麻豆精品无码国产在线播放,国产亚洲精品成人AA片新蒲金,国模无码大尺度一区二区三区,神马免费午夜福利剧场

一種預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法

文檔序號:400103閱讀:373來源:國知局
專利名稱:一種預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法
技術領域
本發明屬于動物分子遺傳學領域,特別是涉及一種用分子標記檢測綿羊毛纖維直徑的方法。
背景技術
我國是一個農業大國,畜牧業是我國農業的重要組成部分,畜牧業在國民經濟中占有舉足輕重的地位。據統計,2010年畜牧業收入的增長速度已超過種植業,成為農民收入的主要來源之一。大力發展畜牧業仍然是我國農業產業結構調整、農業和農村經濟發展以及農民增收的重點。養羊業是我國畜牧業的傳統產業,細毛羊在我國養羊業中占重要位置,細毛羊是兵團畜牧業的主要畜種,也是兵團畜牧經濟中最具特色和代表性的優勢產業。我國人口眾多,又是世界服裝出口大國,細毛羊業的發展與我國畜牧業和紡織業的經濟效益和市場競爭力密切相關,影響著區域經濟的發展和社會穩定。培育成功的中國美利奴細毛羊享譽國內外。細毛羊業的發展為優化兵團農業結構,促進毛紡工業發展,提高畜牧業整體效益,以及加快養羊良種化進程都做出了重大貢獻。我國是世界上消耗羊毛最多的國家,羊毛的自給率僅為1/3,供求缺口很大,每年需要從國外進口大批細羊毛,總價值達到60億美元左右,其中大部分是細綿羊毛和超細綿羊毛。近年來,隨著毛紡產品向自然、舒適、輕薄、柔軟的方向發展,世界羊毛品質也出現了劃時代的變革,主要表現在羊毛細度上。中國對進口羊毛品質和細度的要求越來越高,我國和澳大利亞雙邊羊毛貿易的品質結構以羊毛細度作為標準,羊毛細度是體現加工價值的一個重要的指標,過去毛紡部門需求毛細度以60 64支為主,近年來66 70支羊毛的需求不斷增加,羊毛越細,加工附加值越高。中國美利奴羊(新疆軍墾型)的培育從1972年開始,劉守仁等在新疆生產建設兵團協作組以紫泥泉種羊場為育種場在短期內通過級進雜交方法成功培育中國美利奴羊(新疆軍墾型)。分為六個品系,分別為軍墾A型品系、軍墾B型品系、超細型品系、肉用多胎品系、 毛用多胎品系、U品系。A品系具有體格大,產毛量高,毛密的特點。B品系具有毛長,羊毛品質好的特點。超細毛品系具有毛細的特點,主體細度達到15 18 μ m (80 90支)。肉用多胎品系兼具肉品質好和繁殖率高的特點。毛用多胎品系兼具毛品質好和繁殖率高的特點。截止2002年已向全國23個省、自治區推廣優質種羊12萬只,為我國細毛羊事業的發展和改良工作做出了重大貢獻。但是,如何進一步提高羊毛細度,培育超細毛種羊,以及快速擴大種群規模仍然是一個重要問題。分子標記技術能夠在種羊選育中避免年齡、性別、環境的干擾,實現早期、快速、準確的選擇優質細毛羊,組建并擴大優質細毛羊種群。因此,尋找羊毛細度(毛纖維直徑)相關基因及分子標記,應用現代分子育種新技術快速培育超細毛羊、快速擴大優質細毛羊種質規模勢在必行。研究表明,羊毛纖維的復雜結構主要由角蛋白家族組成。這些蛋白對于羊毛纖維的機械性能和主要構造起主要作用。羊毛纖維主要由三部分組成角質層、皮質層和一少部分有髓粗毛組成。羊毛纖維的90%由皮質層組成,皮質層由嵌入角蛋白關聯蛋白-KAPs 里面的絲狀的微纖維組成。微纖維包括角蛋白中間絲蛋白,而角蛋白中間絲蛋白是我們已知的“硬” a -角蛋白。這些角蛋白是低硫蛋白,由兩個蛋白家族構成,分別是I型角蛋白和II型角蛋白。根據氨基酸組成,KAPs分成三類高硫角蛋白關聯蛋白(KAP1. η、ΚΑΡ2. η、 ΚΑΡ3. η),超高硫角蛋白關聯蛋白(ΚΑΡ4. η、ΚΑΡ5. ικΚΑΡΙΟ. η)和高甘氨酸-酪氨酸角蛋白關聯蛋白(ΚΑΡ6. η、ΚΑΡ7. η、ΚΑΡ8. η)。KAP基因大多為小片段,大小一般在0. 6Kb 1. 5Kb之間,并且都不含內含子。在羊毛纖維蛋白中有很多變異,尤其對于基質蛋白,盡管在數千年針對羊毛纖維的品質選育中,變異逐漸減少,但是,毛纖維異質性仍然存在。很多研究報道角蛋白和KAP 基因家族存在多態性。角蛋白及亞家族編碼基因存在多個插入/缺失和單核苷酸(SNP) 突變,這些基因多樣性與羊毛性狀(細度、強度、彈性和彎曲度等)存在相關關系(管峰等, 2007)。