAATAAAAGGCCAATnTACTC
CCTAACGAGrrATa'rn'rn'n'n'n'n'cnTCTnTCGGCAGCAGTTCCAAATTCGCT
ATGTTTCTCGrrCACTCTACTCnTCCCAAACCAAATGGATGGGAAGAGAAATGTTTCTC TnTATCACAATACTTGTGATATATACGTACAAATGAGCATCTATGGGCAAGGAATCCCA AnTGMTCAnCACAGTCCGTATTATATTCTAATnTGAACGCCAAAAGTATTCTGTIT GATGMGATCCMGAAATTCCAAGMCTGGGTMGATnTGTnTGCMTGCrnnTAG TCTCTnMITGACATAGGTCCAAGCCCTCTAGCAGTATGGGGATGACGCATCGAGAGAG GGGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAMTACTCGTGTCACCAGTTCM AT
〈210〉 16
〈211> :
〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉歐白英(So/a"ww t/w/ca附ara)的？r"L-fr"F片段
〈400〉 16CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITAATTGGATrGAGCCrrcGTATGGAAACTrACTAAG TGATCACTTTC嵐rrCAGAGAAACCCTGGAATTMCAAAAATGGGCAATCCTGAGCCAA ATCCTGTnTCTGAAAACAMCAAAGGTTCAGAAAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAAT GGMGCTATrCTAACAAATGGAAlTAAATGCGTrGGTAGAGGACTCnTACATCGAAACT TCAGAAAGAAAAAGMTGMGTGAAGGATAAACGTATATACATACGTATTGAATACTATA TCAAATGATTAATGACGACCCGAATCCGTAGTmTCTATAAAAAATCGMGAAnGGTG TGAATCCATTCTACAnGAAGAAAGAATCGAATAnCAlTGATCAAATCAnCACTCCAT AGTCTGATAGATCrnTGAAGAACTGAnMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCGTT CTACATCTCMTACCGGCAACMTGAMnTCTAGTAMAGGAAAATCCGTCGACTTTM AAATCGTGAGGGTTCMGTCCCTCTATCCCCAAAAAGACTAnTAACTCCCCAACTATIT ATCCGACCCCCnTCCTrAGCGGTTGCAAATrCCTTATCnTATCATrCACTCTATTCTT TTAGAMTGGA'nT丄'丄TiTCTAAGCGTAAATGGrnTCTOTATAACAAGCCnTATGAT ATCTATGATACACATAAAAATGAACATCnTGAGCAAGGMTCCCTAGTTGAATGAnCC CGATCAATACAATATCATTACTCATACTGAAACTTACAAAGTCATCnTTTGAAGATCGA AGAAATTACCCGGnTGAGAAAA'n'lTn'AATCTACnTGTGTCCmTAArrGACATAG CCCCCAGnCTATGATAMATGAGGATACCACGC嵐GGACTAAAMTCCTCAGGTTAGC GGTTCCAATCGAGATrGGGMTAGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAM ATCCTCGTGTCACCAG1TCAAAT
〈210〉 17 〈211〉 1041 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉白英(Soto"Mw/yra仏w)的/r"L-ZmF片段〈400〉 17
CGAMTCGGTAGACGCTACGGACTrMTrGGArrGAGCClTGGTATGG嵐CTTACTAAG TGATCACnTC嵐TTCAGAGAAACCCTGGAATTMCAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAA ATCCTGrnTCTGAMACAAACAAAGGTTCAGAAAAAMGGATAGGTGCAGAGACTCAAT GGMGCTATTCTAACAAATGGAGTTAAATGCGITGGTAGAGGACTCnTACATCAAAACT TCAGAAAGAAAAAGAATGMGTGMGGATAAACGTATATACATACGTAnGAATACTATA TCAMTGATTAATGACGACCCGMTCCGTAGrmTCTATMMAATCGAAGMTTGGTG TGAATCCATTCTACAnGAAGAAAGAATCGAATArrCArrGATCAAATCATrCACTCCAT