一種天然海產品保鮮劑及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種海產品保鮮劑，其包含乳酸鏈球菌素(Nisin)，柑橘幼果提取物，冰醋酸和水。本發明還提供保鮮劑的制備方法和應用。本發明的保鮮劑能夠有效起到抑菌，抗氧化和抑制蛋白分解作用，對海產品保鮮具有良好的效果，尤其是應用于微凍和常溫保鮮，可大大延長保鮮貯藏期。確保水產品在保鮮期內保持原有品質，從而有效的保證了產品的質量。
【專利說明】一種天然海產品保鮮劑及其制備方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及一種海鮮保鮮劑，屬于海產品保鮮領域，特別涉及一種天然海產品保鮮劑及其制備方法。

【背景技術】
[0002]海鮮產品含有豐富的蛋白質和多種不飽和脂肪酸，水分含量高，在保存的過程中易發生脂肪氧化和微生物滋生，在一般條件下很易被腐敗性微生物分解而變質。比如鍉魚因為其體內含有活力很高的酶，在短短的幾天甚至幾個小時內就會因自溶而腐爛掉。近年來，我國海水養殖產業發展迅速，以鮮活銷售為主的方式已經不能適應其產量快速增長的狀況。利用冰藏或凍藏進行海水養殖魚貝類的保鮮，意義重大。然而魚貝類在低溫貯藏期間仍會發生一系列的變化，這些變化嚴重影響著魚貝肉的鮮度和食用品質。保鮮就是制約海鮮產業發展的主要因素之一。
[0003]目前，國內外常用的水產品保鮮技術主要有低溫保鮮、化學保鮮、氣調保鮮和輻照保鮮等。物理保鮮方法的成本昂貴、局限性大，隨著人們環保意識的提高與保鮮技術的發展，化學保鮮的安全性也逐漸引起人們的擔憂，一些以天然無毒的生物保鮮劑為原料進行的生物保鮮技術逐漸引起人們的關注，并開始應用于水產品的加工、貯藏、運輸與消費過程中。天然生物保鮮劑對水產品進行保鮮可以減少化學合成殺菌劑對人類健康的不良影響，并有效防止病原菌的抗藥性。被認為是食品添加劑研究領域最有前景的發展方向，是開發新型高效海鮮生物防腐保鮮劑的重要途徑。
[0004]乳酸鏈球菌素(Nisin)是目前國際上允許商業化生產的高效、無毒、安全、無副作用的天然食品防腐劑。其具有極強的殺菌能力，可殺滅許多革蘭氏陽性細菌，但是革蘭氏陰性細菌效果不明顯(Boziaris 1.S.，Adams M.R.Effect of chelators and nisinproduced in situ on inhibit1n and inactivat1n of Gram egatives.1nternat1nalJournal of Food Microb1logy, 1999 (53): 105-113)。目前常用天然食品防腐劑配方是將其與其他抗菌化學物質結合，擴大抑菌范圍。
[0005]黃酮類化合物(參見，姚新生，天然藥物化學，第二版，人民衛生出版社，1994:191-192;延璽等，黃酮類化合物生理活性及合成研究進展，有機化學，2008, 28 (9)，1534-1544)具有多種生物活性，具有多種藥用價值。例如心血管系統、抗腫瘤、抗氧化自由基、抗炎和鎮痛、保肝等活性。此外，還具有降壓、降血脂、抗衰老、提高機體免疫力、瀉下、鎮咳、祛痰、解痙及抗變態等藥理活性。同時黃酮類化合物的對多種細菌和病毒都具有活性，因而可以將其作為食品添加劑(李葉等，黃酮類化合物抑菌作用的研究進展，農產品加工，2008，(12) ,53-55)。


【發明內容】

[0006]本發明的目的是提供一種天然海產品保鮮劑的制備方法。
[0007]本發明通過如下技術方案實現:
[0008]一種保鮮劑，其特征在于:所述保鮮劑包含乳酸鏈球菌素(Nisin)，黃酮類化合物和乙酸水溶液。
