一種金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，該種子培養(yǎng)基中含有啤酒酵母干渣，具體是由油8～10ml/L、淀粉20～22g/L、啤酒酵母干渣27～29g/L、酵母膏8～9g/L、低溫黃豆餅粉11～13g/L、磷酸氫二鉀0.3～0.4g/L、輕質(zhì)碳酸鈣0.8～1g/L、硫酸鎂0.04～0.06g/L、氯化鈉0.8～0.9g/L、淀粉酶0.2～0.3g/L、硫酸銨0.05～0.07g/L和聚醚消泡劑0.03～0.04g/L組成。本發(fā)明可有效提高金色鏈霉菌菌體濃度和菌體培養(yǎng)質(zhì)量，減少種子培養(yǎng)初期的接種量，縮短種子培養(yǎng)周期，同時最大限度的降低種子培養(yǎng)中原輔料用量，降低生產(chǎn)成本，保證其供應(yīng)充足，實現(xiàn)金色鏈霉菌的穩(wěn)定、高質(zhì)量培養(yǎng)。
【專利說明】一種金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物發(fā)酵【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種使用啤酒酵母干渣減少金色鏈霉菌接種量的種子培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]金色鏈霉菌是鏈霉菌的一種，因其表現(xiàn)色為金黃色得其名，金色鏈霉菌在30°C以下時，合成金霉素的能力較強；當溫度超過35°C則只合成四環(huán)素。
[0003]目前，國內(nèi)培養(yǎng)金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基常用的有機氮源主要是玉米蛋白粉、花生餅粉、酵母粉和蛋白胨。存在的主要問題:
O種子培養(yǎng)基的配方中有機氮源的種類較多，需要添加4種以上有機氮源，增加了生產(chǎn)企業(yè)的采購成本和種子培養(yǎng)成本。
[0004]2)種子培養(yǎng)時間較長，一般在24~28h。
[0005]3)種子培養(yǎng)過程中，有機氮源的質(zhì)量容易影響菌體形狀和濃度，導(dǎo)致種子液質(zhì)量下降。
[0006]4)金色鏈霉菌種子培養(yǎng)前，種子培養(yǎng)基的接種量較多，一般為600~800ml/m3，增加了菌種研究人員的工作量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明目的就在于克服 上 述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種有效提高金色鏈霉菌菌體濃度和質(zhì)量，減少種子培養(yǎng)初期的接種量，縮短種子培養(yǎng)周期，同時最大限度的降低原輔料對種子液的質(zhì)量影響，降低生產(chǎn)成本，且原輔料來源不受環(huán)境影響，保證其供應(yīng)充足，實現(xiàn)培養(yǎng)穩(wěn)定、高質(zhì)量的金色鏈霉菌種子培養(yǎng)基。
[0008]本發(fā)明的另一目的是提供利用上述種子培養(yǎng)基培養(yǎng)金色鏈霉菌的方法。
[0009]為實現(xiàn)上述目的所采取的技術(shù)方案為:
一種金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于該種子培養(yǎng)基中的有機氮源含有啤酒酵母干渣。
[0010]上述金色鏈霉菌種子培養(yǎng)基的組成為:
油8~10ml/L、淀粉20~22g/L、啤酒酵母干渣27~29g/L、酵母膏8~9g/L、低溫黃豆餅粉11~13g/L、磷酸氫二鉀0.3~0.4g/L、輕質(zhì)碳酸韓0.8~lg/L、硫酸鎂0.04~
0.06g/L、氯化鈉0.8~0.9g/L、淀粉酶0.2~0.3g/L、硫酸銨0.05~0.07g/L,聚醚消泡劑
0.03~0.04g/L ;其中油為豆油、玉米油、菜油或葵花籽油，淀粉為玉米淀粉、小麥淀粉或甘署fe粉。
[0011]所述啤酒酵母干渣的質(zhì)量要求為:蛋白質(zhì)含量> 45%;磷含量> 60ug/ml ;水分(6% ;灰分≤5% ;碳水化合物≤10% ;干渣顆粒:通過60目篩的數(shù)量≤85%。
[0012]利用上述種子培養(yǎng)基培養(yǎng)金色鏈霉菌的方法，其特征在于其工藝步驟為:將金色鏈霉菌接入到經(jīng)過滅菌處理過的種子培養(yǎng)基中進行種子培養(yǎng)，至菌體濃度30~40%、pH值5~6.5、培養(yǎng)周期為18~20h時終止培養(yǎng)，上述種子培養(yǎng)條件為:
罐壓:0.02 ~0.04MPa,
罐溫:發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C; Ilh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31°C， 空氣流量:0~10h, 2 ~ 3m3/h ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:5~6m3/h， pH:種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5，