AGTCTGATAGATCTnTGAAGAACTGATTMTCGGACGAGAATAAAGATAGAGTCCCGlT CTACATGTCAATACCGGCAACAATGAMTITATAGTAAMGGAAAATCCGTCGACnTAA AAATCGTGAGanTCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAGACTATITAACTCCCCAACTAnT ATCCGACCCCCnTCCTTAGCGGTTCCAAATTCCITATCnTaCATTCACTCTATTCTT TTAGAAATGGATiTiTn'CTMGCGTAAATGGrnTCTCTTATCACAAGCCnTATGATA TCTATGATACACATAGAAATGAACATCnTGAGCAAGGAATCCCTAGTTGAAAGATTCCC GATCAATACAATATCATrAOTATACTGAAAaTACMAGTCATCnnTGMGATCGAA GAAATrCCCCGGnTGAGAAAA'l'i'i'riTAATCTAmTAGTCCTnTAATrGACATAGAC CCCAGTTCTATGATAAAATGAGGATACCATGCAAAGGACTAAAAATCaCAGGTrAGCGG nCCAATCGAGATTGGGMTAGCCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAAT CCTCGTCTCACCAGTTCAMT
〈210〉 18 〈211〉 847 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:大百合(Cardiocrinum giganteum)的trnL-trnF片段〈400〉 18
CGAAATCGGTAGACGCTACGGACITGArrAAATrGAGCCTrGGTATGGAAACCTGCTMG TGATAACCTCCAAATTCAGAGAAACCCCGGAATTAAAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATC TITATnTGAGAAAAAGGGTnMnTATAGTnTTATAATATAAAACTACMTAAAAAA AGATAGGTGCAGAGACTCAATGGMGCTGrrCTAACGAATGAAGTTGATTACGTrGCGCTGGTAGCCGGAATCC1TCTATCAMATTACGGAGAGGATGCCCGCCCTATATACGTATATA TACATACTGACATAGTMACGATTGATTAATCACGGCCCGAATCCA1TATATAATATATA TATATATGAAAAATITMGAGlTATrGTAAATCCATrCCATATrcCAATCAAAGTITMG GMGAATCAAATATrCAGTGATCAMTrATTCGnCCAGAGTCTGTATAGATCTnTTAA AAACTGATTATTCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCCATnTACGTCTCAATACCGACAA CAATGAAAnTATAGTAAAAGGAAMTCCGTCGACnTATAAGTCGTGAGGGTTCAAGTC CCTCTATCCCCAATAAAAGCCCATnTAAGTACTMaTAACTATACTTCCTAACTACIT TTTATCTTATCrnTnTAATCTAAGAAAITCAGGGGCTGGGTAAGATn.iTl'AGTACTr TCnMnTnTAGTaCTTTMTTGACATAGGTAMGTGCTCTACTAGGATAATGCGCG AGAAMGGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAG TTCAAAT
〈210〉 19 〈211〉 847 〈212〉 DNA 〈213〉寧物
〈223〉云南大百合(Cardiocrinum yunanense)的trnL-trnF片段〈400〉 19
CG嵐TCGGTAGACGCTACGGAOTGATTAAATTGAGCaTGGTATGGAAACCTGCTMG TGATAAaTCCAAAlTCAGAGAAACCCCGGMITAAAAATGGGCMTCCTGAGCCAMTC TITArnTGAGAAAAAGGGrnMnTATAGTmTATMTATAAAACTACAATAAAMA AGATAGGTGCAGAGACTCAATGGAAGCTGTTCTMCGAATGAAGlTGATrACGTrGCGCT GGTAGCCGGMTCOTCTATCAAAATTACGGAGAGGATGCCCGCCCTATATACGTATATA TACATACTGACATAGTAAACGATTGAnAATCGCGGCCCGAATCCATTATATAATATATA TATATATGAAAAATITMGAGTrATTGTAAATCCAITCCATArrCCAATCAAAGTTrAAG