專(zhuān)利名稱(chēng)：一株產(chǎn)木糖醇的酵母菌及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株產(chǎn)木糖醇的酵母菌及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
木糖醇是一種五碳糖醇，在自然界，它存在于許多水果和蔬菜中。木糖醇的甜度是蔗糖的I. 05倍，熱量與蔗糖相當(dāng)，其代謝不需胰島素。因此可作為糖尿病患者食用的甜味齊U。木糖醇不被細(xì)菌發(fā)酵，因此在口香糖中作為甜味劑，不僅有防齲齒的功能，而且在口中有清涼感。此外。木糖醇還有降低肝臟轉(zhuǎn)氨酶和防止呼吸道感染等功能。因此，木糖醇不僅是甜味劑，還可作為一種輔助治療藥物。由于木糖醇在水果和蔬菜中的含量都很低，直接提取困難而不經(jīng)濟(jì)。目前工業(yè)上生產(chǎn)木糖醇采用化學(xué)法，即木糖化學(xué)催化加氫的方法。該方法需要單獨(dú)制氫，在高溫高壓下反應(yīng)，工藝復(fù)雜、安全性差、成本較高，因此，用生物法取代化學(xué)法已成為木糖醇生產(chǎn)的發(fā)展趨勢(shì)。用于發(fā)酵法制備木糖醇的微生物幾乎都是酵母菌，既有自然菌種，也有基因工程菌。自然菌種發(fā)酵以木糖為底物，一部分木糖將用于輔酶再生，理論轉(zhuǎn)化率為O. 887g/g,即
O.875mol木糖醇/mol木糖(厭氧條件下)和O. 917g/g,即O. 905mol木糖醇/mol木糖(半?yún)捬鯒l件下)(Paraj0j C, DOMINGUEZ H, DOMINGUEZ J M. Biotechnological productionof xylitol,Part I. Interest of xylitol and fundamentals of its biosynthesis[J].Biore Technol, 1998,65(3) :191-201.)。基因工程菌發(fā)酵的底物除木糖外，另有其它碳源用于輔酶再生，對(duì)木糖的理論轉(zhuǎn)化率為1.013g/g,即Imol木糖醇/mol木糖。自然菌種的生產(chǎn)水平為轉(zhuǎn)化率O. 56 O. 74克(木糖醇)/克(木糖)，產(chǎn)率O. 2 O. 5克(木糖醇)/升 小時(shí)；基因工程菌的生產(chǎn)水平為轉(zhuǎn)化率可接近理論值，產(chǎn)率O. 6 1.0克(木糖醇)/升 小時(shí)(Leathers FEMS Yeast Research，3133-140，2003)。在木糖醇的生產(chǎn)中，雖然基因工程菌優(yōu)于自然菌種，但需要添加葡萄糖、乙醇、乙酸、甘油等作為輔底物來(lái)再生輔酶，從而提高了成本。無(wú)論是基因工程菌或自然菌種，其綜合生產(chǎn)水平仍不能滿(mǎn)足產(chǎn)業(yè)化的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一株產(chǎn)木糖醇的酵母菌及其應(yīng)用。本發(fā)明所提供的產(chǎn)木糖醇的酵母菌是麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa),其菌株號(hào)為XU316，其在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC No. 5695。該菌種已于2012年I月9日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC)。現(xiàn)有的能培養(yǎng)麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)的培養(yǎng)基均可用于培養(yǎng)麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695，其培養(yǎng)溫度可為24_37°C，培養(yǎng)時(shí)間可為4-48h ;最適培養(yǎng)溫度為28-32°C。培養(yǎng)基中的碳源可為木糖和/或葡萄糖；氮源可為蛋白胨和/或酵母提取物和/或牛肉膏和/或玉米漿和/或銨鹽。 將麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695固定后得到的固定化酵母細(xì)胞也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695或其固定化酵母細(xì)胞在將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種低成本且具有較高產(chǎn)率的木糖醇生產(chǎn)方法。本發(fā)明所提供的木糖醇生產(chǎn)方法，以含木糖的物質(zhì)作為反應(yīng)底物，利用麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695或其固定化酵母細(xì)胞將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇。所述含木糖的物質(zhì)不限于下述I)-3)，還可包括其它含木糖的液體1)木糖溶液；2)木糖母液；3)含半纖維素物質(zhì)的水解物，所述含半纖維素物質(zhì)的水解物中含有木糖。