攪拌轉(zhuǎn)速:0~10h，采用氣流攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:啟動機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在50 ~60r/mino
[0013]所述滅菌后的種子培養(yǎng)基pH控制在6~7。
[0014]所述金色鏈霉菌的接種量控制在180~200ml/m3。
[0015]本發(fā)明的技術(shù)優(yōu)勢為:
I使用啤酒酵母干渣代替了種子培養(yǎng)基中的蛋白胨和花生餅粉，減少有機氮源的用量和種類，降低了采購和生產(chǎn)成本。
[0016]2種子培養(yǎng)基中使用了啤酒酵母干渣和低溫黃豆餅粉，其磷、氨基氮的含量明顯高于常規(guī)種子培養(yǎng)基配方，有利于改善金色鏈霉菌菌絲形態(tài)，提高種子質(zhì)量。
[0017]3常規(guī)種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)周期為24~28h。本發(fā)明的種子培養(yǎng)基中使用了啤酒酵母干渣和低溫黃豆餅粉，縮短了種子培養(yǎng)周期，其周期為18~20h，用時減少了 16.7%以上，提高了種子培養(yǎng)的工作效率。
[0018]4常規(guī)種子培養(yǎng) 基的接種量為600~800ml/m3，本發(fā)明種子培養(yǎng)基中使用了啤酒酵母干渣和低溫黃豆餅粉，其接種量為180~200ml/m3，接種量減少了 66%以上，同時減輕了菌種研究人員的工作強度。
[0019]5原輔料來源不受環(huán)境影響，可保證原料充足供應(yīng)。
【具體實施方式】
[0020]下面用實例予以說明本發(fā)明，應(yīng)該理解的是，實例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。本發(fā)明的范圍與核心內(nèi)容依據(jù)權(quán)利要求書加以確定。
[0021]下述實施例的菌種選用金色鏈霉菌。
[0022]實施例1
配置種子培養(yǎng)基5m3:豆油40L、玉米淀粉105kg、啤酒酵母干洛145kg、酵母膏40kg、低溫黃豆餅粉60kg、磷酸氫二鉀2.0kg、輕質(zhì)碳酸韓4kg、硫酸鎂0.25kg、氯化鈉4.5kg、淀粉酶lkg、硫酸銨0.3kg、硅油消泡劑200ml。
[0023]啤酒酵母干渣的質(zhì)量:蛋白質(zhì)含量為54.3%、磷含量為62.3ug/ml、水分為4.8%、灰分為4.1%、碳水化合物為13.7%。
[0024]種子培養(yǎng)基滅菌，冷卻，并用無菌空氣保壓。滅菌后的種子培養(yǎng)基無雜菌污染，滅菌后的PH為6.2。然后在火焰保護下，將已經(jīng)培養(yǎng)好的金色鏈霉菌接入種子罐進行種子培養(yǎng)，接種量是900ml。
[0025]種子培養(yǎng)過程中，罐壓為0.02MPa ;發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C;llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31 °C;空氣流量:0~10h，2.2m3/h ; IIh至種子培養(yǎng)結(jié)束:5.3m3/h ;種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5 ;0~IOh,采用氣流攪拌代替機械攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，采用機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在52r/min。種子培養(yǎng)結(jié)束，菌體濃度是32% ；pH是5.8 ;鏡檢菌絲形態(tài)良好、無其它雜菌污染，培養(yǎng)周期為18.2h。
[0026]實施例2
配置種子培養(yǎng)基5m3:玉米油45L、小麥淀粉110kg、啤酒酵母干渣135kg、酵母膏42.5kg、低溫黃豆餅粉65kg、磷酸氫二鉀1.5kg、輕質(zhì)碳酸韓4.5kg、硫酸鎂0.3kg、氯化鈉4.0kg、淀粉酶1.25kg、硫酸銨0.35kg、硅油消泡劑150ml。
[0027]啤酒酵母干渣的質(zhì)量:蛋白質(zhì)含量為52.1%、磷含量為68.6ug/ml、水分為4.2%、灰分為4.5%、碳水化合物為14.2%。[0028]種子培養(yǎng)基滅菌，冷卻，并用無菌空氣保壓。滅菌后的種子培養(yǎng)基無雜菌污染，滅菌后的PH為6.3。然后在火焰保護下，將已經(jīng)培養(yǎng)好的金色鏈霉菌接入種子罐進行種子培養(yǎng)，接種量是920ml。