羊毛細度是一個高遺傳力性狀,達到0. 59,但在不同綿羊品種間略有差異(Safari 等,2007),同時羊毛纖維的細度是一個復雜的調控過程,受到多種影響因素的調控和制約, 與體重、體脂含量、繁殖率等也存在相互制約關系。最近在KAP1. 1、KAP1.3基因編碼區發現了多個SNP位點,但是和羊毛性狀之間的關系尚需進一步研究(Itenge-Mweza等,2007)。劉桂芬等(2005)用微衛星標記對新疆優質細毛羊進行專門的遺傳多樣性及羊毛細度候選基因進行分析,選擇21號染色體上高硫蛋白家族中KAP1. UKAP1. 3中的部分序列和1號染色體高甘氨酸一酪氨酸蛋白KAP6. 1的外顯子進行研究,結果發現KAP1. 1、KAP1. 3所在區域中位點W08667與羊毛細度相關(P<0. 05)。張亞妮等研究了 KAP基因與內蒙古絨山羊經濟性狀的關系得出KAP基因的部分位點與絨細度存在相關。

發明內容
本發明的目的在于提供一種操作簡單、成本低、精確度高的采用PCR和聚丙烯酰胺凝膠電泳來檢測綿羊毛纖維直徑,從而預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法。本發明通過以下技術方案實現
一種預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征主要包括以下步驟 (1)根據綿羊KAP1. 1基因序列設計一對引物 KFl: <210>1 ; KRl: <210>2。(2)從綿羊血液中提取基因組DNA,利用該引物對綿羊的基因組DNA進行PCR擴增;
(3)使用聚丙烯酰胺凝膠對PCR產物進行電泳分離,檢測出KAP1.1基因外顯子中的 60bp和30bp插入/缺失的變異位點;
(4)多態性分析當綿羊KAP1.1基因外顯子缺失60bp時,PCR擴增片段長度為^lbp, 將其命名為CC基因型;當綿羊KAP1. 1基因外顯子缺失30bp時,PCR擴增片段長度為311bp, 將其命名為BB基因型;當綿羊KAP1. 1基因外顯子含有60bp和30bp插入時,PCR擴增片段長度為341bp,將其命名為AA基因型;該位點雜合的個體PCR擴增產物為兩條帶,分別為 341bp和311bp,將其命名為AB基因型;341bp和281bp,將其命名為AC基因型;311bp和
5^lbp,將其命名為BC基因型。實驗證明具有BB基因型綿羊的平均毛纖維直徑顯著小于具有AA、BC、AC、AB和CC 基因型綿羊的平均毛纖維直徑(P<0. 05)。其中用于分析多態性的位點選自綿羊KAP1. 1基因如下序列中的60個和30個堿
基的插入/缺失,
1 caaccctcct ctcaacccaa ctcctgacac catggcctgc tgttccacca gcttctgtgg 61 atttcccatc tgttccactg gtgggacctg tggctccagt ccctgccagc agacctgctg 121 ccagaccagc tgctgccagc caacctccat ccagaccagc tgctgccagc caacttccat 181 ccagaccagc tgctgccaac cga(tctccat ccagaccagc tgctgccagc caa)cctccat 241 ccagaccagc tgctgccagc caacctgcct ccagaccagt ggctgtgaga cgggctgtgg 301 cattggtggc agcattggct atggccaggt gggtagcagc g,
以上序列下劃線部分為60個堿基的插入/缺失,單劃線部分為30個堿基的插入/缺失。其中分析基因多態性的方法是通過檢測堿基的插入/缺失而分類的基因型,其中用于分析基因多態性的部位是外顯子。而且是由KFl和KRl表示的引物擴增的部分外顯子區。其中用于聚丙烯酰胺凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠濃度為1 或14%任一種均可。所述的PCR擴增退火溫度最好為65°C。其中綿羊毛纖維直徑是綿羊的毛細度。本發明巧妙地采用PCR擴增和凝膠分離的方法檢測綿羊KAP1. 1基因外顯子中的 60bp和30bp插入/缺失的變異位點。由于AA基因型和BB基因型的KAP1. 1基因片段長度僅差30個堿基,由于BB基因型和CC基因型的KAP1. 1基因片段長度也僅差30個堿基,使用瓊脂糖凝膠電泳很難將兩種基因型分離,因此本發明采用1 或14%的聚丙烯酰胺凝膠電泳來分離六種基因型。按照以下步驟