[0009]根據本發明，所述黃酮類化合物的含量為170-210mg/g，優選為180_200mg/g，以保鮮劑的總重量計。
[0010]根據本發明，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)在保鮮劑中的重量百分比為0.01%?0.3%,優選 0.01% ?0.1%。
[0011]根據本發明，所述黃酮類化合物由柑橘幼果提取物提供，即，所述黃酮存在于提取柑橘幼果獲得的柑橘幼果提取物中。
[0012]黃酮類化合物包括:黃酮和黃酮醇；黃烷酮(又稱二氫黃酮)和黃烷酮醇(又稱二氫黃酮醇);異黃酮；異黃烷酮(又稱二氫異黃酮);查耳酮；二氫查耳酮；橙酮(又稱澳咔);黃烷和黃烷醇；黃烷二醇(3，4)(又稱白花色苷元)。
[0013]黃酮類化合物存在于大多數的植物中，可通過植物提取獲得，例如槐米提取物中的蘆丁，陳皮提取物中的陳皮苷，銀杏葉提取物中的黃酮和雙黃酮，柑橘幼果提取物。
[0014]根據本發明，所述柑橘幼果提取物在保鮮劑中的重量百分比為:0.02%?0.4%，優選 0.05% ?0.1%。
[0015]一種保鮮劑，其特征在于:所述保鮮劑包含乳酸鏈球菌素(Nisin)，柑橘幼果提取物和乙酸水溶液。
[0016]根據本發明，所述乙酸水溶液中的乙酸由冰醋酸提供。
[0017]根據本發明，所述保鮮劑還包含水。
[0018]根據本發明，優選地，所述保鮮劑由乳酸鏈球菌素(Nisin)，柑橘幼果提取物，冰醋酸和水組成。
[0019]根據本發明，所述保鮮劑用于海產品保鮮，優選地用于天然海產品保鮮。
[0020]根據本發明，所述海產品包括本領域公知的海產品，例如包括海鰻，海蟹，鯧鳊魚和海白蝦等。
[0021]根據本發明，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)在保鮮劑中的重量百分比為0.01%?0.3%,優選 0.01% ?0.1%。
[0022]根據本發明，所述柑橘提取物在保鮮劑中的重量百分比為:0.02%?0.4%，優選0.05% ?0.1%。
[0023]根據本發明，所述乙酸水溶液為重量百分比為0.5%?1.2%的乙酸和水。
[0024]根據本發明，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)是由乳酸鏈球菌(Streptococcus,lactis)產生的具有很強殺菌作用的多肽物質，是國際上允許商業化生產的的天然防腐劑。
[0025]根據本發明，所述柑橘幼果提取物通過如下方法獲得:新鮮柑橘幼果切成片后置于60°C熱風干燥箱內烘8-20小時(優選10-12小時)，測定其含水量低于10%，磨碎后過40目篩，得柑橘幼果粉末。在柑橘幼果粉末加入乙醇和水混合溶劑(體積比9:1-2-1，優選8:1-5:1)，超聲下提取兩次(優選室溫，每次30min)，4000-8000r/m(優選5000_6000r/m)離心lOmin，合并上清液，減壓干燥得到柑橘幼果提取物。
[0026]本發明還提供一種海產品保鮮劑的制備方法，其特征在于，所述方法包括將乳酸鏈球菌素和柑橘幼果提取物混合均勻后，加入乙酸水溶液。
[0027]根據本發明，所述乳酸鏈球菌素和柑橘幼果提取物的重量百分比分別為:0.01%?0.1%和0.05%?0.1%，然后加入重量百分比為0.5%?1.2%的乙酸水溶液，所述比例以保鮮劑為基礎。
[0028]本發明還提供一種保鮮劑在海產品保鮮中的應用，尤其是在天然海產品保鮮中的應用。
[0029]本發明中的乳酸鏈球菌素可商購獲得。