[0029]種子培養(yǎng)過程中，罐壓為0.03MPa ;發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C;llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31 °C;空氣流量:0~10h，2.5m3/h ; IIh至種子培養(yǎng)結(jié)束:5.6m3/h ;種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5 ;0~IOh,采用氣流攪拌代替機械攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，采用機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在56r/min。種子培養(yǎng)結(jié)束，菌體濃度是35% ；pH是5.4 ;鏡檢菌絲形態(tài)良好、無其它雜菌污染，培養(yǎng)周期為19.2h。
[0030]實施例3
配置種子培養(yǎng)基5m3，菜籽油50L、甘薯淀粉100kg、啤酒酵母干渣140kg、酵母膏45kg、低溫黃豆餅粉55kg、磷酸氫二鉀1.75kg、輕質(zhì)碳酸韓5kg、硫酸鎂0.2kg、氯化鈉4.25kg、淀粉酶1.5kg、硫酸銨0.25kg、硅油消泡劑175ml。
[0031]啤酒酵母干渣的質(zhì)量:蛋白質(zhì)含量為56.1%、磷含量為71.4ug/ml、水分為4.0%、灰分為4.4%、碳水化合物為14.8%。
[0032]種子培養(yǎng)基滅菌，冷卻，并用無菌空氣保壓。滅菌后的種子培養(yǎng)基無雜菌污染，滅菌后的PH為6.4。然后在火焰保護下，將已經(jīng)培養(yǎng)好的金色鏈霉菌接入種子罐進行種子培養(yǎng)，接種量是950ml。
[0033]種子培養(yǎng)過程中，罐壓為0.04MPa ;發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C ；10h至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31°C ;空氣流量:0~10h，3m3/h ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:6m3/h ;種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5 ;0~IOh,采用氣流攪拌代替機械攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，采用機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在60r/min。種子培養(yǎng)結(jié)束，菌體濃度是38% ；pH是5.8 ;鏡檢菌絲形態(tài)良好、無其它雜菌污染，培養(yǎng)周期為20h。
[0034]實施例4
配置種子培養(yǎng)基5m3，葵花籽油49L、甘薯淀粉108kg、啤酒酵母干渣147kg、酵母膏44kg、低溫黃豆餅粉63kg、磷酸氫二鉀1.8kg、輕質(zhì)碳酸韓4.7kg、硫酸鎂0.28kg、氯化鈉
4.4kg、淀粉酶1.4kg、硫酸銨0.33kg、硅油消泡劑190ml。
[0035]啤酒酵母干渣的質(zhì)量:蛋白質(zhì)含量為53.7%、磷含量為70.lug/ml、水分為4.3%、灰分為4.1%、碳水化合物為14.6%。
[0036]種子培養(yǎng)基滅菌，冷卻，并用無菌空氣保壓。滅菌后的種子培養(yǎng)基無雜菌污染，滅菌后的PH為6.4。然后在火焰保護下，將已經(jīng)培養(yǎng)好的金色鏈霉菌接入種子罐進行種子培養(yǎng)，接種量是1000ml。
[0037]種子培養(yǎng)過程中，罐壓為0.04MPa ;發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31°C ;空氣流量:0~10h，3m3/h ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:6m3/h ;種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5 ;0~IOh,采用氣流攪拌代替機械攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，采用機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在60r/min。種子培養(yǎng)結(jié)束，菌體濃度是36% ;pH是6.1 ；鏡檢菌絲形態(tài)良好、無其它雜菌污染，培養(yǎng)周期為19.6h。
[0038]對比實施例
