專利名稱：黑曲霉麩曲培養(yǎng)基及其制備方法和黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黑曲霉麩曲培養(yǎng)基及其制備方法和黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
目前制備黑曲霉麩曲的培養(yǎng)基采用單一的小麥麩皮，其培養(yǎng)基水分大約控制在65-70重量％左右，pH值大約在6. 3-6. 5之間。然而使用這樣的麩皮培養(yǎng)基在滅菌過程中存在培養(yǎng)基易結(jié)塊、滅菌效果不夠高的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基在滅菌過程中存在培養(yǎng)基易結(jié) 塊、滅菌效果不夠高的問題，提供一種新的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基及其制備方法。本發(fā)明所提供的新的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基，其在滅菌過程中不易結(jié)塊、滅菌效果高。本發(fā)明的目的還在于提供一種黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法。即，本發(fā)明提供了一種黑曲霉麩曲培養(yǎng)基，其中，該培養(yǎng)基含有麩皮，以及稻殼和/或玉米芯顆粒，其中，麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I :0. 2-0.3，且該培養(yǎng)基的pH值為5. 5-6。本發(fā)明還提供了一種黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，其中，該方法包括將麩皮，與稻殼和/或玉米芯顆粒按照麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比I :0. 2-0. 3進(jìn)行混合，并通過添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的PH值為5. 5-6 ;然后，進(jìn)行滅菌。本發(fā)明還提供了一種黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法，該方法包括在滅菌后的培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種進(jìn)行麩曲培養(yǎng)，其中，所述滅菌后的培養(yǎng)基為本發(fā)明方法所得到的培養(yǎng)基。根據(jù)本發(fā)明所提供的新的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基，在滅菌過程中滅菌效果高，推測其滅菌效果高的原因可能為1)由于麩皮培養(yǎng)基中包括麩皮、稻殼和/或玉米芯顆粒，通過這樣的組合，使得在滅菌過程中，培養(yǎng)基不易結(jié)塊，提高了滅菌效果；2)通過控制麩皮培養(yǎng)基的PH值，降低了微生物耐熱性能，提高了滅菌效果。此外，通過使用上述黑曲霉麩曲培養(yǎng)基進(jìn)行黑曲霉麩曲的培養(yǎng)，還能夠提高黑曲霉麩曲的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
具體實施例方式以下對本發(fā)明的具體實施方式
進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體實施方式
僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。本發(fā)明提供的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基含有麩皮，以及稻殼和/或玉米芯顆粒，其中，麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I :0. 2-0. 3，且該培養(yǎng)基的pH值為5. 5-6。根據(jù)本發(fā)明，主要通過將麩皮、稻殼和/或玉米芯顆粒進(jìn)行配合，并控制培養(yǎng)基的PH值來提高黑曲霉麩曲培養(yǎng)基在滅菌中的滅菌效果。其本身對麩皮、稻殼和玉米芯顆粒沒有特別的要求，可以為本領(lǐng)域所常用的麩皮、稻殼和玉米芯顆粒。
如上所述，在本發(fā)明中，所述麩皮可以為現(xiàn)有技術(shù)中用于黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的麩皮(例如小麥麩皮)，優(yōu)選情況下，所述麩皮的淀粉含量為3-5重量％，水含量為65-70重量％，其顆粒大小為O. 4-2_;所述稻殼為稻谷外面的一層殼，通過將稻谷除去內(nèi)部的米顆粒而得到，優(yōu)選情況下，所述稻殼的顆粒大小為2-4mm ;所述玉米芯顆粒為剝離掉玉米粒后得到的玉米芯顆粒棒再經(jīng)過粉碎而得到的顆粒，優(yōu)選情況下，所述玉米芯顆粒的顆粒大小為l_3mm，優(yōu)選為I. 5-2. 5mm。所述顆粒大小是指顆粒尺寸，是指顆粒上的兩個不同點之間的最大直線距離。根據(jù)本發(fā)明，由于主要通過將在麩皮中配合稻殼和/或玉米芯顆粒來防止培養(yǎng)基在滅菌過程中進(jìn)行結(jié)塊，從而提高滅菌過程中的滅菌效果。因此對稻殼和玉米芯顆粒的成分以及成分的含量沒有特別的要求，只要是通過上述方法得到的稻殼和玉米芯顆粒即可。根據(jù)本發(fā)明，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比只要滿足在滅菌過程中培養(yǎng)基不結(jié)塊，且適合黑曲霉麩曲培養(yǎng)即可。一般情況下，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比在I :0. 2-0. 3的范圍內(nèi)，即可滿足上述要求。但從進(jìn)一步提高得到的培養(yǎng)基在滅菌過程中的滅菌效果來考慮，更優(yōu)選所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的 重量比為I :0. 