一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法及黑曲霉孢子的儲存方法
【專利摘要】本發明公開了一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，其中，該方法包括將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值為1-2.5。本發明還公開了一種黑曲霉孢子的儲存方法，其中，該方法包括將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的制備方法為本發明提供的方法。采用本發明的方法，能夠有效地降低黑曲霉孢子在儲存期間的染菌率，從而能夠提高黑曲霉種子液的質量，并提高檸檬酸的發酵水平。
【專利說明】一種黑曲霉孢子懸淳液的制備方法及黑曲霉孢子的儲存方 法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，以及一種黑曲霉孢子的儲存方 法。

【背景技術】
[0002] 檸檬酸安全無毒，是目前世界上產量最大的發酵有機酸。大量應用于化工、醫藥、 環保、食品等領域，如作為酸味劑、調味劑及防腐劑、保鮮劑、緩沖劑、螯合劑。在化工行業、 化妝品行業及洗滌行業中可作抗氧化劑、增塑劑、洗滌劑。在醫藥行業中可作抗凝劑。
[0003] 發酵制備檸檬酸的工藝通常為：制備黑曲霉麩曲，再將黑曲霉麩曲接種到種子罐 的種子培養基中進行培養，得到黑曲霉種子液，再將該黑曲霉種子液接種到發酵罐的發酵 培養基中進行發酵，得到檸檬酸發酵液。
[0004] 由于受工藝的限制，通常無法使用新鮮的黑曲霉麩曲制備黑曲霉種子液，而是 先將制備好的黑曲霉麩曲置于一定的環境中進行儲存(使用的黑曲霉麩曲一般需要儲存 24-48小時)，待使用時再將其取出進行擴大培養制備黑曲霉種子液，并進行后續的檸檬酸 發酵。
[0005] 但現有工藝的缺點是：現有方法制備的黑曲霉麩曲在儲存的過程中極易染菌，尤 其是在春夏季節其染菌率更高。而采用染菌的黑曲霉麩曲進行擴大培養，得到的種子液質 量較低，從而影響最終的檸檬酸發酵水平。雜菌過多時，甚至會出現倒罐的現象，將給生產 造成嚴重的損失。


【發明內容】

[0006] 本發明的目的是為了克服現有方法制備的黑曲霉麩曲在儲存過程中易染菌的缺 陷，提供一種在儲存過程中染菌率低的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，以及一種黑曲霉孢 子的儲存方法。
[0007] 本發明的發明人發現，在檸檬酸發酵過程中，發酵水平較低的原因在于：傳統的黑 曲霉麩曲在儲存期間易滋生雜菌，將帶有雜菌的黑曲霉麩曲接入種子罐中進行種子液的制 備時，雜菌會迅速生長，從而會消耗種子罐內的大量營養物質。在這種帶有雜菌生長的環 境下生長的黑曲霉孢子，生長會受到極大的抑制，菌球形態松散，種子液的質量較低。當將 這樣的種子液接入發酵罐中進行發酵時，一方面，帶入的雜菌同樣也會消耗發酵罐中的大 部分營養物質，使得檸檬酸的發酵轉化率降低；另一方面，將帶有雜菌的種子液接入發酵罐 后，發酵培養基的粘度會升高，使得發酵產酸變慢，從而會延長發酵周期；再一方面，生長狀 態較差的黑曲霉種子無法進行高效的產酸，使得發酵的酸度降低。
[0008] 因此，降低黑曲霉麩曲在儲存過程中的染菌率是提高檸檬酸發酵水平的關鍵。本 發明的發明人首先想到的是，一方面，在允許的范圍內增加用于制備黑曲霉孢子的原料的 滅菌時間和滅菌溫度，以將原料中的雜菌充分致死；另一方面，對用于儲存黑曲霉孢子的容 器采用多種方法或多種方法相結合進行滅菌，如，高溫蒸汽滅菌、酒精消毒、干熱滅菌；再一 方面，保證儲存環境的無菌性。但結果卻都收效甚微。