配置種子培養(yǎng)基5m3,豆油48L、玉米淀粉107kg、蛋白胨145kg、酵母膏42kg、花生餅粉82kg、低溫黃豆餅粉55kg、磷酸氫二鉀1.6kg、輕質(zhì)碳酸韓4.6kg、硫酸鎂0.25kg、氯化鈉
4.3kg、淀粉酶1.3kg、硫酸銨0.32kg、硅油消泡劑160ml。
[0039]種子培養(yǎng)基滅菌，冷卻，并用無菌空氣保壓。滅菌后的種子培養(yǎng)基無雜菌污染，滅菌后的PH為6.5。然后在火焰保護下，將已經(jīng)培養(yǎng)好的金色鏈霉菌接入種子罐進行種子培養(yǎng)，接種量是3.5L。
[0040]種子培養(yǎng)過程中，罐壓為0.04MPa ;發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C;llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31°C ;空氣流量:0~10h，3m3/h ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:6mVh ；種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5 ;0~IOh,采用氣流攪拌代替機械攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束，轉(zhuǎn)速控制在60r/min。種子培養(yǎng)結(jié)束，菌體濃度是30.2% ；pH是5.8 ;鏡檢菌絲形態(tài)良好、無其它雜菌污染，培養(yǎng)周`期為27.3h。
【權(quán)利要求】
1.一種金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于該種子培養(yǎng)基中含有啤酒酵母干渣。
2.按照權(quán)利要求1所述的金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于該種子培養(yǎng)基的組成為: 油8~10ml/L、淀粉20~22g/L、啤酒酵母干渣27~29g/L、酵母膏8~9g/L、低溫黃豆餅粉11~13g/L、磷酸氫二鉀0.3~0.4g/L、輕質(zhì)碳酸韓0.8~lg/L、硫酸鎂0.04~0.06g/L、氯化鈉0.8~0.9g/L、淀粉酶0.2~0.3g/L、硫酸銨0.05~0.07g/L、聚醚消泡劑0.03 ~0.04g/L。
3.按照權(quán)利要求2所述的金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于所述的油為豆油、玉米油、菜油或葵花籽油。
4.按照權(quán)利要求2所述的金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于所述的淀粉為玉米淀粉、小麥淀粉或甘薯淀粉。
5.按照權(quán)利要求1或2所述的金色鏈霉菌的種子培養(yǎng)基，其特征在于所述啤酒酵母干渣的質(zhì)量要求為:蛋白質(zhì)含量> 45% ;磷含量> 60ug/ml ;水分< 6% ;灰分< 5% ;碳水化合物10% ;干渣顆粒:通過60目篩的數(shù)量85%。
6.一種利用權(quán)利要求1所述的種子培養(yǎng)基培養(yǎng)金色鏈霉菌的方法，其特征在于其工藝步驟為:將金色鏈霉菌接入到經(jīng)過滅菌處理過的種子培養(yǎng)基中進行種子培養(yǎng)，至菌體濃度30~40%、pH值5~6.5、培養(yǎng)周期為18~20h時終止培養(yǎng)，上述種子培養(yǎng)條件為:
罐壓:0.02 ~0.04MPa, 罐溫:發(fā)酵前10h，罐溫控制在28~29°C; Ilh至種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在30~31°C， 空氣流量:0~10h, 2 ~ 3m3/h ；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:5~6m3/h， pH:種子培養(yǎng)過程中，pH控制在5~6.5， 攪拌轉(zhuǎn)速:0~10h，采用氣流攪拌；llh至種子培養(yǎng)結(jié)束:啟動機械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在50 ~60r/mino
7.按照權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法，其特征在于所述滅菌后的種子培養(yǎng)基pH控制在6~7。
8.按照權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法，其特征在于所述金色鏈霉菌的接種量控制在`180 ~200ml/m3。
【文檔編號】C12R1/49GK103484406SQ201310440772
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月25日
【發(fā)明者】王 義, 任勇 申請人:寧夏泰瑞制藥股份有限公司