GMGAATCAAATATrCAGTGATCAAArrArrCAlTCCAGAGTCTGTATAGATCrmTM AMCTGATTATrCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCCATTCTACGTGTCAATACCGACAA CAATGAAAnTATAGTAMAGGAAAATCCGTCGACnTATAAGTCGTGAGGGTTCAAGTC CCTCTATCCCCAATAAAAGCCCATnTAAGTACTMOTAACTATACrrCCTMCTACTT nTATOTATCTnmTMTCTAAGAAATTCAGGGGCTGGGTAAGATnnTAATACn TOTMTnTTTAGTCTCnTMTrGACATAGATAAAGTGCTCTACTAGGATAATGCGCG AGAAMGGTCGGGATAGCTCAGTTGGTAGAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAG TTCAAAT
〈210> :20 〈211〉 819 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉薯蕷(Dioscorea cirrhosa)的trnL-trnF片段〈400〉 20
CGAAATCGGTAGACGCTACGGAOTGATTGAATTCAG(nTGGTATGGAAACCTGCTAAG TGATMOTCCAAATrCAGAGAAACCCTGGAAnTGAMTGGGCAATCCTGAGCCAAATC TTTATITGTnTG'iTlTlTATAAACCCnTGGnTATAAAAAAACAAAACAAACTAGAAT CAAAMTCAAAAAGGATAGGTGCAGAGACTCAATGGAAGCTGTTCTAACGAATGGAATTG ACTACGnATGnGGTAGTTGGAAAACCTACATrGAAATTATGAMAGGGGAGTTCTATA TACCCAATACGTACGTATACATACTMCATATTAAAGGATTMTCACGACCCGAATCCAT TATnTAnTATATATAnATGAAAAAATGGAAAGTTATATrGTGAATCTAnTCAACCG MGTKMGGAAGAATCAAATATnMTGATCAAATCATTGAnCTAGAGTCTGATAGAT CmTGAAAAACGAATTAATCGGACGAGAATAAAGAGAGAGTCCTGCTCTACATGTCAAT ACTGACAACAATGAAATTTATAGTAAGAAGAAAATCCGTCGACTTTAGAAATCGTGAGGG TTCAAGTCCCTCTATCCCCAAAAAAGTCCArnTAnTCCTAATTATITATACTCTnTT TTTGMGATCGAAGGACTGGATAAGATnnTMGAGTCCCCTTAATrGAGATAGATAGA TATAAGTACTCTAGCAGGATGATGCGAGAAAAGAAAATGGTTGGGATAGCTCAGTTGGTA GAGCAGAGGACTGAAAATCCTCGTGTCACCAGTTCAAAT
28〈210〉 21 〈211〉 343 〈212> :DNA 〈213〉植物
〈223〉馬兜鈴(Aristolochia contorta)的psbA-tmH片段〈400〉 21
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACAACTrCCCTCTAGACCTGGCTGCTOTGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAATACATCGTTAnTGTGTATACGAGTCGTTGAAGGAGCAATACCCA ATCCTnTGrraTATCMGAGGTGGGTATrGTrcCGCTCAATrCACTATCMCTCATTA GAGTnTACTCATATnTACTCATTnTACTCATATCGCATATATATTATATGTATATGC ATnTATCCATAGnTAAAGnAAAAAAMAAMAAAGGAAAGGCCAGGGGCGGATGTAG CCMGTGGATCAAGGCAGTGGATITGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 22 〈211〉 349 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:青木香(Aristolochia debilis)的psbA-tmH片段〈400〉 22