從綿羊血液中提取基因組DNA,應用KFl和KRl引物進行PCR擴增,使用聚丙烯酰胺凝膠對PCR產物進行電泳分離,根據條帶進行基因型判定,并根據基因型,與綿羊毛纖維直徑進行關聯分析的應用。與現有技術相比,本發明的優點本發明操作簡單、費用低、精確度高,可進行自動化檢測。使用本發明的標記基因型對綿羊的毛纖維直徑進行選擇時,將使綿羊毛纖維直徑取得很大的遺傳進展。利用本發明的分子標記方法對毛纖維直徑進行選擇,不僅為綿羊育種工作中標記輔助選擇提供了一個更為有效、簡便易行的分子標記方法,同時為綿羊的細度性狀改良提供了一種有效的分子標記育種手段,可以加速優質細毛羊的育種進程。


圖1 是本發明的技術流程圖。圖2 綿羊KAP1. 1基因PCR產物的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖。圖中聚丙烯酰胺凝膠濃度為14%。M泳道pUC 19DNA/Msp (HapII)Marker ;泳道 1 :CC基因型個體;泳道2、3 :AB基因型個體;泳道4、5、12、13 :BC基因型個體;泳道6、7、8、 9、10 :BB基因型個體;泳道11、14 4(基因型個體;泳道15、16 44基因型個體。箭頭所指為331bp的條帶。
圖3 為3個分子標記在群體中不同基因型展示圖。其中,A為AA基因型位點,B 為BB基因型位點,C為CC基因型位點。
具體實施例方式實施例1 下面舉例對本發明做更詳細地描述 一、實驗材料
1、樣品采集和性狀測定
采用一次性注射器從綿羊頸靜脈抽取約Iml的血液,注入經高壓滅菌并裝有約200μ1 2% 無菌 EDTA (Ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝齊[J的 L 5ml 離心管中,輕輕搖勻,記錄羊號,-20°C保存備用。采集綿羊體側部皮膚毛樣,根據國家纖維檢驗標準并參考國際羊毛組織(IWTO)纖維檢測標準,對綿羊體側部毛樣進行細度、卷曲度、細度離散、自然長度、污毛量、密度、凈毛率的測定。2、藥品和酶
三羥甲基氨基甲烷(Tris),Sigma Chemicals Co ;Tris飽和酚,北京鼎國生物技術發展中心;蛋白酶 K (Proteinase K),MERCK Co ;dNTP (dATP; dTTP; dCTP; (IGTP)Jaq 酶(配套 IOXTaq buffer, 25 讓ol / L Mg2+ ),大連寶生物公司;瓊脂糖(Agarose H)、pUC19DNA / Msp (Hap II) Marker、丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺,生工生物(上海)有限公司。3、主要儀器
Icycler PCR 儀(Bio-fcid 公司)、梯度 PCR 儀(Eppendorf 公司)、Gel2000 凝膠成像系統、Ultrospec 1000紫外分光光度計、Sigma 3K30高速冷凍離心機、Milli-Q超純水儀、 Bio-Rad穩壓電泳儀及配套電泳槽。二、實驗方法
1、緩沖液與常用試劑的配制
TE 緩沖液=IOmM Tris · Cl,ImM EDTA,pH8. O,高壓滅菌。20 X SET 緩沖液3M NaCl, IM Tris .Cl CpH 8.0),20mM EDTA (pH 8.0),高壓滅菌。5XTBE 緩沖液54g Tris 堿,27. 5g 硼酸,20ml 0. 5M EDTA (pH8. 0),加水至 1L。50XTAE 緩沖液242g Tris 堿,57. Iml 冰乙酸,100ml 0. 5M EDTA (pH8. 0),加水至IL0IM Tris · Cl :121. 14g iTris堿溶于800ml雙蒸水中,用鹽酸調pH值至8. 0,定容至1000ml,高壓滅菌。0.5M EDTA :186. Ig EDTA 溶于 800ml 雙蒸水中,用 NaOH 調 pH 值至 8. 0,定容至 1000ml,高壓滅菌。3M NaAc (pH5. 2) :408. Ig NaAc · 3H20 溶于 800ml 雙蒸水中,用冰乙酸調 pH 至 7. 0,定容至 IOOOml0200ml 銀染液=NH3 · H2O 2ml ; 3. 6% NaOH 4. 2ml ;20% AgNO3 3. 6ml,加去離子水至 200ml。200ml顯色液1%檸檬酸鈉Iml ;甲醛IOOul ;加去離子水至200ml。
