一種制備銀杏蛋白肽的方法
【專利摘要】本發明涉及一種銀杏深加工的方法，具體公開了一種制備銀杏蛋白肽的方法，主要包括以下步驟：（1）原料處理；（2）銀杏粉的制備；（3）銀杏蛋白粉制備；（4）一次酶解；（5）二次酶解的加工方法獲得銀杏糖肽、氨基酸平衡肽和銀杏多肽產品，開拓了銀杏資源的利用，也為開發特殊功能產品提供了新的產品資源。本發明方法工藝獨特、簡單，生產成本低，產品安全無毒副作用，開辟了銀杏多肽制備的新工藝，開拓了銀杏利用新領域，也為開發特殊功能產品提供了新的產品資源，本發明方法制得的銀杏多肽產品可作為開發保健食品、食品添加劑和醫藥原料及輔料的原材料應用。
【專利說明】一種制備銀杏蛋白肽的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種銀杏深加工的方法，具體涉及一種制備銀杏蛋白肽的方法。
【背景技術】
[0002]銀杏俗稱白果，含有豐富的蛋白質、淀粉和多種生理活性成分，白果含有淀粉62.4%-67%、蛋白質11.3%、脂肪2.6%、蔗糖5.2%、還原糖1.1%、核蛋白0.26%和礦物質3%。白果中含有17種氨基酸，總量為10.77%，其中人體必需氨基酸為7種，含量為3.42%，占總氨基酸含量的31.8%，藥效氨基酸9種，含量為7.25%，占總氨基酸含量67.3%，半必需氨基酸4種，含量為1.33%，占總氨基酸含量12.3% ;白果中含有25種礦物元素，常量元素占總礦物質元素的99.4%，主要是Ca、Mg、P、K ;微量元素占總礦物質的0.56%，主要是Fe、Na、Zn、Cu、Mn、Ba、Sr ;充分提取利用銀杏中具有的營養功能和生理活性物質已成為研究和開發的熱點，銀杏具有的營養功能和生理活性已被開發具有抗疲勞、抗氧化、降低膽固醇、降血壓、調節血糖等的功能性保健品供應市場。小分子肽具有獨特的生理活性，由于肽從胃到小腸移行速度快、吸收快，在醫院外科手術病人、重度燒傷病人以及創傷性休克等重癥病人的營養補充已采用流食、半流食的肽類營養制劑，目前還有將肽類開發為運動食品、飲料、藥用輔料及功能性保健品應用的產品。
[0003]銀杏中的蛋白質、淀粉含量豐富，在銀杏制品的提取過程中均作為廢棄物被丟棄，給資源造成了浪費，再之，銀杏果仁的加工利用，大都屬于低端普通食用產品，其銀杏中的營養性成分利用率和附加值較低，造成資源浪費。
[0004]現有技術如中國專利CN102422976A公開的一種銀杏多肽的制備方法，其技術特征是，將去殼的銀杏果實采用醇提后，進行粗磨和細磨制得漿液后，采用500kDa的超濾裝置去除雜質制得銀杏多肽水解液，然后在20kDa的超濾膜進行分離后，再經通過IOODa的納濾膜進行分離，并進行濃縮后，在50°C的條件下進行真空干燥，得銀杏肽粉，從現有技術案中可以看出，工藝繁雜，收得率低，生產成本高，然而二次膜分離將其未分解的蛋白質及淀粉仍作為廢棄物被濾出，不能被充分利用，其銀杏的利用率相對較低，不能給銀杏的開發利用帶來較為很好的利用效率和經濟效益。

【發明內容】

[0005]本發明的目的針對現有技術的不足，提供一種以銀杏為原料通過打漿和水解制得銀杏蛋白粉，再經一、二次酶解后制得銀杏多肽的方法，獲得了對銀杏進行深加工制得銀杏糖肽、氨基酸平衡肽和銀杏多肽的方法。
[0006]本發明的目的是通過以下技術方案來實現的:
一種制備銀杏蛋白肽的方法，它包括以下工藝步驟:
(I)原料處理將脫殼后的銀杏果仁放入100°C沸水中漂燙2min后，撈入50-60°C熱水中輕搓漂洗脫去內種皮后，用流動水沖洗干凈，再迅速浸沒于含有0.5%的食鹽、0.25%的檸檬酸和0.1%的抗壞血酸水溶液中進行護色，處理30min后撈出，浙干水分； (2)銀杏粉的制備將步驟(I)處理好的銀杏果仁先放入砂輪磨中加入果仁重量8倍的含有0.3%食鹽和0.2%檸檬酸的純凈水進行粗磨，磨成均勻的漿汁后，立即送入膠體磨中進行細磨，細磨15_25min，使磨漿成為均勻的乳狀漿液，將細磨過的乳狀漿液送入離心過濾機中進行離心過濾，漿渣加2倍量同上條件的純凈水，再送入膠體磨細磨I次，經離心過濾后，再將兩次經過過濾的漿液合并，再用300目篩網過濾I次，經干燥后得銀杏粉；
(3)銀杏蛋白粉制備將步驟(2)獲得的銀杏粉加入純凈水，按重量比為1:20的配料比混合，充分攪拌，用ImoL/L氫氧化鈉調節PH至6.6-7.2之間,浸泡3h后過濾,取濾液，以
0.5moL/L鹽酸調節PH4-5之間，煮沸3h，靜置沉淀，除去上層泡沫和溶液后，得沉淀物，再將沉淀物，按重量比加入5倍量的純凈水，攪勻，冷至38-45°C時，離心甩干得濕銀杏蛋白，經干燥后得銀杏蛋白粉；
(4)一次酶解將步驟(3)得到的銀杏蛋白粉溶解，溶解的條件為銀杏蛋白粉在水中的重量濃度為2%、控制溫度為50°C、PH值為6.5-6.9進行溶解后，先用中性蛋白酶(SUKAPR0NE)進行酶解，其中條件為中性蛋白酶的重量為銀杏蛋白溶液重量的1.5-3%，PH值為6.6-6.8，保溫48-52°C，酶解時間為2.5-4小時，得中性蛋白酶酶解液，然后將酶解液再加入復合風味蛋白酶進行酶解，其中條件為:復合風味蛋白酶的重量為銀杏蛋白溶液重量的
1.5-3%，PH值自然(不需調整)、保溫48-52°C，酶解時間為4.5-8.5小時，得酶解液，然后將酶解液以0.5moL/L鹽酸調節PH值在3.6-4.6之間，靜置使自然冷卻后，進行離心分離得上清液和沉淀物；
(5)二次酶解將步驟(4)得到的上清液用復混(配)蛋白酶進行第二次酶解，然后加熱至95°C滅酶，經濃縮、噴霧干燥得銀杏糖肽；將步驟(4)得到的沉淀物用復混(配)蛋白酶進行第二次酶解，然后加熱至95°C滅酶，經離心分離取上清液進行噴霧干燥得氨基酸平衡肽；取沉淀物進行真空干燥得銀杏多肽。
[0007]所述步驟(5)中的上清液酶解條件是PH值為6.6-6.8、溫度為48_52°C，酶解時間為6.5-8.5小時；酶解時，復混蛋白酶的重量為上清液重量的1.55-2.6%。
[0008]所述步驟(5)中的沉淀物酶解時的投料重量濃度為1.5-2% ;其中酶解條件是溫度為48-52°C，酶解時間為7-9小時；酶解時，復混蛋白酶的重量為沉淀物溶解液的重量的
0.75-1.56%ο
[0009]所述步驟(5)中的復混蛋白酶，是由中性蛋白酶與復合風味蛋白酶按1:1.5重量份復配混合制得。
[0010]采用本發明權利要求1的方法獲得銀杏糖肽產品。
[0011]采用本發明權利要求1的方法獲得氨基酸平衡肽產品。
[0012]采用本發明權利要求1的方法獲得銀杏多肽產品。
[0013]中性蛋白酶(SUKAPR0 NE)，蛋白酶(Neutrase)是由淀粉液化芽孢桿菌族生產的內蛋白酶制劑，被廣泛用于動、植物的蛋白質加工業，以改變蛋白質的水結合能力、乳化能力、發泡能力及其粘度，能將蛋白質水解為低分子蛋白胨、際、多肽及氨基酸，中性蛋白酶由中性蛋白酶高產菌株一桿菌(BacuiLLus)深層發酵而成，在中性條件下具有較高的活性，能在中性條件下水解植物蛋白質中的縮氨酸鍵，釋放氨基酸或者多肽，中性蛋白酶適用PH范圍是6.0-8.0，最適PH值6.8-7.0，溫度范圍是10°C -60°C，最適溫度45_50°C，然而根據本發明對比試驗結果表明，結果顯示在溫度為48-52°C、PH值為6.6-6.8時酶解效果最佳，其發酵液的澄清度最好。