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMC1TCCCTCTAGACCTGGCTGCTCTTGMGCTCCA TCTACAAATGGATMTACATCGlTATrAGTGTATACGAGTCGTrGMGGAGCAATACCCA ATCCTnTGTraTATCAAGAGGTGGGTATTGTTCCGCTCAATrCACTAGAGrnTACTC ATATnTACTCATATCGCATATATMTATATTATATGCTATGCATnTATCCA'n'iT丄Ti' AGTITAAAGTTAAAAAAAAAAATGAAAAAGGAAAGGTrAAAAAGGAAAGGCCAGGGGCGG ATGTAGCCAAGTGGATCMGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 23 〈211〉 276 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:廣防己(Aristolochia fangchi)的psbA-trnH片段〈400〉 23
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACITCCCTCTAGACCTGGCTGCTCnGAAGCCCCA TCCACAAATGGATAATAOTCGGTATTAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCAATACCCA ATraTGrnTTATCAAGAGGTGGGTATTGTrCTGCTCAAlTCACTAGTGTnTACTCAT TACAGCGGATTACTCCnTnTGMGTTAAAG嵐GGGCAGGGGCGGATGTAGCCMGTG GATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 24 〈211〉 261 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:馬兜鈴(Aristolochia kaempferi)的psbA-trnH片段〈400〉 24
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACAAaTCCCTCTAGACCTGGCTGCTaTGAAGCTCCA TCCAC嵐TGGATAATACTTCGGTAnAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCMTACCCA ArrCTTGTmTATCAAGAGGTGGGTATrGTTCTGCTCAATTCACTAGTGTnTACTCCT nnTnTAAGTTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATCTAGCCMGTGGATCMGGCAGTGGA TTTGTGAATCCACCATGCGCG〈210〉 25 〈211〉 274 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉關木通(Aristolochia manshuriensis)的psbA-trnH片段〈400〉 25
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMaTCCCTCTATACCTGGCTGCTOTGAAGCTCCA TCCACAAATGGATAATACATTCGGTATTAGTGTATACGAATCGTTGAAGGAGCAATACCC AATrCTTGrmTATCAAGAGGCGGGTAITGTrCTGCTCAATrcACTAGTGTnTACTCG CGGATTACTCCnnnTnTAAGlTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGA TCAAGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 26 〈211〉 260 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉尋骨風(Aristolochia mollissima)的psbA-trnH片段〈400〉 26
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAAOTCCCTCTAGACaGGCTGCTCTrGMGCTCCA TCCACAAATGGATAATACTTCGGTATTAGTGTATACGMTCGTTGMGGAGCMTACCCA ATTCTTGrmTATCAAGAGGTGGGTATrerrCTGCTCMnCACTAGTGrnTACTCCT TTnTmTAGTTAAAGAAAGGGCAGGGGCGGATGTAGCAAGTGGATCAAGGCAGTGGAT TTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 27 〈211〉 517 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉:木香(Aucklandia lappa)的psbA-trnH片段〈400〉 27