7
血細胞裂解液:10mMTris · Cl (ρΗ8· 0),0. IM EDTA (ρΗ8· 0),0. 5% SDS。2、引物的設計與合成
根據KAP1. 1基因序列(GenBank登錄號AY835603)設計上游引物KFl和下游引物KR1, 引物由生工生物(上海)有限公司合成 KFl: <210>1 ; KRl: <210>2。3、綿羊基因組DNA的小量提取
(1)取20 μ 1抗凝血液,加入500 μ 1血細胞裂解液,加入蛋白酶K至終濃度為100-200 μ g/ml,混勻55°C消化l ir,直至溶液中不再有粘稠的團塊。(2)將溶液冷卻至室溫,加入5M NaCl至終濃度1. 5 M,混勻lOmin。加入等體積酚/氯仿,反復顛倒離心管混勻lOmin。豊
(3) 12,000 rpm,室溫離心lOmin。取上清,加等體積氯仿混勻IOmin0(4) 12,000 rpm,室溫離心lOmin。取上清2倍體積無水乙醇沉淀DNA。(5)將DNA挑出放到1. 5ml離心管中,用70%乙醇洗1次。豊 (6)7,500 rpm,室溫離心5min,棄上清。(7)將DNA干燥后(注意不能太干)溶于200 μ 1 TE中。4、PCR 反應
(1)以綿羊基因組DNA為模板進行PCR擴增,25 μ 1反應體系中包含以下溶液或試劑
IOXPCR reaction buffer2. 5 μ 1
dNTP Mixture (各 2. 5mM)2. O μ 1
引物 1 (10 μ Μ)0. 5μ 1
引物 2 (10 μ Μ)0. 5μ 1
EX-Taq (5U/μ 1)0.25 μ 1
去離子水18. 25 μ 1
基因組 DNA (50ng/y 1)1. Ομ 1
(2)將上述溶液混合并按以下條件進行PCR反應。94°C變性5 min;94°C 30 sec,65°C 30 sec,72°C 30 sec,33個循環;72°C延伸 5 min。(3)反應結束后,取PCR反應液(5 10 μ 1)進行瓊脂糖凝膠電泳,檢測PCR產物。5、非變性聚丙烯酰胺凝膠制作及電泳
以濃度為14%、體積為25ml,厚度為0. Icm的膠為例。(1)清洗制膠用的玻璃板并用蒸餾水沖洗干凈,烘干后,用0.8%瓊脂糖封閉玻璃板和膠條間的縫隙。(2)在 IOOml 燒杯內加入 30% 丙烯酰胺 11. 7ml, 50% 甘油 2. 5ml, 5XTBE 5ml, 10% 過硫酸銨0. 175ml, TEMED 8 μ 1,去離子水5. 617ml,混勻后迅速灌膠。(3)當澆灌至離玻璃板上沿0. Icm時停止灌膠,插入梳子,室溫聚和半小時,多余的丙烯酰胺4°C保存。隨時觀察凝膠聚合情況,并補加丙烯酰胺。(4)凝膠聚合好后,向電泳槽加入IXTBE,用注射器沖洗加樣孔。(5)預電泳lOmin,同時準備點樣。(6)取2 μ 1 PCR產物置于PCR管中,加2 μ 1上樣Buffer混勻,用微量注射器點樣。
8
(7) 120V,電泳 8 10h。6、硝酸銀染色方法
(1)電泳結束后關上電泳儀,放出電泳液,小心取下凝膠,置于70%乙醇中,水浴震蕩器緩慢搖勻固定l(Tl5min。(2)雙蒸水洗膠2遍,每次2min,去除殘留乙醇。(3 )用 200ml 染色液染色 30min。(4)雙蒸水洗膠3遍,每次anin。(5)用200ml顯色液顯色,約l(T30min,當DNA帶的強度合適時,倒掉顯色液。(6)去離子水洗掉多余的顯色液,保鮮膜封好,掃描照相或保存。7、基因型判定