[0009] 本發明的發明人意外的發現，將黑曲霉孢子在無菌水中制備成黑曲霉孢子懸浮 液，并以黑曲霉孢子懸浮液的形式進行儲存能夠在一定程度上降低染菌率，但結果仍不理 想。由于黑曲霉孢子在種子培養基中吸水膨脹萌發的最適PH值為5-7. 5,而無菌水本身的 pH值也在此范圍內，因此，為了不對黑曲霉孢子造成損傷，并使得儲存的黑曲霉孢子能夠較 快的適應種子培養基的環境以及節省操作步驟，故一般不對黑曲霉孢子懸浮液的PH值進 行調節。然而，本發明的發明人卻意外的發現，將黑曲霉孢子懸浮液的PH值調節至1-2.5， 在儲存過程中不但能夠進一步有效地降低染菌率，而且也不會影響黑曲霉孢子的存活率， 低PH值下儲存的黑曲霉孢子對黑曲霉種子的培養周期也不會造成影響。因此，將黑曲霉麩 曲制備成黑曲霉孢子懸浮液，并將黑曲霉孢子懸浮液的PH值調節至1-2. 5,能夠有效地降 低黑曲霉孢子在儲存期間的染菌率，從而能夠提高黑曲霉種子液的質量，并提高檸檬酸的 發酵水平。
[0010] 基于以上發現，一方面，本發明提供了一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，其中， 該方法包括將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的PH值為 1-2. 5。
[0011] 優選地，所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值為2-2. 5。
[0012] 另一方面，本發明還提供了一種黑曲霉孢子的儲存方法，其中，該方法包括將黑曲 霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的制備方法為本發明提供的方 法。
[0013] 采用本發明的方法，將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，將黑曲霉孢子懸浮 液的PH值調節至1-2. 5,優選調節至2-2. 5,并將該黑曲霉孢子以懸浮液的形式進行儲存， 不但抑制了多數中性及堿性細菌的生長，而且還能有效抑制酸性細菌的生長，因此，能夠有 效地降低黑曲霉孢子在儲存期間的染菌率，從而能夠提高黑曲霉種子液的質量，并提高檸 檬酸的發酵水平。
[0014] 本發明的其他特征和優點將在隨后的【具體實施方式】部分予以詳細說明。

【具體實施方式】
[0015] 以下對本發明的【具體實施方式】進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體 實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。
[0016] 一方面，本發明提供了一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，其中，該方法包括將黑 曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的PH值為1-2. 5。
[0017] 通常在發酵生產上，當發酵受到雜菌污染時，一般會對用于發酵的原料(例如，種 子液、發酵培養基等）及設備(例如，發酵罐等)，甚至發酵的環境等進行逐一并逐級的檢查， 直至尋找到雜菌的污染源頭。
[0018] 通過采用上述方法發現，在檸檬酸發酵過程中的雜菌污染主要源于黑曲霉麩曲。 主要原因為：由于受現有工藝的限制，在發酵過程中無法使用新鮮的黑曲霉麩曲制備黑曲 霉種子液，而在黑曲霉麩曲儲存的過程中，極易污染雜菌。
[0019] 但本發明的發明人發現，發現污染源后，采用通常的處理方法，即對用于制備黑曲 霉麩曲的原料，儲存黑曲霉麩曲的容器，以及黑曲霉的儲存環境等的滅菌狀況進行了嚴格 的控制，但仍不能有效地抑制雜菌的污染。