GGTATGCATGAACGTMTGCTCATAAnTCCCTCTAGACITAGCTGCTATCGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAAGACnTGGTCTCATTGTATAGGAGTmTGMCTAAAAAAGGAGC AATAGCTrCCacrrGTTTTATCMGAGGGCGTTATTGCTCCn'n'n'rATITAGTAGTA TTTACCTrACATAGTTTCnTAAAAATAACAAGGGGGTnTATAGnTGGTrCGATTAGC ATGTTTTATCnTGTATrAATITCTATrATAGGTITATATATCCTnTCCCMTCGTITA TCAAGTnTArrTCCAACTCMTITCAATCTAAAATAGATAAAAATrATMTnTGATrA TITATrGCTnTATITCAGAAATAAGAAAGAAATAATATGCTCnTnnTATGTrMTG GAAAAATAAMTATAGTAATAGTAGATMTACTAGATAATAGGGGCGGATGTAGCCMGT GGATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 28 〈211〉 518 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉灰毛川木香(Vladimiria souliei var. mirabilis)的psbA-trnH片段〈400〉 28
GGTATGCATGAACGTAATGCTCATAATITCCaCTAGACTTAGCTGCTATCGAAGCTCCA TCTACAAATGGATAAGACnTGGTCTGATTGTATAGGAGTnTTGMCTAAAAAAGGAGC AATAGCTTCCCTCTTGTnTATCAAGAGGGCGTTATTGCTCCnTTTTTAnTAGTAGTA TITACaTACATAGnTCnTAAAAATMCAAGGGGGGTnTATAGnTGGrrCGArrAG CGTGTnTATCnTGTArrMTITCTATrATAGGTTTATATATCCrnTCCCMTCGTTrATGAAGTnTAnTCCAACKMnrCMTATAMATAGATAAAAATTATAATnTGAn ATITATrGCrnTAnTCAG嵐TAAGAAAGAAATAATATGCTCrriTlTn'ATGTrMT GGAAAAATAAAATATAGTMTAGTAGATAATACTAGATMTAGGGGCGGATGTAGCCAAG TGGATCAAGGCAGTGGATITGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉〈211〉〈212〉〈213> 〈223〉〈400〉
29
617
DNA
植物
木通(Akebia quinata)的psbA-tmH片段 29
GGTATGCATGAACGTMTGCTCACAACrrCCCTCTAG八CCTAGCrGCTGTCGAAGCTCCA GCGACAAATGGATMGATrrCCGTOTAGTGTATCCGAGTrATTGMGGTCAAGGAGTAA TACCCAATTTCITGTrCTATCAAGAGGACGGGTAlTGTrCCTTCATrTAGTnTAGTAGT TTTTACTCGCAGAATCTGCTCTiT丄'i,riTr丄'丄'AnTATnTAACTAAAATAAAAATGAAT ATAGGnTATrCATrAlTGAGTATCATACTnTGrrCTGTATAAAATATATAATITATGA AnTATATATGTTATATGrrCCTCG纖'丄'丄T丄TGAOTGAaT丄'rri'CATAAATrATGG AMTrATGAAACTAAAGCTACTTmTATAMGGATrGGTCTTGCATGCCCAATATCTGT ATOTAGTATATaTAGTATCMGAAMGTAAGAACTACTCMTTAAAAAACTCAATTAA AAMTGAAAAATAACAAAAAAAGAAATrCAAnTCTACCATATGGTi'i'丄Ti.iT丄'ArmT TTGTGAGTTTGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCAAGGCAGTGGATITG TGAATCCACCATGCGCG
〈210〉30
〈211〉617
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉三葉木通
〈400〉30
(Akebia trifoliate)
的psbA-trnH片段