木糖母液是木糖生產(chǎn)過(guò)程中木糖結(jié)晶后殘留的含糖液體，其主要成分為木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖等。含半纖維素物質(zhì)包括(但不限于)玉米芯、甘蔗渣、碎木、木屑、各種秸桿、米糠等。所述水解物包括酸水解物、酶水解物以及酸酶聯(lián)合水解物。上述方法還可包括如下步驟麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCCNo. 5695或其固定化酵母細(xì)胞按照如下配比接入所述含木糖的物質(zhì)的水溶液中0. 3-0. 5g干細(xì)胞/克木糖(其中木糖濃度為50-250g/L)。其中，所述將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇的反應(yīng)溫度可為為25°C _40°C，如30°C -35°C、30°C*35°C。所述將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇的反應(yīng)時(shí)間可為12-500小時(shí)，如52-480小時(shí)、52-66小時(shí)、52小時(shí)、66小時(shí)、65小時(shí)或480小時(shí)。本發(fā)明的麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695不僅能用純木糖為原料生產(chǎn)木糖醇，還能利用木糖生產(chǎn)過(guò)程中的水解液作為主要原料生產(chǎn)木糖醇。轉(zhuǎn)化率可接近理論值，最高達(dá)O. 90克(木糖醇)/克(木糖)，產(chǎn)率最高可達(dá)3克(木糖醇)/升·小時(shí)以上，木糖醇濃度最高可達(dá)200克/升以上，可使生產(chǎn)成本大幅度降低，具有很好的應(yīng)用前景。下面結(jié)合具體實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明，這些實(shí)施例用于理解而不是限制本發(fā)明。保藏說(shuō)明菌種名稱(chēng)麥芽糖假絲酵母拉丁名Candidamaltosa菌株編號(hào)XU316保藏機(jī)構(gòu)中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏機(jī)構(gòu)簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC地址北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)保藏日期2012年01月09日保藏中心登記入冊(cè)編號(hào)CGMCC No. 569具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中的方法如無(wú)特別說(shuō)明均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例3-5中的木糖和木糖醇均按照如下方法測(cè)定儀器為HPLC(Waters,USA)，色譜柱為 Aminex HPX_87H(BioRad，CA, USA)，檢測(cè)器為 RI08X detector (Waters,USA)。流動(dòng)相為5mM H2SO4水溶液，流速0.6ml/min，柱溫為60°C。以外標(biāo)法定量測(cè)定木糖和木糖醇的濃度。采用的木糖標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自sigma公司，純度> 99%，采用的木糖醇標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自sigma公司，純度> 99%。在該色譜條件下,木糖標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間是10. 627分鐘，木糖醇標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間是13. 293分鐘。在該色譜條件下，木糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線是y =1452. 004x，其中y為峰面積，X為濃度，其單位是g/L，進(jìn)樣量為IOul ;木糖醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線是I = 1538. 614x，其中y為峰面積；x為濃度，其單位是g/L，進(jìn)樣量為IOul。