[0030]本發明采用乳酸鏈球菌素和柑橘幼果提取物制得天然生物保鮮劑。對多種革蘭氏陽性菌(李斯特菌、小球菌、肉毒桿菌、葡萄球菌等)具有明顯的抗菌活性。同時，對芽孢桿菌屬如芽孢桿菌、嗜熱芽孢桿菌、梭狀芽孢桿菌、致死肉毒芽孢桿菌等有很強的抑制作用；柑橘幼果提取物中含有大量的黃酮類化合物，具有很強的抗脂質氧化和消除自由基作用，具備抗炎癥，抑制寄生蟲，防治肝病，防治血管疾病等多種保健作用，同時具有良好的抗菌、抗病毒微生物活性。本保鮮劑綜合上述兩種特性，對海產品保鮮具有良好的效果，尤其是應用于微凍和常溫保鮮，淋灑本海鮮保鮮劑后的海產樣品在低溫(0°C)下保藏，108小時后的細菌含量和30天后的TVB-N值遠低于二級鮮度所要求的指標.由此可見，使用本保鮮劑可大大延長保鮮貯藏期。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0031]圖1為實施例2柑橘幼果提取物中黃酮類化合物含量的HPLC測試圖
[0032]圖2為實施例7菌落總數的變化曲線圖。
[0033]圖3為實施例8揮發性鹽基氮TVB-N值的變化曲線圖。

【具體實施方式】
[0034]下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業途徑獲得。
[0035]實施例1、柑橘幼果提取物
[0036]新鮮柑橘幼果曬干，測定其含水量低于10%，磨碎后過40目篩，得柑橘幼果粉末。再稱取500g粉末加入IL乙醇和水的混合溶劑(體積比9:1)，超聲下輔助提取兩次溫度為25°C,每次時間為30min,之后5000r/m離心1min,合并上清液,減壓蒸干溶劑,干燥得到柑橘幼果提取物。
[0037]實施例2、柑橘幼果提取物中黃酮類化合物含量的測定
[0038]使用高效液相色譜法(HPLC)測定提取液中黃酮類化合物的含量。色譜條件:色譜柱為迪馬C18反相色譜柱(250mmX4.6mm 1.d.)，流動相為甲醇和4%乙酸。檢測波長:283nm用于黃烷酮糖苷的測定，330nm用于多甲氧基黃酮的測定。
[0039]由實施例1中制備得柑橘幼果提取物的HPLC測定，對照在相同的色譜條件條件下黃烷酮糖苷和多甲氧基黃酮標樣的HPLC測定，如圖1，使用標準曲線法可以計算得到在該柑橘幼果提取物中黃酮類化合物的含量為188mg/g。
[0040]實施例3、制備冰醋酸水溶液
[0041]取冰醋酸,用蒸餾水溶解,制得重量百分比為0.5%?1.2%的乙酸水溶液待用。
[0042]實施例4、海產品保鮮劑I
[0043]將0.1g乳酸鏈球菌素和0.5g柑橘幼果提取物混合均勻后，加入IL重量百分比為0.5%的乙酸水溶液，得海產品保鮮劑I。
[0044]實施例5、海產品保鮮劑2
[0045]將0.5g乳酸鏈球菌素和0.75g柑橘幼果提取物混合均勻后，加入IL重量百分比為0.75%的乙酸水溶液，即得海產品保鮮劑2。
[0046]實施例6、海產品保鮮劑3
[0047]將Ig乳酸鏈球菌素和Ig柑橘幼果提取物混合均勻后，加入IL重量百分比為1.2%的乙酸水溶液，即得海產品保鮮劑3。
[0048]實施例7、海產品保鮮劑的效果實驗
[0049]以新鮮鯧鳊魚和海白蝦為例，進行了細菌總數測定和揮發性鹽基氮(TVB-N)檢測，考察海產品保鮮劑的效果。
[0050]樣品處理:鯧鳊魚取背肌10g，海白蝦取腹節內肌肉共5g，用無菌均質器分別絞成肉糜。對照組直接在O°C下保藏，處理組淋灑保鮮劑2后在0°C下保藏。
[0051]細菌總數測定使用菌落總數測試片進行，參照《食品衛生檢驗手冊》。樣品用本海產品保鮮劑處理后，(TC保鮮過程中菌落總數的變化如圖2所示.