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACTTCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTCGMGCTCCA GCGACAAATGGACAAGAnTCCGTCTTAGTGTATCCGAG!TATTGMGGTGAAGGAGTAA TACCCAATTTaTGTrCTATCMGAGGACGGGTATTGTrCOTCATITAGTnTAGTAGT rnTACTCGCAGAATCTGCTCnTn'n'n'rAnTATnTMCTAAAATAAAAATGMTA TAGGnTATTCATrATTGAGTATCATACTmmTCTGTATAAAATATATMHTATGM nTATATATGTTATATGTTCCTCGAAATlTnTGAOTGACnTrn'CATAAATrATGGA AATTATGAAACTAAAGCTACTiTiTi'ATAAAGGATrGGTOTGCATGCCCMTATCTGTA TaTAGTATATOTAGTATCAAGAMAGTMGAACTACTCAATTAMAAATAAAAAATGA AAMTMCAAAAAAAGAAATTCAATTTCTACCATATGG'n'n'n'nTn'n'nTATrnT TTGTGAGnTGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCAAGGCAGTGGAnTG TGAATCCACCATGCGCG
〈210〉〈211〉〈212〉〈213〉〈223〉〈400〉
31
608
DNA
a物
三葉木通(Akebia trifoliata var. australis)的psbA-tmH片段 31
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACnCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTCGMGCTCCA GCGACAAATGGATAAGAmCCGTCTTAGTGTATCCGAGTTMTGAAGGTGAAGGAGTAA TACCCAAnTdTGITCTATCAAGAGGACGGGTATrGnCCTTCATTTAGTnTAGTAGT TnTACTCGCAGMTCTGCTCnTiTnTiTiTATITArnTAACTAMATAAAAATGM TATAGGnTATrCATTATTGAGTATCATACTnTGTTCTGTATAAAATATATAAnTATG
31AATnATATATGTrATATGrrCCTCGAAA'nTn'rGAOTGACn'n'n'CATAMTrATG GAMTTATGAAACTAAAGCTACnTnTATAAAGGAnGGTCTTGCATGCCCAATATCTG TATCTTAGTATATCTTAGTATCMGAMAGTAAGAACTACTCAAITAAMAATGAAAAAT AACAAAAAAAGAAATTCAATTrCTACaTATGGlTi.n.i,i'i'iTn'ATi'n'iTi'GTGAGTT TGAGGGAGTAGGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGCTCMGGCAGTGGATITGTGAATCCAC CATGCGCG
〈210〉32
〈211〉456
〈212〉DNA
〈213〉植物
〈223〉鐵線蓮
〈400〉32
(Clematis armandii)
的psbA-tmH片段
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACTCCCCTCTAGATCTAGCGGCTGTTGMGITCCA TCTACMATGGCTAAGACrrAGGTCTTAGTGTATGCTAGTOTAGTGTATATGAGTCGlT GMGTTGCAGGAGTMTACCCCMlTCrrGCTCTGTCAAGAGGCCGGGCArrGCTCCTGC GTnTGTnTAATAGTGTnTAnTGCArmTCATMTGATl,nTl'A'lTi.i'丄TriTGM GTCAnTCATmTGMTrTGAAGTAAAAAAAAAAAATGACTCGAATGGGGGAlTGGTTG TTGMTTC1TGATTATCATACTCTCGTTCTGTACGTATATAAACCMTCCMTATAATAT GlTCCTAAAMrnTGAAACMTTTAnTGAGAAAGCGGAGGGGCGGATGTAGCCAAGTG GATCMGGCAGTGGATTTGTGMTCCACCATGCGCG
〈210〉 33 〈211〉 447 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉川木通(Clematis montana)的psbA-tmH片段〈400〉 33
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAAC1TCCCTCTAGATCTAGCGGCTGTTGAAGTTCCA TCTACAAATGGCTAAGACTTAGGTClTAGTGTAGGCTAGTCTrAGTGTATATGAGTCGTr GAAGrrGCAGGAGCAATACCTCAATTaTGTTCTGTCAAGAGGCCGGGCATTGCTCCTGC GTnTGTnTAATAGTGTnTATTTGCATnTGCATAATGATiTiT丄'Cn'i'lTlTi'iTGA AGTAAnTMnTGAAGTAAAAAAAAAATGACTCGAATGGAGGATTGGTTGGTGAAlTa TGATrATCATACTCTCGTrCTGTACATATATAMCCAATCCMTATAATATGTTCCTAAA AATTrGGAAACAATTTAnTGAGAAAGOGGAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGATCAAGGC AGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 34 〈211〉 643 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉木P方己(Cocculus orbiculatus)的psbA-tmH片段〈400〉 34