下述實(shí)施例4-5中的葡萄糖和阿拉伯糖均按照如下方法測(cè)定儀器為HPLC(Waters, USA),色譜柱為 Aminex HPX_87H(BioRad，CA, USA),檢測(cè)器為 RI08Xdetector (Waters, USA)。流動(dòng)相為5mM H2SO4水溶液,流速O. 6ml/min,柱溫為60°C。以外標(biāo)法定量測(cè)定葡萄糖和阿拉伯糖的濃度。采用的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自sigma公司，純度> 99%，采用的阿拉伯糖標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自sigma公司，純度> 99%。在該色譜條件下，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間是9. 898分鐘，阿拉伯糖標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間是11. 689分鐘。在該色譜條件下，葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線是y= 1359. 440x,其中y為峰面積,X為濃度,其單位是g/L,進(jìn)樣量為IOul ；阿拉伯糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線是y= 1490. 792x，其中y為峰面積，X為濃度，其單位是g/L，進(jìn)樣量為 IOul。
下述實(shí)施例5中的總糖使用糖度計(jì)測(cè)定(折光法)。實(shí)施例I、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695的分離及鑒定I、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695 的分離麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695是從中國(guó)北京地區(qū)含木材腐爛物的樣品中提取、分離、篩選、純化得到的。具體的方法如下用無(wú)菌水浸泡樣品，過(guò)濾除去不溶物，涂布于含木糖的固體平板培養(yǎng)基中，至于30°C溫箱中培養(yǎng)至長(zhǎng)出單菌落，對(duì)單菌落逐個(gè)進(jìn)行木糖轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，選取性狀優(yōu)良的菌株，得到麥芽糖假絲酵母(Candidamaltosa)XU316CGMCC No. 5695。2、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695 的鑒定麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695，菌株呈卵形、橢圓形、柱形，大小為2-5. 5X3. 5-12 μ m，有菌環(huán)和醭膜形成；有假菌絲產(chǎn)生；菌落奶酪狀、乳白色，表面平滑至粗糙，不反光，邊緣樹(shù)根狀或流蘇狀。PCR擴(kuò)增26SrDNA/Dl，D2序列，所用的PCR引物為上游 GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG，下游 GGTCCGTGTTTCAAGACGG ;擴(kuò)增到的序列為序列表中的序列I。實(shí)施例2、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695的細(xì)胞培養(yǎng)麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695保存于麥芽汁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基組成為麥芽提取物100g/L，瓊脂20g/L，溶劑為水。用Yro液體培養(yǎng)基培養(yǎng)麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692，培養(yǎng)基組成為酵母提取物10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖50g/L，溶劑為水，pH為5. O。培養(yǎng)方法如下接一環(huán)斜面菌種于250ml三角搖瓶中，內(nèi)裝50ml液體培養(yǎng)基，置于旋轉(zhuǎn)搖床上，于30°C、250rpm培養(yǎng)過(guò)夜至飽和作為一級(jí)種子。按10% (體積比)接種量轉(zhuǎn)一級(jí)種子于500ml液體培養(yǎng)基中，分裝于5只500ml三角搖瓶中，每瓶IOOml培養(yǎng)基，于30°C、250rpm培養(yǎng)過(guò)夜至飽和作為二級(jí)種子。按10% (體積比)接種量轉(zhuǎn)二級(jí)種子于3000ml液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基置于6L NBS BI0FL0 III自控臺(tái)式發(fā)酵罐中，并加0. 3ml聚醚類(lèi)消泡劑，培養(yǎng)條件如下攪拌轉(zhuǎn)速為500rpm、溫度為30°C、通氣量為