2-0. 25。在此，需要指出的是當(dāng)僅使用稻殼和玉米芯顆粒中的一種時，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為麩皮與使用的物質(zhì)(稻殼或玉米芯顆粒)的重量比；當(dāng)同時使用稻殼和玉米芯顆粒時，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為麩皮重量與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比。根據(jù)本發(fā)明，為了進(jìn)一步提高得到的培養(yǎng)基在滅菌過程中的滅菌效果，優(yōu)選所述培養(yǎng)基的PH值為5. 5-6 ;更優(yōu)選所述培養(yǎng)基的pH值為5. 5-5. 8。根據(jù)本發(fā)明，可以通過添加酸調(diào)節(jié)劑來使所述培養(yǎng)基的pH值達(dá)到上述范圍內(nèi)。所述酸調(diào)節(jié)劑可以為本領(lǐng)域所常用的各種酸。例如，可以為鹽酸、硫酸、醋酸和硫酸氫鈉中的一種或多種。本發(fā)明還提供了黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，該方法包括將麩皮，與稻殼和/或玉米芯顆粒按照麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比I :0. 2-0. 3進(jìn)行混合，并通過添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的PH值為5. 5-6 ;然后，進(jìn)行滅菌。在本發(fā)明的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法中，所述麩皮可以為現(xiàn)有技術(shù)中用于黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的麩皮(例如小麥麩皮)，優(yōu)選情況下，所述麩皮的淀粉含量為3-5重量％，水含量為65-70重量％，其顆粒大小為O. 4-2mm ;所述稻殼為稻谷外面的一層殼，通過將稻谷除去內(nèi)部的米顆粒而得到，優(yōu)選情況下，所述稻殼的顆粒大小為2-4_ ;所述玉米芯顆粒為剝離掉玉米粒后得到的玉米芯顆粒棒再經(jīng)過粉碎而得到的顆粒，優(yōu)選情況下，所述玉米芯顆粒的顆粒大小為優(yōu)選為I. 5-2. 5mm。根據(jù)本發(fā)明的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比只要滿足在滅菌過程中培養(yǎng)基不結(jié)塊，且適合黑曲霉麩曲培養(yǎng)即可。一般情況下，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比在I :0. 2-0. 3的范圍內(nèi)，即可滿足上述要求。但從進(jìn)一步提高得到的培養(yǎng)基在滅菌過程中的滅菌效果來考慮，更優(yōu)選所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I :0. 2-0. 25。根據(jù)本發(fā)明的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，為了進(jìn)一步提高得到的培養(yǎng)基在滅菌過程中的滅菌效果，優(yōu)選添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的PH值為5. 5-6 ;更優(yōu)選添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的PH值為5. 5-5. 8。上述酸調(diào)節(jié)劑可以為本領(lǐng)域所常用的各種酸。例如，可以為鹽酸、硫酸、醋酸和硫酸氫鈉中的一種或多種。根據(jù)本發(fā)明的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，該方法包括將得到的混合物進(jìn)行滅菌，所述滅菌的條件可以本領(lǐng)域所常用的各種條件。例如，所述滅菌的條件包括在壓力為
O.1-0. 13MPa、溫度為 121_123°C下，滅菌 40-50 分鐘。本發(fā)明提供的黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法包括在滅菌后的培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種進(jìn)行麩曲培養(yǎng)，其特征在于，所述滅菌后的培養(yǎng)基為上述黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法所得到的培養(yǎng)基。
根據(jù)本發(fā)明的黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法，黑曲霉菌種的接入量可以為本領(lǐng)域在培養(yǎng)黑曲霉麩曲時的常規(guī)接入量。例如，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為5 X IO5 9 X IO5個黑曲霉孢子；優(yōu)選情況下，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為6 X IO5 8 X IO5個黑曲霉孢子。根據(jù)本發(fā)明的黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法，進(jìn)行麩曲培養(yǎng)的條件可以為本領(lǐng)域在培養(yǎng)黑曲霉麩曲時常用的條件。例如，該培養(yǎng)的條件包括溫度為30-37°C，水份63-68重量％，培養(yǎng)時間為7-11天；更優(yōu)選溫度為32-35°C，水份65-67重量％，培養(yǎng)時間為8_10天。以下將通過實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述，但本發(fā)明并不僅限于下述實施例。