GGTATGCATGMCGTAATGCTCACMOTCCCTCTAGATCTAGCAGCTGTreAAGCTCCA TCTACAAATGGCTMGATrrCGGTOTAGTGTATACGAGTCGTrGAAGTrGAAAGAGCAA TACCCMTl'n'丄'丄'GTTCTGTCMGGGGGCGGGTATrGCTCaTCAAnAGGGTTAGTATT GTnTGTnTACTCACATAAGCA'n'n'nTCATnTCTAnTATTTAnTCAAOTATAA AATTCAGAMAAAGCATrCAATTAATAAGGArmnTGAGTArnTATTATGCCnGAT TCTGCACTAACGAATTTGTAAnTCTATATGTTATTrAGGTGATAGGTITCCCGACATCT TnTOTCCTAAAGTTCTnTATrATrCnTGAnnTnTCATATnTATITCTATTAG TITAGTnTAACTAAACTAGAAAAATAAAATAAAAGATrCCCTnTAGGTACAATATCTr TATnCAGTATATrCTAAAGAGATGCGTAAGTTAGG雄GACTTAACTTAAACATGTAAA<formula>formula see original document page 33</formula>ATCAITGAAATAAGAAAGMGAGAAATATTCGMCnTACTCTnTGTnTCGMTITAA ATAATGTAAAAATGGACTGTAAGTAGTCGAGGGGGCGGATGTAGCCAAGTGGATCAAGGC AGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
〈210〉 38 〈211〉 489 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉大百合(Cardiocrinum giganteum)的psbA-trnH片段〈400> :38
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACMTITCCCTCTAGACTAGCTGCTGTTGAAGrrCCAT CTACAAATGGATAAGACnCCATTCTGTOTAGTGTATACGMTCArrGATGGAGCAATA TCnTGTATaTGCTMAGATArrGCTCCCn'n'rn'GGCCMTCAITGTGGGTATMTG GTAGATGCCCTAGACCAAGTGACTATTATTTCnTCTCCTCCCTTATGnTAGTnTrCA ATTnTGCCGATAMTGAlTAGCTACAAAAGGA'rrn丁i'm'ATrGAACGTGTCACAGGG GArrACTCCnTATTACATTACArmTAMAlTGGCATTCTATGCCCMTATATCGATC TAAGTATGMGGTMGAATAMTACAATMTGATGMTGGAAAAAGAAMAAGCTAAAAT CnTTAGCTAGATAAGGGGCGGATGTAGCCAAGTGATCAGGCAGTGGAnTGTGAATCCA CCATGCGCG
〈210〉 39 〈211〉 492 〈212〉 DNA 〈213〉粵物
〈223〉云南大百合(Cardiocrinum yunanense)的psbA-trnH片段〈400〉 39
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAATrrCCCTCTAGACCTAGCTGCTGTrGAAGTTCa TCTACAAATGGATAAGACTTCCATTCTGTOTAGTCTATACGAATCATrGATGGAGCAAT ATCnTGTATCTrGCTAAAGATATTGCTCCCnTnTTGGCCAATCATTGTGGGTATAAT GGTAGATGCCaAGACCMGTGACTArrAnTCnTCTCCTCCOTATGnTAGTmTC AATTnTGCCGATAAATGATTAGCTACAAMGGATnTn'n'iAnGAACGTGTaCAGG GGATTACTCCnTATTACATTACArmTAAAATrGGCATTCTATGCCCMTATATCGAT CTMGTATGAAGGTAAGMTAMTACAATAATGATGAATGGAAAAAGAAAAMGCTAAAA TCmTAGCTAGATMGGGGCGGATGCAGCCAAGTGGATCMGGCAGTGGATITGTGAAT CCACCATGCGCG