0.5vvm、溶氧控制在30%以上，培養(yǎng)時(shí)間為9小時(shí)至溶氧回升，細(xì)胞干重為100g/L發(fā)酵液。細(xì)胞干重測(cè)定方法如下取IOml發(fā)酵液以13000rpm離心5分鐘，棄上清，IOml水洗一次，同樣離心，棄上清，90°C烘箱烘干至恒重，測(cè)定重量后折算為每L發(fā)酵液的干重。培養(yǎng)結(jié)束后用Backman J2-HS離心機(jī)收集細(xì)胞，離心條件為6管(每管500ml)，轉(zhuǎn)速5000rpm，時(shí)間30分鐘。離心后棄上清，細(xì)胞用于木糖轉(zhuǎn)化。實(shí)施例3、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695轉(zhuǎn)化木糖水溶
液生產(chǎn)木糖醇。I、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No. 5695細(xì)胞單次轉(zhuǎn)化木糖水溶液生產(chǎn)木糖醇稱(chēng)取600g木糖(購(gòu)自山東福田藥業(yè)有限公司，純度> 99% )溶解于水中，定溶于3L，配成木糖水溶液用于細(xì)胞轉(zhuǎn)化。將該3L木糖水溶液置于6L NBS BIOFLO III自控臺(tái)式發(fā)酵罐中，將實(shí)施例2中用I. 8L發(fā)酵液收集的麥芽糖假絲酵母XU316CGMCCNO. 5692細(xì)胞重懸于木糖水溶液中，使麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692細(xì)胞與木糖水溶液中木糖的配比為O. 3g干細(xì)胞/克木糖，進(jìn)行木糖的細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。轉(zhuǎn)化條件如下溫度為30°C、攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm、通氣量為O. 05vvm,反應(yīng)于57小時(shí)結(jié)束,取樣,每管Iml于臺(tái)式離心機(jī)中以13000rpm離心5分鐘，上清液用于測(cè)定木糖和木糖醇濃度。上述實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果表明轉(zhuǎn)化反應(yīng)57小時(shí)的木糖醇濃度為170. 5g/L，木糖濃度為8. 2g/L，消耗的木糖為191. 8g/L，轉(zhuǎn)化率O. 89克(木糖醇)/克(木糖)，產(chǎn)率為3克(木糖醇)/升·小時(shí)。其中，上述上清液中木糖的保留時(shí)間是10. 630分鐘，木糖醇的保留時(shí)間是13. 295分鐘。2、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695細(xì)胞重復(fù)轉(zhuǎn)化木糖水溶液生產(chǎn)木糖醇稱(chēng)取600g木糖(購(gòu)自山東福田藥業(yè)有限公司，純度> 99% )溶解于水中，定溶于3L，配成木糖水溶液用于細(xì)胞轉(zhuǎn)化。將該3L木糖水溶液置于6L NBS BIOFLO III自控臺(tái)式發(fā)酵罐中，將實(shí)施例2中用I. 8L發(fā)酵液收集的麥芽糖假絲酵母XU316CGMCCNO. 5692細(xì)胞重懸于木糖水溶液中，使麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692細(xì)胞與木糖水溶液中木糖的配比為O. 3g干細(xì)胞/克木糖，進(jìn)行木糖的細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。轉(zhuǎn)化條件如下溫度為30°C、攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm、通氣量為O. 05vvm，反應(yīng)于57小時(shí)結(jié)束。轉(zhuǎn)化反應(yīng)結(jié)束后，用Backman J2-HS離心機(jī)離心分離反應(yīng)液的清液和細(xì)胞，離心條件為6管(每管500ml)，轉(zhuǎn)速5000rpm，時(shí)間30分鐘。上清液用于分離純化木糖醇，細(xì)胞再按照步驟I的方法用于木糖水溶液的生物轉(zhuǎn)化，除轉(zhuǎn)化反應(yīng)時(shí)間不同外，其它條件均與步驟I的轉(zhuǎn)化反應(yīng)條件相同。