專利名稱：一種發酵液中游離細胞的提取工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種發酵液中游離細胞的提取工藝。
背景技術：
微生物法丙烯酰胺發酵生產過程主要培養的是一種諾卡氏放線菌，在發酵罐培養達到預期的生物量、酶活力后，需對發酵液進行分離清洗，將發酵液中的諾卡氏放線菌提取出來，送到水合工段，作為催化劑參與水合反應。傳統工藝采用將發酵液與一定比例海藻膠混合造粒，形成固定化細胞催化劑，此種方法細菌的利用率低?，F較多的采用游離細胞直接水合反應，提高細菌的利用率。因此游離細胞的分離提取成為此技術的關鍵，一般工藝采用發酵液中添加一定量的絮凝沉降劑，使發酵液中的細菌沉降下來，然后再將沉降下來的菌泥加水反復清洗，此種工藝的缺點是發酵液中的機械雜質及一些有機物與細菌分離不清，造成雜質帶入后道水合反應工序。
發明內容
本發明的目的在于克服上述現有技術的不足，本工藝將機械過濾加離心分離加微濾膜過濾清洗耦合，提供一種發酵液中游離細胞的提取工藝。為了解決上述技術問題，本發明的技術方案為一種發酵液中游離細胞的提取工藝，其特征包括以下步驟
1)將丙烯酰胺發酵液經過機械過濾器采用濾布過濾，去除發酵液中大顆粒的機械雜質和未消耗的不溶性物質，機械雜質去除率> 99. 9% ；2)采用高速碟片式離心機對過濾后的發酵液進行清洗分離，控制分離速度I.5t/h，排
渣
周期為4min，除去發酵液中殘留的未消耗的有機、無機可溶性營養物質，離心后得到菌
液；
3)上述菌液經過真空微濾纖維膜清洗，以純水為清洗劑，體積比為10:1，反復清洗2^3次，去除殘留的小分子可溶性無機、有機營養物質及不溶物，得到純凈的游離菌體，電導率彡50Us/cm、色度彡10 Hazen，雜質去除率彡99. 99%，整個過程游離細菌回收率彡99%。進一步地，所述的機械過濾器濾膜材料為621號絨濾布復合一層200目尼龍濾布。本發明的優點在于本工藝采取機械過濾加離心分離加微濾膜過濾清洗耦合工藝，能夠得到純凈的游離菌體，清洗合格的游離菌體電導率< 50Us/cm、色度< 10 Hazen、雜質去除率> 99. 99%，整個過程游離細菌回收率> 99%。
具體實施例方式以下實施例僅為了進一步說明本發明，并不限制本發明的內容。首先將含有諾卡氏放線菌的發酵液經機械過濾器過濾，過濾采用621號絨濾布再復合一層200目的尼龍濾布有效去除發酵液中大顆粒機械雜質及殘留的未消耗的不溶性物質，機械雜質去率> 99. 9%，除然后用一種5800轉/分高速碟片離心機(TID313型)對過濾后的發酵液進行清洗分離，控制分離速度I. 5t/h，一個分離排渣周期為4分鐘，此過程中去除了 99%的發酵液中殘留的未消耗的有機、無機可溶性營養物，再將此離心后的菌液用一種真空微濾纖維膜清洗，以純水為清洗劑，體積比為10:1 反復清洗2 3次，去除殘留的小分子的可溶性無機、有機營養物質及不溶物。經此工藝處理后我們得到純凈的游離菌體電導率彡50Us / cm、色度彡10 Hazen，雜質去除率>99. 99%，整個過程游離細菌回收率彡 99%o
其中，621號絨濾布，出自天津正中織物；200目的尼龍濾布，出自天津正中織物。
權利要求
1.一種發酵液中游離細胞的提取工藝，其特征包括以下步驟 1)將含有諾卡氏放線菌的發酵液經過機械過濾器采用濾布過濾，去除發酵液中大顆粒 的機械雜質和未消耗的不溶性物質，機械雜質去除率> 99. 9% ； 2)采用高速碟片式離心機對過濾后的發酵液進行清洗分離，控制分離速度I.5t/h，排渣周期為4min，除去發酵液中殘留的未消耗的有機、無機可溶性營養物質，離心后得到菌液； 3)上述菌液經過真空纖維微濾膜清洗，以純水為清洗劑，體積比為10:1，反復清洗2^3次，去除殘留的小分子可溶性無機、有機營養物質及不溶物，得到純凈的游離菌體，電導率彡50Us/cm、色度彡lOHazen，雜質去除率彡99. 99%，整個過程游離細菌回收率彡99%。
2.根據權利要求I所述的一種發酵液中游離細胞的提取工藝，其特征在于所述的濾布材料為621號絨濾布復合一層200目尼龍濾布。
全文摘要
本發明公開了一種發酵液中游離細胞的提取工藝,首先將含有諾卡氏放線菌的發酵液經過機械過濾器過濾除大顆粒機械雜質，再經過碟片式離心機與真空微濾纖維膜過濾除無機、有機營養物質及不溶物。本發明的有益效果為本工藝采取機械過濾加離心分離加微濾膜過濾清洗耦合工藝，能夠得到純凈的游離菌體，清洗合格的游離菌體電導率≤50Us/cm、色度≤10Hazen、雜質去除率≥99.99%，整個過程游離細菌回收率≥99%。
文檔編號C12R1/365GK102776141SQ20121025162
公開日2012年11月14日 申請日期2012年7月20日 優先權日2012年7月20日
發明者丁建華, 曹艷, 楊濤, 沈瑞華, 熊光輝, 錢小方, 陸煌生, 顧稀平 申請人:江蘇南天農科化工有限公司