〈210〉 40 〈211〉 401 〈212〉 DNA 〈213〉植物
〈223〉薯蕷(Dioscorea cirrhosa)的psbA-trnH片段〈400〉 40
GGTATGCATGAACGTAATGCTCACAACnTCCnTAGAOTAGCTGCTGrrGAAGTTCCA TCTACAAATGGATAAGACrnTGTOTAATGTATATGMTCGnGAAGGAGCAATATCAA TATCTTGTrCGAGCAAGMGnTGGTATTGCTCCCCTnTCAArnTrCCCGATAAATGA TCAACTACAAAAGGA'rnTlTlTrAGTGAACGTGTCACAGCGGAlTACTCCnTATTnT TACArmTMGATTGGCAlTCTATGlTCAATATCTCGATCTAATMGGTMGAATAAAT TTAAATACAATAATGATGMTGGAAAAAGAGAMATCCnTAGCTAGGGCGGATGTAGCC AAGTGGATCAAGGCAGTGGATTTGTGAATCCACCATGCGCG
權利要求
1. 一種用于判斷未經鑒定的植物材料是否源于馬兜鈴屬植物的方法，包括下述步驟(a)從所述未經鑒定的植物材料中獲得DNA樣品，所述DNA包括葉綠體DNA的片段，該片斷位于葉綠體DNA的trnL-trnF區間或位于psbA-trnH區間；(b)確定所述片段的DNA序列；以及(c)將所述DNA序列進行分析并判斷其是否包括馬兜鈴屬的表征片段，以評估所述未經鑒定的植物材料是否屬于馬兜鈴屬物種。
2. 如權利要求1的方法，其中步驟(c)通過比較上述DNA序列與含有馬兜鈴屬的表征片段的標準DNA序列而實現。
3. 如權利要求2的方法，其中標準DNA序列是葉綠體DNA的tmL -trnF片段或psbA - tmH片段，或者包含了葉綠體DNA的trnL - tmF片段或psbA - tmH片段，或者屬于葉綠體DNA的trnL - tmF片段或psbA - tmH片段的一部分。
4. 如權利要求2的方法，其中所述未經鑒定的植物材料源于木香、木通、防己、白英、馬兜鈴或朱砂蓮。
5. 如權利要求2的方法，其中，所述片段包括選自分子標記1至分子標記39的分子標記序列。
6. 如權利要求4的方法，其中，所述片段包括選自分子標記1至分子標記39的分子標記序列。
7. 如權利要求2的方法，其中，所述標準DNA序列選自SEQIDNO:l 至SEQ ID NO:40的序列，或者包含選自SEQ ID NO:l至SEQ ID NO:40 的序列，或者是選自SEQIDNO:l至SEQIDNO:40的序列的一部分。
8. 如權利要求7的方法，其中，所述標準DNA序列包含選自分子標記1至分子標記39的分子標記序列。
9. 如權利要求2的方法，其中，所述標準DNA序列選自SEQIDNO:l 至SEQ IDNO:40序列。
10. 如權利要求7的方法，其中，所述標準DNA序列是選自SEQID NO:l至SEQIDNO:40序列的一個序列的全部或一部分，并且所述部分至少占所選序列長度的80%。
11. 如權利要求1的方法，其中，所述馬兜鈴屬的表征片段位于trnL-trnF 片^殳之內。
12. 如權利要求l的方法，其中，所述馬兜鈴屬的表征片段位于psbA 一trnH片萃殳之內。
13. 如權利要求3的方法，所述標準DNA序列是葉綠體DNA的trnL -trnF片段，或者包含葉綠體DNA的trnL - trnF片段，或者是葉綠體DNA 中的trnL — trnF片段的一部分。
14. 如權利要求3的方法，所述標準DNA序列是葉綠體DNA中的 psbA - trnH片段，或者包含葉綠體DNA中的psbA - trnH片段，或者是葉綠體DNA中的psbA - trnH片段的一部分。
15. —種用于如權利要求1的方法的基因序列，選自SEQ ID NO:l至 SEQ ID NO:40的序列，或者包含選自SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO:40的序列，或者是選自SEQ ID NO:l至SEQ ID NO:40的序列的一部分。
16. 如權利要求15中所述的基因序列，選自SEQIDNO:l至SEQIDNO:40中的一個序列的全部或一部分，并且所述部分至少占所選序列長度的80 % 。
全文摘要
一種用于檢測在草藥產品和植物藥中的馬兜鈴屬草藥或植物的方法，可基于trnL-trnF片段和/或psbA-trnH片段的序列信息。葉綠體DNA的trnL-trnF片段和/或psbA-trnH片段包含了一些可高度表征馬兜鈴屬植物的片段。通過這種方法，比較材料不明的草藥或植物與已知材料的標準DNA序列在上述片段中的一個片段或者多個片段的相近似度可用于鑒別未知的材料。
文檔編號C12Q1/68GK101440398SQ20081009421
公開日2009年5月27日申請日期2008年4月22日優先權日2007年4月23日
發明者明李, 林曉嵐, 畢培曦, 畢穎騫, 邵鵬柱申請人:香港賽馬會中藥研究院有限公司

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