細(xì)胞共重復(fù)轉(zhuǎn)化9次，重復(fù)使用9次，其中第6、8次轉(zhuǎn)化分別補(bǔ)加150g木糖，作為反應(yīng)底物的木糖共計(jì)5700克，累計(jì)消耗木糖5409克，生成木糖醇4599克，共用時(shí)480小時(shí)，細(xì)胞仍具有轉(zhuǎn)化能力。9次的平均轉(zhuǎn)化率為O. 85 (木糖醇)/克(木糖)，平均產(chǎn)率為3. 2克(木糖醇)/升·小時(shí)，平均木糖醇濃度170g/L。其中，第2-9次的轉(zhuǎn)化反應(yīng)時(shí)間分別為50、48、50、53、54、55、56和57小時(shí)。3、上清液中木糖醇的提取。將步驟2中得到的含有木糖醇的上清液(共含木糖醇610g)，用氫型732強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂除去上清液中的陽(yáng)離子，再用氫氧根型D-301R弱堿型陰離子交換樹(shù)脂除去上清液中的陰離子，使上清液PH為5. 5-6. 5。用中空纖維超濾器對(duì)除離子后的上清液進(jìn)行超濾除去大分子，超濾膜平均截留分子量為5000。用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器濃縮去除離子和大分、子的反應(yīng)液，溫度為55°C，濃縮至木糖醇濃度為753g/L。把濃縮液置于燒杯中，用程序降溫儀緩慢降溫并緩慢攪動(dòng)液體，降溫速度為2V /小時(shí)，至出現(xiàn)晶體，繼續(xù)緩慢攪拌至降溫到18°C，再攪拌I小時(shí)，使結(jié)晶充分。用布氏漏斗真空抽濾分離晶體和母液，勁量抽干，于40°C干燥后得到木糖醇晶體385g。母液與另一次上清液合并濃縮后再結(jié)晶。實(shí)施例4、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695轉(zhuǎn)化玉米芯水解液生產(chǎn)木糖醇。將玉米芯與1% (質(zhì)量百分含量)稀硫酸按I : 5的質(zhì)量比混合，在120_130°C保溫2-3小時(shí)水解后，通過(guò)中和脫酸、活性炭脫色、減壓蒸發(fā)濃縮、經(jīng)離子交換脫離子后得到玉米芯水解液。該水解液含木糖160g/L、葡萄糖16g/L、阿拉伯糖15g/L，不含木糖醇。將該3L玉米芯水解液置于6L NBS BIOFLO III自控臺(tái)式發(fā)酵罐中，將實(shí)施例2中用I. 8L發(fā)酵液收集的麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692細(xì)胞重懸于3L玉米芯水解液中，使麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692細(xì)胞與玉米芯水解液中木糖的配比為O. 375g干細(xì)胞/克木糖，進(jìn)行木糖的細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。轉(zhuǎn)化條件如下:溫度為25°C、攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm、通氣量為
O.05vvm,反應(yīng)于52小時(shí)結(jié)束,取樣，每管Iml于臺(tái)式離心機(jī)中以13000rpm離心5分鐘,上清液用于測(cè)定木糖、木糖醇、葡萄糖和阿拉伯糖濃度。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果表明轉(zhuǎn)化反應(yīng)52小時(shí)，木糖醇濃度為135. 3g/L，木糖濃度為9. 2g/L，消耗的木糖為150. 8g/L，葡萄糖濃度為
O.15g/L，阿拉伯糖濃度14. 5g/L，轉(zhuǎn)化率O. 90克(木糖醇)/克(木糖)，產(chǎn)率為2. 6克(木糖醇)/升 小時(shí)。其中，上述上清液中木糖的保留時(shí)間是10. 629分鐘，木糖醇的保留時(shí)間是13. 296分鐘，葡萄糖的保留時(shí)間是9. 901分鐘，阿拉伯糖的保留時(shí)間是11. 690分鐘。實(shí)施例5、麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa) XU316CGMCC No. 5695轉(zhuǎn)化木糖母液生產(chǎn)木糖醇。木糖母液是木糖生產(chǎn)中將木糖結(jié)晶液通過(guò)固液分離分出晶體木糖后的廢棄液體，顏色為深褐色，總糖為660g/L，其中含木糖340g/L、葡萄糖150g/L、阿拉伯糖170g/L，不含木糖醇。用水將母液稀釋一倍，加3% (W/V)的活性碳60°C脫色2小時(shí)，過(guò)濾除去活性炭，得到處理后木糖母液。處理后木糖母液中含木糖165gL、葡萄糖70g/L、阿拉伯糖82g/L。將實(shí)施例2中用I. 8L發(fā)酵液收集的麥芽糖假絲酵母XU316CGMCCNO. 