[0020] 本發明的發明人意外的發現，將黑曲霉麩曲中的黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸 浮液，并以黑曲霉孢子懸浮液的形式進行儲存，能夠在一定程度上降低儲存過程中黑曲霉 孢子的染菌率。本發明的發明人又意外的發現，將黑曲霉孢子懸浮液的PH值調節至1-2. 5， 不但能夠進一步有效地降低儲存過程中黑曲霉孢子的染菌率，而且不會影響黑曲霉孢子的 存活率，低PH值下儲存的黑曲霉孢子對黑曲霉種子的培養周期也不會造成影響。
[0021] 更優選地，所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值為2-2. 5。當將黑曲霉孢子懸浮液的pH 值調節至2-2. 5時，儲存過程中黑曲霉孢子能夠更好的存活，且在制備種子液時，黑曲霉孢 子能更好的適應黑曲霉種子培養基的環境。從而能夠進一步提高發酵效率。
[0022] 根據本發明的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，調節pH值的方法可以為本領域常 用的方法，例如用酸性試劑調節；所述酸性試劑可以是本領域常用的各種酸性試劑，只要不 影響黑曲霉孢子的存活就可以，優選地，所述酸性試劑選自檸檬酸、鹽酸和硫酸中的一種或 多種。由于該孢子懸浮液之后用于生產檸檬酸，因此，更優選地，所述酸性試劑為檸檬酸。
[0023] 根據本發明的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，將黑曲霉麩曲中的黑曲霉孢子制成 孢子懸浮液的方法可以采用本領域技術人員公知的各種方法，例如，可以直接將黑曲霉麩 曲與無菌水混合、攪拌，使黑曲霉懸孢子懸浮于無菌水中制得孢子懸浮液。
[0024] 根據本發明的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，為了使黑曲霉孢子充分從麩曲中 游離出來，并且能夠得到均勻分散的孢子懸浮液。優選地，將黑曲霉在無菌水中進行分散 得到孢子懸浮液的方法還包括：將黑曲霉分散到無菌水中，在300-1000rpm條件下，攪拌 30-60min ;然后在20000-40000頻率下，超聲處理20-40min。
[0025] 根據本發明，對調節所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值的時機沒有特別的限制。例 如，可以先調節所述無菌水的PH值，然后再將黑曲霉麩曲與無菌水進行混合制得黑曲霉孢 子懸浮液；或者可以先將黑曲霉麩曲與無菌水進行混合制得黑曲霉孢子懸浮液，再調節所 述黑曲霉孢子懸浮液的PH值。優選的情況下，采用第一種方法制備黑曲霉孢子懸浮液。當 采用第一種方法調節黑曲霉孢子懸浮液的PH值時，為了避免在無菌水中加入黑曲霉麩曲 后會影響最終懸浮液的PH值，可以將所述無菌水的pH值調節至比上述范圍稍低的范圍，以 保證加入黑曲霉麩曲后所得的黑曲霉孢子懸浮液的PH值在本發明的范圍內。本領域技術 人員可以通過在加入黑曲霉麩曲的過程中間隔性的檢測懸浮液的PH值，以保證最終所得 黑曲霉孢子懸浮液的PH值在本發明的范圍內。
[0026] 另外，本領域技術人員公知，在進行高溫蒸汽滅菌時，所滅菌的物質的pH值一般 會下降0. 3-0. 5,因此，本領域技術人員能夠根據實際情況對滅菌前無菌水的pH值進行調 節，以保證滅菌并加入黑曲霉麩曲后能夠使黑曲霉孢子懸浮液的PH值在本發明的范圍內。
[0027] 根據本發明的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，對于所述孢子懸浮液中的黑曲霉的 孢子的含量沒有特別的限制，但是為了使黑曲霉孢子更好地分散并為了后續擴大培養時接 種量的需要，優選地，所述孢子懸浮液中黑曲霉孢子的含量為IX 1〇8_7 X IO8個孢子/ml，更 優選I X 108-2 X IO8個孢子/ml。由于在制備黑曲霉孢子懸浮液的過程中，黑曲霉孢子已經 充分從麩曲中游離出，并且游離出黑曲霉孢子后的麩曲由于密度較大會沉于容器的底部， 因此，可以直接取容器上部的黑曲霉孢子懸浮液進行黑曲霉孢子的計數。