以下實施例中，無菌檢測的方法為在每瓶滅菌后的培養(yǎng)基中加入IOOml無菌水，充分混合均勻后，將培養(yǎng)基中的水倒入至細(xì)菌培養(yǎng)基(LB培養(yǎng)基)中培養(yǎng)兩天，然后通過目測以及鏡檢的方式方法進(jìn)行無菌檢測。無菌檢測的結(jié)果按照以下公式進(jìn)行計算得到無菌檢測的結(jié)果=培養(yǎng)后有菌的瓶數(shù)/無菌檢測的總瓶數(shù)X 100%。以下實施例中，黑曲霉麩曲中的黑曲霉孢子數(shù)可以按照血球平板計數(shù)法測得。具體地，該方法為稱取Ig黑曲霉麩曲5組，每組中加入含吐蒽4重量％的無菌生理鹽水，經(jīng)過磁力攪拌器和超聲波使孢子成為游離狀態(tài)，分別在顯微鏡下進(jìn)行孢子計數(shù)，取5組得到的數(shù)據(jù)的平均值。以下實施例中小麥麩皮通過以下方法獲得將小麥經(jīng)過除雜后，用水潤麥，使水份均勻，達(dá)到14-15重量％，然后經(jīng)過機械研磨過篩，然后再把麩皮通過打麩機強力打擊與摩擦，把麩片上粘附的粉粒與麩皮分離，再經(jīng)過刷粉機把麩片上的粉粒刷下，最后經(jīng)過圓篩處理、多次淘洗得到小麥麩皮。小麥麩皮中水含量的測定稱取IOg小麥麩皮,在90°C下烘干,烘干后的重量與稱取的小麥麩皮的重量的百分比即為小麥麩皮中的水的含量。小麥麩皮中淀粉含量的測定根據(jù)GB/T 5009. 9-2008測定小麥麩皮中淀粉含量。實施例II)黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備將小麥麩皮(顆粒大小為O. 4-2mm,水含量為68重量％、淀粉含量為4重量％)與稻殼(顆粒大小為2-3mm)按照重量比為I :0. 2進(jìn)行混合均勻，并通過加入鹽酸調(diào)節(jié)其pH值為5. 6-5. 7。將上述混合物分裝為12瓶(每瓶50g)，然后在壓力為O. 13MPa、溫度為121°C下，滅菌40分鐘，得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表
I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基均無結(jié)塊現(xiàn)象。2 )黑曲霉麩曲的培養(yǎng)在剩下的兩瓶培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種(斜面菌種)，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為8 X IO5個孢子。培養(yǎng)的條件包括溫度為32°C，水份65重量％，培養(yǎng)時間為9天，且每隔12小時進(jìn)行翻麩一次，得到黑曲霉麩曲，通過目測發(fā)現(xiàn)其生長狀態(tài)為孢子生長分布均勻，色黑，無雜色孢子，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所示。實施例2I)黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備 將小麥麩皮(顆粒大小為O. 4-1. 8_，水含量為70重量％、淀粉含量為3重量％)與稻殼(顆粒大小為2-4mm)按照重量比為I :0. 25進(jìn)行混合均勻，并通過加入30重量％的硫酸水溶液調(diào)節(jié)其PH值為5. 5-5.6。將上述混合物分裝為12瓶(每瓶50g)，然后在壓力為O. 13MPa、溫度為121°C下，滅菌40分鐘，得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基均無結(jié)塊現(xiàn)象。2)黑曲霉麩曲的培養(yǎng)在剩下的兩瓶培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種(斜面菌種)，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為7X IO5個孢子。培養(yǎng)的條件包括溫度為35°C，水份68重量％，培養(yǎng)時間為10天，且每隔12小時進(jìn)行翻麩一次，得到黑曲霉麩曲，通過目測發(fā)現(xiàn)其生長狀態(tài)為孢子生長分布均勻，色黑，無雜色孢子，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所
/Jn ο實施例3I)黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備將小麥麩皮(顆粒大小為O. 8-2. Omm,水含量為65重量％、淀粉含量為5重量％)與玉米芯顆粒(顆粒大小為1.5-2. 5mm)按照重量比為I :0. 2進(jìn)行混合均勻，并通過加入硫酸氫鈉調(diào)節(jié)其pH值為5. 7-5.8。將上述混合物分裝為12瓶(每瓶50g)，然后在壓力為
O.13MPa、溫度為121°C下，滅菌40分鐘，得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基均無結(jié)塊現(xiàn)象。2)黑曲霉麩曲的培養(yǎng)在剩下的兩瓶培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種(斜面菌種)，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為9X IO5個孢子。培養(yǎng)的條件包括溫度為34°C，水份63重量％，培養(yǎng)時間為10天，且每隔12小時進(jìn)行翻麩一次。得到黑曲霉麩曲，通過目測發(fā)現(xiàn)其生長狀態(tài)為孢子生長分布均勻，色黑，無雜色孢子，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所
/Jn ο實施例4按照實施例3的方法進(jìn)行，不同的是，小麥麩皮與玉米芯顆粒的重量比為I :0. 28。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基均無結(jié)塊現(xiàn)象。此外，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所示。對比例I
