專利名稱：一株赤霉菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種赤霉菌，尤其涉及可用于制備重金屬納米級(jí)材料的赤霉菌。
背景技術(shù)：
以前工業(yè)上主要采用化學(xué)方法合成納米銀，但近年來國外已開始探索綠色、環(huán)境友好型的生物制備方法及工藝，用真菌、海藻等合成納米銀并進(jìn)行工業(yè)化應(yīng)用研究(Carbohydrate Polymers,2012,90:915-920, Nanomedicine: Nanotechnology, Biologyand Medicine, 2010, 6: 103-109)
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備重金屬納米級(jí)材料的赤霉菌，其合成納米銀的方法及工藝綠色無污染。本發(fā)明的目的是通過以下措施實(shí)現(xiàn)的一種赤霉菌，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2012524。保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。上述赤霉菌，分類命名為Gibberella sp.。自命名為赤霉菌1210-2株。形態(tài)特點(diǎn)在光學(xué)顯微鏡下可見菌絲彎曲、細(xì)長(zhǎng)有分支，無隔，表面光滑。生理理化特點(diǎn)在PDA瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落呈白色絨毛狀，菌體呈淡黃色。本發(fā)明的赤霉菌Gibberella sp.的保藏時(shí)間是2012年12月11日。有益效果1.本發(fā)明的赤霉菌菌株的次生代謝產(chǎn)生物能還原銀離子，產(chǎn)生的納米銀可以在水中自主分散，常溫下穩(wěn)定。2.本發(fā)明所合成的納米銀對(duì)真菌和細(xì)菌有抑制活性。3.本發(fā)明可用于制備其它重金屬納米級(jí)材料。4.本發(fā)明可對(duì)醫(yī)院等行業(yè)含銀、金、鎘、鋯等重金屬廢物作無害化處理并對(duì)其再生利用。


圖1為實(shí)施例2的赤霉素1210-2株還原納米銀的效果圖。圖2為實(shí)施例2的赤霉素1210-2株還原的納米銀的掃描電鏡照片(8萬倍)。圖3為實(shí)施例3的抑制新薩托菌的效果圖。圖4為實(shí)施例3的抑制鏈格孢菌的效果圖。圖5為實(shí)施例3的抑制產(chǎn)毒性大腸桿菌的效果圖。圖6為實(shí)施例3的抑制金黃色葡萄球菌的效果圖。圖7為實(shí)施例3對(duì)四種菌抑菌圈(直徑)的直方圖。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明不局限于這些實(shí)施例。實(shí)施例1本發(fā)明赤霉菌1210-2株的培養(yǎng)條件本發(fā)明赤霉菌1210-2株用PDA培養(yǎng)基于28°C培養(yǎng)。液體培養(yǎng)時(shí)搖床轉(zhuǎn)速為180
轉(zhuǎn)/分鐘。PDA液體培養(yǎng)基配方200g去皮馬鈴薯，切成IcmX Icm方塊，煮30min，紗布過濾取濾液，加入20g葡萄糖，15g的瓊脂，加去離子水至1000ml, ρΗ7· 0-7. 2。121°C處理30分鐘后，待用。
PDA固體培養(yǎng)基配方在液體培養(yǎng)中加入3%細(xì)菌培養(yǎng)用瓊脂粉，121°C處理30分鐘，待用。實(shí)施例2本發(fā)明赤霉菌1210-2株合成納米銀的實(shí)驗(yàn)。取凍存的赤霉菌1210-2株在PDA固體培養(yǎng)基上劃線接種，在28°C培養(yǎng)3天，接菌絲接種于5-10 ml PDA液體培養(yǎng)基，在28°C培養(yǎng)2天，按1%接種到大容量培養(yǎng)瓶中，180轉(zhuǎn)/分鐘培養(yǎng)7天，收集菌絲體。用去離水洗滌3次，將菌絲體懸浮于去離子水中(30g/ml)于40°C放置7天，過濾去除菌絲體，收集溶液加入硝酸銀溶液至終濃度為lmmol/L，于40°C放置48小時(shí)，期間每4小時(shí)攪拌2分鐘。離心收集納米銀，用去離子水洗滌3次以去除雜質(zhì)。用去離子水懸浮至適當(dāng)濃度或干燥后保存。赤霉菌1210-2株的次生代謝產(chǎn)生物能還原銀離子，產(chǎn)生的納米銀可以在水中自主分散，常溫下穩(wěn)定。圖1中左側(cè)試管為加入硝酸銀前的赤霉菌1210-2株的次生代謝產(chǎn)物溶液，右側(cè)為加入硝酸銀48小時(shí)后的納米銀溶液，溶液呈黃褐色，隨合成納米銀濃度的升高而加深。圖2為赤霉菌1210-2株還原的納米銀的掃描電鏡照片(8萬倍)。將納米銀溶液加在硅片上，在65°C干燥過夜。在掃描電鏡下下可見納米銀形狀多樣，多棱角，大小為40-50nm0根據(jù)目前對(duì)生物法制備納米金屬材料原理的認(rèn)識(shí)及應(yīng)用研究，即某些還原性酶類可將金、銀、鎘、鋯等重金屬離子還原形成納米粒子，甚至在多種金屬離子同時(shí)存在時(shí)形成合金性納米粒子(App Microbiol biotechnol, 2006, 69:458-492)。本發(fā)明的赤霉菌對(duì)銀以外的其它重金屬(如金離子、鎘離子和鋯離子等)也有還原作用，形成納米粒子。實(shí)施例3本發(fā)明所合成的納米銀對(duì)真菌和細(xì)菌有抑制活性。實(shí)驗(yàn)步驟將新薩托菌和鏈格孢菌涂布于PDA固體培養(yǎng)基，產(chǎn)毒性大腸桿菌和金黃色葡萄球菌涂布接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，在四個(gè)培養(yǎng)平板中各放一張滅菌的濾紙，在濾紙上加實(shí)施例2中產(chǎn)生的納米銀溶液5 μ I (含IOOng納米銀)，真菌在28°C培養(yǎng)4天，細(xì)菌在37°C培養(yǎng)24小時(shí)后，拍照并測(cè)定抑菌圈的直徑。抑菌圈大小如圖3-圖7所示。說明赤霉菌1210-2株的代謝產(chǎn)物能將銀酸銀還原成大小約40-50 nm的納米銀，且所得納米銀具有廣泛的抗菌活性。
權(quán)利要求
1.一種赤霉菌，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2012524。
2.如權(quán)利要求1所述的赤霉菌制備重金屬納米級(jí)材料的用途。
3.如權(quán)利要求1所述的赤霉菌制備納米銀的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供一種赤霉菌，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCCNOM2012524。本發(fā)明的赤霉菌菌株的次生代謝產(chǎn)生物能還原銀離子，產(chǎn)生的納米銀可以在水中自主分散，常溫下穩(wěn)定，合成的納米銀對(duì)真菌和細(xì)菌有抑制活性。本發(fā)明可對(duì)醫(yī)院等行業(yè)的含銀廢液作無害化處理并再生利用。
文檔編號(hào)C12P3/00GK103013842SQ20121057913
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月27日
發(fā)明者杜華茂, 鄧亞平, 秦小旋, 代虎, 楊銳 申請(qǐng)人:西南大學(xué)