[0028] 需要注意的是，盡管將黑曲霉孢子懸浮液的pH值調節至本發明的范圍內，既能夠 有效地降低在儲存過程中孢子懸浮液的染菌率。但為了進一步降低染菌的可能性，優選，制 備孢子懸浮液的整個過程在無菌條件下進行。
[0029] 第二方面，本發明提供了一種黑曲霉孢子的儲存方法，其中，該方法包括將黑曲霉 孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的制備方法為本發明提供的方法。
[0030] 由于本發明的發明點在于所述黑曲霉孢子懸浮液的制備，因此，對所述黑曲霉孢 子懸浮液進行儲存的條件可以為常規的用于儲存黑曲霉孢子的條件。例如，儲存的溫度可 以為 4-25 °C。
[0031] 由于采用了本發明的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，并將黑曲霉孢子以黑曲霉孢 子懸浮液的形式進行儲存，能夠有效地降低在儲存過程中的染菌率，因此，所述黑曲霉孢子 懸浮液的儲存時間要遠長于采用現有技術制備的黑曲霉麩曲的儲存時間。例如，采用本發 明的方法制備的黑曲霉孢子在儲存72小時時仍沒有觀察到明顯的染菌，而現有技術制備 的黑曲霉麩曲在儲存24小時時就已經出現了嚴重的染菌。
[0032] 優選地，存儲的環境為無菌環境。所述無菌環境的形成可以按照本領域常規的方 法形成，例如，可以采用紫外燈照射儲存環境后，再將所述黑曲霉孢子懸浮液置于此環境中 進行儲存。嚴格的無菌環境是指儲存環境經過嚴格的滅菌處理，處理的方法為本領域技術 人員所公知，例如，可以通過紫外線照射和噴灑消毒液相結合的方法。
[0033] 根據本發明的黑曲霉孢子的儲存方法，在對所述黑曲霉孢子懸浮液進行儲存的過 程中，需要每隔一段時間對所述黑曲霉孢子懸浮液進行取樣，以檢測其染菌狀況。所述檢測 的方法可以采用本領域常規的用于檢測是否染有雜菌的方法，例如，采用鏡檢的方法。所述 鏡檢的方法為本領域技術人員所公知，在此不再贅述。對于取樣的時間間隔可以根據實際 需要進行調整，例如，可以為10-20小時。
[0034] 以上詳細描述了本發明的優選實施方式，但是，本發明并不限于上述實施方式中 的具體細節，在本發明的技術構思范圍內，可以對本發明的技術方案進行多種簡單變型，這 些簡單變型均屬于本發明的保護范圍。
[0035] 另外需要說明的是，在上述【具體實施方式】中所描述的各個具體技術特征，在不矛 盾的情況下，可以通過任何合適的方式進行組合。為了避免不必要的重復，本發明對各種可 能的組合方式不再另行說明。
[0036] 此外，本發明的各種不同的實施方式之間也可以進行任意組合，只要其不違背本 發明的思想，其同樣應當視為本發明所公開的內容。
[0037] 以下將通過實施例對本發明進行詳細描述。以下實施例中用于鏡檢所述黑曲霉孢 子懸浮液的顯微鏡型號X-18-202雙目。
[0038] 發酵轉化率：轉化率（％) =發酵液的濃度(簡稱酸度）X發酵液的體積/總糖的重 量X 100%，其中，總糖的重量包括種子罐用糖重量和發酵罐用糖重量，總糖的測定根據GB/ T5009. 7-2003標準中的酸法總糖檢測方法進行檢測。酸度根據GB1987-2007標準進行檢 測。
[0039] 發酵糧耗指單位質量的檸檬酸所消耗的玉米原料的質量。
[0040] 還原糖的濃度采用菲林試劑法進行測定。
[0041] 染菌率為單位體積內的所述黑曲霉孢子懸浮液中雜菌的個數。
[0042] 實施例I
[0043] 本實施例用于說明本發明提供的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子的 儲存方法。