經非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,KAP1. 1基因在綿羊群體存在六種基因型,對于 PCR擴增片段長度為觀讓?,將其命名為CC基因型;對于PCR擴增片段長度為311bp,將其命名為BB基因型;對于PCR擴增片段長度為341bp,將其命名為AA基因型;該位點雜合的個體PCR擴增產物為兩條帶,分別為341bp和31 lbp,將其命名為AB基因型;341bp和^lbp, 將其命名為AC基因型;31讓?和^lbp,將其命名為BC基因型。(附圖)。8、統計模型建立
根據中國美利奴羊品系選育的特點,構建線性統計模型如下 Yijkm= μ + Gi+ L , AJGiXLj+ GiXAffl + LjXAffl + e
其中為性狀觀察值,μ為群體性狀均值,G i為基因型固定效應,L j為品系固定效應,Am為年齡效應。GiXLj為基因型和品系互作效應,GiXAm為基因型和年齡互作效應, LjXAm為品系和年齡互作效應,e為隨機誤差。使用統計軟件JMP 4.0 (SAS Institute Inc.,Cary, NC, 2000)檢驗基因型與性狀間的相關程度,并估計性狀的最小二乘均值。本實施例是運用本發明的分子標記選擇方法在中國美利奴(新疆軍墾型)5個品系群體羊毛細度性狀的選擇應用。具體為選用中國美利奴羊(新疆軍墾型)5個品系,共計768只,其中超細型品系 158只,毛用多胎型品系138只,軍墾A型品系167只,軍墾B型品系163只,肉用多胎型品系142只。采集綿羊頸靜脈血液樣本,_20°C保存備用。同時采集綿羊體側部皮膚毛樣,根據國家纖維檢驗標準并參考國際羊毛組織 (IWTO)纖維檢測標準,對綿羊體側部毛樣進行自然長度、細度、細度離散、卷曲度、污毛量、 凈毛率、密度的測定,按照細毛羊鑒定標準測定生產性能。其中,羊毛的細度和卷曲度在農業部種羊及羊毛羊絨質量監督檢驗測試中心(烏魯木齊)檢測。利用本發明的引物(KFl和KRl)對中國美利奴(新疆軍墾型)群體768個個體的基因組DNA進行PCR擴增,然后進行聚丙烯酰胺凝膠電泳分析。KAP1. 1基因的PCR產物經電泳分離得到6種基因型,分別為AA基因型、AB基因型、AC基因型、BB基因型、BC基因型、CC基因型。對KAP1. 1基因60bp和30bp插入/缺失的變異位點的6種基因型在中國美利奴(新疆軍墾型)5個品系群體中的分布進行分析, 結果表明BB基因型個體最多,基因型頻率為0348。(表1)
表1 KAP1. 1基因插入/缺失位點不同基因型在綿羊群體中的分布單位只
9
權利要求
1.一種預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征主要包括以下步驟(1)根據綿羊KAP1.1基因序列設計一對引物KFl: <210>1,KRl: <210>2 ;(2)從綿羊血液中提取基因組DNA,利用該引物對綿羊的基因組DNA進行PCR擴增;(3)使用聚丙烯酰胺凝膠對PCR產物進行電泳分離,檢測出KAP1.1基因外顯子中的 60bp和30bp插入/缺失的變異位點;(4)多態性分析當綿羊KAP1.1基因外顯子缺失60bp時,PCR擴增片段長度為^lbp, 將其命名為CC基因型;當綿羊KAP1. 1基因外顯子缺失30bp時,PCR擴增片段長度為311bp, 將其命名為BB基因型;當綿羊KAP1. 1基因外顯子含有60bp和30bp插入時,PCR擴增片段長度為341bp,將其命名為AA基因型;該位點雜合的個體PCR擴增產物為兩條帶,分別為 341bp和311bp,將其命名為AB基因型;341bp和281bp,將其命名為AC基因型;311bp和 ^lbp,將其命名為BC基因型,具有BB基因型綿羊的平均毛纖維直徑顯著小于具有AA、BC、 AC、AB和CC基因型綿羊的平均毛纖維直徑。