按照實施例I的方法進(jìn)行，不同的是，培養(yǎng)基中未加入稻殼，且未調(diào)節(jié)pH值(pH值為6. 4)。得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基中有結(jié)塊現(xiàn)象，且結(jié)塊的瓶數(shù)的比例占到總瓶數(shù)的40%。此外，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所示。對比例2按照實施例2的方法進(jìn)行，不同的是，培養(yǎng)基中未加入稻殼，且未調(diào)節(jié)pH值(pH值為6. 3)。得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基中有結(jié)塊現(xiàn)象，且結(jié)塊的瓶數(shù)的比例占到總瓶數(shù)的20%。此外，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所示。對比例3按照實施例3的方法進(jìn)行，不同的是，培養(yǎng)基中未加入玉米芯顆粒，且未調(diào)節(jié)pH值(pH值為6. 3)。得到黑曲霉麩曲培養(yǎng)基。待冷卻后隨機選取10瓶進(jìn)行無菌檢測，其結(jié)果見表I。另外，通過目視發(fā)現(xiàn)得到的培養(yǎng)基中有結(jié)塊現(xiàn)象，且結(jié)塊的瓶數(shù)的比例占到總瓶數(shù)的30%。此外，每克得到的黑曲霉麩曲中含有的孢子數(shù)如表2所示。表I
權(quán)利要求
1.一種黑曲霉麩曲培養(yǎng)基，其特征在于，該培養(yǎng)基含有麩皮，以及稻殼和/或玉米芯顆粒，其中，麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I : O. 2-0. 3，且該培養(yǎng)基的pH值為.5.5-6。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培養(yǎng)基，其中，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I O. 2-0. 25，培養(yǎng)基的pH值為5. 5-5. 8。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的培養(yǎng)基，其中，所述麩皮的淀粉含量為3-5重量％，水含量為65-70重量％。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的培養(yǎng)基，其中，所述麩皮的顆粒大小為O.4-2mm ;所述稻殼的顆粒大小為2-4mm ;所述玉米芯顆粒的顆粒大小為l_3mm。
5.一種黑曲霉麩曲培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，該方法包括將麩皮，與稻殼和/或玉米芯顆粒按照麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比I : O. 2-0. 3進(jìn)行混合，并通過添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的PH值為5. 5-6 ;然后，進(jìn)行滅菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為I : O. 2-0. 25 ;添加酸調(diào)節(jié)劑使得到的混合物的pH值為5. 5-5. 8。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其中，所述麩皮的淀粉含量為3-5重量％，水含量為65-70重量％。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其中，所述酸調(diào)節(jié)劑為鹽酸、硫酸、醋酸和硫酸氫鈉中的一種或多種。
9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其中，所述麩皮的顆粒大小為O.4-2mm ;所述稻殼的顆粒大小為2-4_ ;所述玉米芯顆粒的顆粒大小為1-3_。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述滅菌的條件包括在壓力為O.1-0. 13MPa、溫度為121-123°C下，滅菌40-50分鐘。
11.一種黑曲霉麩曲的培養(yǎng)方法，該方法包括在滅菌后的培養(yǎng)基中接入黑曲霉菌種進(jìn)行麩曲培養(yǎng)，其特征在于，所述滅菌后的培養(yǎng)基為權(quán)利要求5-10中任意一項所述方法所得到的培養(yǎng)基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的培養(yǎng)方法，其中，以每克培養(yǎng)基為基準(zhǔn)，所述黑曲霉菌種的接入量為5 X IO5 9 X IO5個黑曲霉孢子。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黑曲霉麩曲培養(yǎng)基及其制備方法，該培養(yǎng)基含有麩皮，以及稻殼和/或玉米芯顆粒，其中，麩皮，與稻殼和玉米芯顆粒的總量的重量比為10.2-0.3，且該培養(yǎng)基的pH值為5.5-6。本發(fā)明所提供的新的黑曲霉麩曲培養(yǎng)基，其在滅菌過程中不易結(jié)塊、滅菌效果高；并且通過使用上述黑曲霉麩曲培養(yǎng)基進(jìn)行黑曲霉麩曲的培養(yǎng)，還能夠提高黑曲霉麩曲的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
文檔編號C12N1/14GK102839132SQ201210358968
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月21日
發(fā)明者夏令和, 熊結(jié)青, 魯小云, 鐘華, 章輝平 申請人:中糧生物化學(xué)(安徽)股份有限公司