[0044] (1)在IOOOmL三角瓶中裝入600mL去離子水，使用檸檬酸調節其pH值為2. 4,將 調節PH值后的去離子水、接種鋼瓶進行高溫蒸汽滅菌，滅菌的壓力為0. 15Mpa，滅菌的溫度 為121°C，滅菌60min。制得pH值為2.0的無菌水，以及無菌接種鋼瓶。自然冷卻后備用。
[0045] (2)在無菌的條件下，將300ml步驟（1)中備用的無菌水倒入麩曲三角瓶中（含有 麩曲20g，用于制備麩曲的麩皮在0. 13Mpa，121°C條件下，滅菌60min)，并在800rpm條件下， 攪拌45min ;然后在30000頻率下，超聲處理30min，得到分散均勻的孢子懸浮液，所述孢子 懸浮液的PH值為2. 5。取上層孢子懸浮液進行黑曲霉孢子計數，孢子濃度為2. OX IO8個孢 子/ml懸浮液。
[0046] (3)在無菌的條件下，將步驟（2)中得到的孢子懸浮液倒入步驟（1)中備用的無菌 鋼瓶中。于20°C下在無菌環境中儲存所述孢子懸浮液。以將孢子懸浮液倒入無菌鋼瓶中的 時刻記為0小時，并每隔12小時取樣鏡檢所述懸浮液的染菌狀況，計算染菌率。檢測至72 小時。結果見表1。
[0047] 實施例2
[0048] 本實施例用于說明本發明提供的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子的 儲存方法。
[0049] (1)在IOOOmL三角瓶中裝入600mL去離子水，使用檸檬酸調節其pH值為2. 1。將 調節PH值后的去離子水、接種鋼瓶進行高溫蒸汽滅菌，滅菌的壓力為0. 15Mpa，滅菌的溫度 為121°C，滅菌60min。制得pH值為1.8的無菌水，以及無菌接種鋼瓶。自然冷卻后備用。
[0050] (2)在無菌的條件下，將300ml步驟（1)中備用的無菌水倒入麩曲三角瓶中（含有 麩曲20g，用于制備麩曲的麩皮在0. 13Mpa，121°C條件下，滅菌60min)，并在300rpm條件下， 攪拌60min ;然后在40000頻率下，超聲處理20min，得到分散均勻的孢子懸浮液，所述孢子 懸浮液的PH值為2. 0。取上層孢子懸浮液進行黑曲霉孢子計數，孢子濃度為I. 5 X IO8個孢 子/ml懸浮液。
[0051] (3)在無菌的條件下，將步驟（2)中得到的孢子懸浮液倒入步驟（1)中備用的無菌 鋼瓶中。于20°C下在無菌環境中儲存所述孢子懸浮液。以將孢子懸浮液倒入無菌鋼瓶中的 時刻記為0小時，并每隔12小時取樣鏡檢所述懸浮液的染菌狀況，計算染菌率。檢測至儲 存后的72小時。結果見表1。
[0052] 實施例3
[0053] 本實施例用于說明本發明提供的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子的 儲存方法。
[0054] (1)在IOOOmL三角瓶中裝入600mL去離子水，使用檸檬酸調節其pH值為2. 3。將 調節PH值后的去離子水、接種鋼瓶進行高溫蒸汽滅菌，滅菌的壓力為0. 15Mpa，滅菌的溫度 為121°C，滅菌60min。制得pH值為1.9的無菌水，以及無菌接種鋼瓶。自然冷卻后備用。
[0055] (2)在無菌的條件下，將300ml步驟（1)備用中的無菌水倒入麩曲三角瓶中（含有 麩曲20g，用于制備麩曲的麩皮在0. 13Mpa，121°C條件下，滅菌60min)，并在IOOOrpm條件 下，攪拌30min ;然后在20000頻率下，超聲處理40min，得到分散均勻的孢子懸浮液，所述孢 子懸浮液的pH值為2. 2。取上層孢子懸浮液進行黑曲霉孢子計數，孢子濃度為I. O X IO8個 孢子/ml懸浮液。
[0056] (3)在無菌的條件下，將步驟（2)中得到的孢子懸浮液倒入步驟（1)中備用的無菌 鋼瓶中。于20°C下在無菌環境中儲存所述孢子懸浮液。以將孢子懸浮液倒入無菌鋼瓶中的 時刻記為〇小時，并每隔12小時取樣鏡檢所述懸浮液的染菌狀況，計算染菌率。檢測至儲 存后的72小時。結果見表1。
[0057] 實施例4