2.如權利要求1所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是 其中用于分析多態性的位點選自綿羊KAP1. 1基因如下序列中的60個和30個堿基的插入 /缺失,1 caaccctcct ctcaacccaa ctcctgacac catggcctgc tgttccacca gcttctgtgg61 atttcccatc tgttccactg gtgggacctg tggctccagt ccctgccagc agacctgctg121 ccagaccagc tgctgccagc caacctccat ccagaccagc tgctgccagc caacttccat181 CCaRaCCaRC tRctRccaac CRa(tctccat CcaRaccaRc tRctRccaRC caa)cctccat241 ccagaccagc tgctgccagc caacctgcct ccagaccagt ggctgtgaga cgggctgtgg301 cattggtggc agcattggct atggccaggt gggtagcagc g,以上序列下劃線部分為60個堿基的插入/缺失,在括號內的劃線部分為30個堿基的插入/缺失。
3.如權利要求1或2所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是其中分析基因多態性的方法是通過檢測堿基的插入/缺失而分類的基因型,其中用于分析基因多態性的部位是外顯子。
4.如權利要求3所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是 其中用于分析基因多態性的部位是由KFl和KRl表示的引物擴增的部分外顯子區。
5.如權利要求1或2所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是其中用于聚丙烯酰胺凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠濃度為1 或14%。
6.如權利要求3所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是 其中用于聚丙烯酰胺凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠濃度為1 或14%。
7.如權利要求4所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是 其中用于聚丙烯酰胺凝膠電泳的丙烯酰胺凝膠濃度為1 或14%。
8.如權利要求1或2所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是所述的PCR擴增退火溫度為65°C。
9.如權利要求4所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是所述的PCR擴增退火溫度為65°C。
10.如權利要求7所述的預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,其特征是所述的PCR擴增退火溫度為65°C。
全文摘要
本發明公開了一種預示和鑒定綿羊毛纖維直徑的分子標記選擇方法,主要包括以下步驟根據綿羊KAP1.1基因序列設計一對引物;從綿羊血液中提取基因組DNA,利用該引物對綿羊的基因組DNA進行PCR擴增;使用聚丙烯酰胺凝膠對PCR產物進行電泳分離,檢測出KAP1.1基因外顯子中的60bp和30bp插入/缺失的變異位點;多態性分析。本發明操作簡單、費用低、精確度高,可進行自動化檢測。利用本發明不僅為綿羊育種工作中標記輔助選擇提供了一個更為有效、簡便易行的分子標記方法,同時為綿羊的細度性狀改良提供了一種有效的分子標記育種手段,可以加速優質細毛羊的育種進程。
文檔編號C12Q1/68GK102363813SQ20111036670
公開日2012年2月29日 申請日期2011年11月18日 優先權日2011年11月18日
發明者馮靜, 劉守仁, 楊華, 楊永林 申請人:新疆農墾科學院
網友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1
主站蜘蛛池模板: 青阳县| 汕尾市| 汉中市| 九江县| 临安市| 阿图什市| 太白县| 肥西县| 元朗区| 汪清县| 鹤山市| 吐鲁番市| 兴化市| 奉新县| 资中县| 阳原县| 分宜县| 丹阳市| 博兴县| 崇阳县| 汉中市| 三原县| 墨竹工卡县| 安义县| 佳木斯市| 浮梁县| 临江市| 望江县| 玉环县| 灌南县| 金堂县| 伊金霍洛旗| 葫芦岛市| 西青区| 杂多县| 乐都县| 务川| 高雄县| 金沙县| 项城市| 夏邑县|