[0052]由圖2可以看出，低溫((TC )未作處理的海產樣品在24h后細菌總數即超過一級鮮度指標(〈104個/g)，此后菌數呈較快增長，至60h已非常接近二級鮮度所要求的指標(〈105個/g)。而相比之下，淋灑本海鮮保鮮劑后的海產樣品在低溫(0°C)下保藏108小時后，細菌含量小于4 X 14個/g.由此可見，淋灑本海鮮保鮮劑后在低溫((TC)保藏的海產樣品細菌的增長被有效的抑制。
[0053]實施例8、揮發性鹽基氮(TVB-N)檢測按照GB2723-81中理化指標規定。
[0054]樣品用本海產品保鮮劑3處理后，(TC保鮮過程中TVB-N值的變化如圖3所示。
[0055]水產品在一級鮮度時，TVB-N值<15mg/100g，不影響正常鮮度的氣味。如果繼續變質，其含量不斷增高，至二級鮮度<25mg/100g時，開始稍有氨味。如再增高，則形成的腐敗有毒產物則產生肉類腐敗變質的臭味，即禁止食用。在海鮮保鮮貯藏初期總揮發性鹽基氮的含量較低，隨著保鮮時間的增長，其自身的蛋白質，發生分解，生成胺鹽，最終轉化成揮發性鹽基氮，使TVB-N升高。由圖3可知，淋灑本海鮮保鮮劑后的海產樣品在低溫((TC )下保藏 30 天，TVB-N 值小于 15mg/100g.。
[0056]可見，經過本保鮮劑處理的海鮮能有效抑制蛋白質的分解，大大延長了保鮮周期，保鮮效果很好。
【權利要求】
1.一種保鮮劑，其特征在于:所述保鮮劑包含乳酸鏈球菌素(NiSin)，黃酮類化合物和乙酸水溶液。優選地，所述黃酮類化合物的含量為170-210mg/g，優選為180-200mg/g，以保鮮劑的總重量計。
2.根據權利要求1的保鮮劑，其特征在于，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)在保鮮劑中的重量百分比為0.01%?0.3%,優選0.01%?0.1%。 優選地，所述黃酮類化合物由柑橘幼果提取物提供，更優選地，所述柑橘幼果提取物在保鮮劑中的重量百分比為:0.02%?0.4%,優選0.05%?0.1%。
3.—種保鮮劑，其特征在于:所述保鮮劑包含乳酸鏈球菌素(Nisin)，柑橘幼果提取物和乙酸水溶液。
4.根據權利要求3的保鮮劑，其特征在于，所述保鮮劑由乳酸鏈球菌素(Nisin)，柑橘幼果提取物，冰醋酸和水組成。 優選地，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)在保鮮劑中的重量百分比為0.01%?0.3%，優選0.01% ?0.1%。 優選地，所述柑橘提取物在保鮮劑中的重量百分比為:0.02%?0.4%,優選0.05%?0.1%。 優選地，所述乙酸水溶液為重量百分比為0.5%?1.2%的乙酸。
5.根據權利要求1-4任一項的保鮮劑，其特征在于，所述乳酸鏈球菌素(Nisin)是由乳酸鏈球菌(Streptococcus, lactis)產生的具有很強殺菌作用的多肽物質。
6.根據權利要求3-5任一項的保鮮劑，其特征在于，所述柑橘幼果提取物通過如下方法獲得:新鮮柑橘幼果切成片后置于60°C熱風干燥箱內烘10小時，測定其含水量低于10%，磨碎后過40目篩，得柑橘幼果粉末。在柑橘幼果粉末加入乙醇和水混合溶劑(體積比9:1 )，超聲下提取兩次(優選室溫，每次30min)，5000r/m離心lOmin，合并上清液，減壓干燥得到柑橘幼果提取物。
7.根據權利要求1-6任一項的保鮮劑的制備方法，其特征在于，所述乳酸鏈球菌素和柑橘幼果提取物的重量百分比分別為:0.01%?0.1%和0.05%?0.1%，然后加入體積百分比為0.5%?1%的乙酸水溶液，所述比例以保鮮劑為基礎。
8.權利要求1-6任一項的保鮮劑在海產品保鮮中的應用，尤其是在天然海產品保鮮中的應用。
【文檔編號】A23L3/3544GK104041912SQ201310081187
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2013年3月14日 優先權日:2013年3月14日
【發明者】姚建年, 詹傳郎, 陸振歡, 張昕 申請人:中國科學院化學研究所