[0058] 本實施例用于說明本發明提供的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子的 儲存方法。
[0059] 按照實施例1的方法進行黑曲霉孢子懸浮液的制備和儲存。不同的是，步驟（1) 中，將滅菌前將去離子水的PH值調節至1. 3,使得最終制備的黑曲霉孢子懸浮液的pH值為 1。與實施例1相同的儲存時間下鏡檢所述懸浮液的染菌狀況。計算染菌率。結果見表1。
[0060] 對比例1
[0061] 本對比例用于說明參比的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子的儲存方 法。
[0062] 按照實施例1的方法進行黑曲霉孢子懸浮液的制備和儲存。不同的是，步驟（1) 中，將滅菌前將去離子水的PH值調節至3. 5,使得最終制備的黑曲霉孢子懸浮液的pH值為 3。與實施例1相同的儲存時間下鏡檢所述懸浮液的染菌狀況。計算染菌率。結果見表1。
[0063] 對比例2
[0064] 本對比例用于說明參比方法提供的黑曲霉孢子懸浮液的制備方法和黑曲霉孢子 的儲存方法。
[0065] 按照實施例1的方法進行黑曲霉孢子懸浮液的制備和儲存。不同的是，步驟（1) 中，不調節所述去離子水的PH值（pH值為7. 0左右)。與實施例1相同的儲存時間下鏡檢 所述懸浮液的染菌狀況。計算染菌率。結果見表1。
[0066] 對比例3
[0067] 本對比例用于說明現有技術提供的黑曲霉麩曲的儲存方法。
[0068] 按照實施例1的方法進行黑曲霉孢子的儲存。不同的是，黑曲霉孢子以黑曲霉麩 曲的形式進行儲存，而不制備成黑曲霉孢子懸浮液。其中，用于制備麩曲的麩皮以及接種鋼 瓶在0. 15Mpa，123°C條件下，滅菌90min，并將置于接種鋼瓶中的麩曲在嚴格的無菌環境中 進行儲存。與實施例1相同的儲存時間下取黑曲霉麩曲，并使用無菌水制備成孢子懸浮液 鏡檢所述麩曲的染菌狀況。計算染菌率。結果見表1。
[0069] 表 1
[0070]

【權利要求】
1. 一種黑曲霉孢子懸浮液的制備方法，其特征在于，該方法包括將黑曲霉孢子制備成 黑曲霉孢子懸浮液，所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值為1-2. 5。
2. 根據權利要求1所述的方法，其中，所述黑曲霉孢子懸浮液的pH值為2-2. 5。
3. 根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述黑曲霉孢子以黑曲霉麩曲的形式存在， 將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液的方法包括：將黑曲霉麩曲中的黑曲霉孢子分散于 無菌水中，得到黑曲霉孢子懸浮液。
4. 根據權利要求3所述的方法，其中，將黑曲霉孢子分散于無菌水中的方法包括，將黑 曲霉麩曲與無菌水混合，并在300-1000rpm的條件下，攪拌30-60min ;然后在20000-40000 的頻率下，超聲處理20-40min。
5. 根據權利要求3所述的方法，其中，所述黑曲霉孢子懸浮液中黑曲霉孢子的含量為 1 X 108-7X 108 個孢子 /ml。
6. -種黑曲霉孢子的儲存方法，該方法包括將黑曲霉孢子制備成黑曲霉孢子懸浮液， 其特征在于，所述黑曲霉孢子懸浮液的制備方法為權利要求1-5中任意一項所述的方法。
7. 根據權利要求6所述的方法，其中，所述儲存的條件包括：儲存的溫度為4-25°C。
【文檔編號】C12N1/14GK104277977SQ201310273323
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月1日 優先權日:2013年7月1日
【發明者】熊結青, 盧宗梅, 鐘華, 劉夢涵 申請人:中糧生物化學（安徽）股份有限公司