5692細(xì)胞重懸于3L處理后木糖母液(含木糖165g/L)中，使麥芽糖假絲酵母XU316CGMCC No. 5692細(xì)胞與處理后木糖母液中木糖的配比為O. 364干細(xì)胞/克木糖，進(jìn)行木糖的細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。轉(zhuǎn)化條件如下溫度為35°C、攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm、通氣量為O. 05vvm，反應(yīng)于65小時(shí)結(jié)束，取樣，每管Iml于臺(tái)式離心機(jī)中以13000rpm離心5分鐘，上清液用于測(cè)定木糖、木糖醇、葡萄糖和阿拉伯糖濃度。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果表明木糖醇濃度為136. 7g/L，木糖濃度為10. lg/L，消耗的木糖為154. 9g/L，葡萄糖濃度為O. 21g/L，阿拉伯糖濃度81. lg/L,轉(zhuǎn)化率為O. 88克(木糖醇)/ 克(木糖)，產(chǎn)率為2. I克(木糖醇)/升·小時(shí)。其中，上述上清液中木糖的保留時(shí)間是10. 631分鐘，木糖醇的保留時(shí)間是13. 298分鐘，葡萄糖的保留時(shí)間是9. 897分鐘，阿拉伯糖的保留時(shí)間是11.691分鐘。
權(quán)利要求
1.麥芽糖假絲酵母(Candidamaltosa),其特征在于所述麥芽糖假絲酵母的菌株號(hào)為 XU316，保藏編號(hào)為 CGMCC No. 5695。
2.固定化酵母細(xì)胞，其特征在于所述固定化酵母細(xì)胞為固定化權(quán)利要求I所述的麥芽糖假絲酵母細(xì)胞。
3.權(quán)利要求I所述的麥芽糖假絲酵母或權(quán)利要求2所述的固定化酵母細(xì)胞在將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇中的應(yīng)用。
4.一種制備木糖醇的方法，其特征在于所述方法以含木糖的物質(zhì)作為反應(yīng)底物，利用權(quán)利要求I所述的麥芽糖假絲酵母或權(quán)利要求2所述的固定化酵母細(xì)胞將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇；所述含木糖的物質(zhì)選自下述I)-3)中的至少一種1)木糖溶液；2)木糖母液；3)含半纖維素物質(zhì)的水解物，所述含半纖維素物質(zhì)的水解物中含有木糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述含半纖維素物質(zhì)的水解物選自以下至少一種物質(zhì)玉米芯水解物、甘蔗渣水解物、木屑水解物和秸桿水解物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于所述將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇的反應(yīng)溫度為 25°C -40°C，如 30°C -35°C、30°C或 35°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于所述將木糖轉(zhuǎn)化為木糖醇的反應(yīng)時(shí)間為12-500小時(shí)，如52-480小時(shí)、52-66小時(shí)、52小時(shí)、66小時(shí)、65小時(shí)或480小時(shí)。
8.權(quán)利要求I所述的麥芽糖假絲酵母或權(quán)利要求2所述的固定化酵母細(xì)胞在制備木糖醇中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一株產(chǎn)木糖醇的酵母菌及其應(yīng)用。本發(fā)明的麥芽糖假絲酵母(Candida maltosa)XU316CGMCC No.5695不僅能用純木糖為原料生產(chǎn)木糖醇，還能利用木糖生產(chǎn)過(guò)程中的水解液作為主要原料生產(chǎn)木糖醇。轉(zhuǎn)化率可接近理論值，達(dá)0.90克(木糖醇)/克(木糖)，產(chǎn)率最高可達(dá)3克(木糖醇)/升·小時(shí)以上，木糖醇濃度最高可達(dá)200克/升以上，可使生產(chǎn)成本大幅度降低，具有很好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C12P19/02GK102634463SQ20121007978
公開(kāi)日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月23日
發(fā)明者盧大軍, 江寧, 沈安, 賀鵬, 郭長(zhǎng)纓 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所