[0014]復合風味蛋白酶(Flavourzyme )是由米曲霉生產的內蛋白酶和外蛋白酶混合制劑(內蛋白酶為切割多肽鍵內部的肽鍵；外蛋白酶則為切割多肽鏈一端的肽鍵)再外加一些風味物質復配而成的復合風味蛋白酶，其特點是酶解后期風味優化，去除苦味，改善口感，可以制取風味良好的水解產品，提高產品質量，本產品含有氨肽酶，羧肽酶，通過末端水解多肽，可提高水解度。復合風味蛋白酶最適PH值是6.0-7.0，溫度50-53 °C，其酶解條件與中性蛋白酶相本相似。
[0015]根據中性蛋白酶與復合風味蛋白酶的特性，將二者復混配合使用可取得最好的使用效果。
[0016]本發明的有益效果
1.本發明首先通過對銀杏果仁進行加工分離處理制得銀杏粉，然后將銀杏粉采用堿液溶解，再用HCl調節PH值4-5之間煮沸3小時進行水解、分離制得銀杏蛋白粉，再將銀杏蛋白粉通過中性蛋白酶酶解和復混蛋白酶二次酶解工藝，獲得了兩種組成不同的銀杏糖肽、氨基酸平衡肽和一個混合肽即銀杏多肽新產品。
[0017]2.本發明步驟(5)中采用的復混蛋白酶進行二次酶解工藝，該復混酶是由中性蛋白酶與復合風味蛋白酶按1:1.5的重量分復配混合而成，該工藝使用的好處在于，二種酶的酶解條件相近，可減少工藝的繁雜調整過程，有利于節約原材料、節省時間，提高其穩定性；復合風味蛋白酶是由米曲霉生產的內蛋白酶和外蛋白酶的混合制劑，其內蛋白酶為切割多肽內部的肽鍵，而外蛋白酶則為切割多肽鏈一端的肽鍵，有利多肽的產生，提升銀杏酶解過程多肽的含量和提取率，另外復合風味蛋白酶的應用還能改善酶解產物的風味，去除苦味，改善口感，使制得的產品風味良好，有利于提高產品質量。
[0018]3.本發明方法采取從銀杏原料入手開辟銀杏多肽制備新工藝，實現了產品概念的內在本質和技術創新，所制得的銀杏糖肽、氨基酸平衡肽及銀杏多肽性質穩定，不受PH值和加熱的影響，本發明利用銀杏果實制備的銀杏糖肽、氨基酸平衡肽銀杏多肽和銀杏多肽，開拓了銀杏利用新領域，也為開發特殊功能產品提供了新的產品資源。
[0019]4.本發明的制備技術，工藝獨特，工藝簡單，生產成本低，產品安全而無毒副作用，是營養和輔助醫療的有前景的原料制品，可作為開發保健食品、食品添加劑和醫藥原料及輔料的原材料應用。
【具體實施方式】
[0020]實施例1
取成熟新鮮的銀杏果，經脫殼后得果仁，將果仁放入100°c沸水中漂燙2min后，撈入50-60°C熱水中，輕搓漂洗脫去內種皮后，用流動水沖洗干凈，再迅速浸沒于含有0.5%的食鹽0.25%的檸檬酸和0.1%的抗壞血酸水溶液中進行護色處理30min，撈出并浙干水分；然后將銀杏果仁采用砂輪磨進行粗磨，粗磨時加入果仁重量的8倍含有0.3%食鹽和0.2%檸檬酸的水溶液，磨成均勻的漿汁后，立即送入膠體磨中進行細磨，細磨15-25min，使磨漿成為均勻的乳狀漿液，再將乳狀漿液送入離心過濾機中進行離心過濾，得濾液，漿渣再加入其渣重量的2倍量的含有重量0.3%食鹽和0.2%檸檬酸水溶液，再送入膠體磨細磨I次，經離心過濾后，將兩次過濾的漿液合并，再用300目篩網過濾I次，經濃縮、真空干燥得銀杏粉。[0021]實施例2
稱取實施例1制得銀杏粉與純凈水按其重量比為1:20配料混合，充分攪拌，用ImoL/L氫氧化鈉溶液調節PH值至6.6-7.2之間，浸泡3h后，過濾,濾洛另作他用，取濾液以
0.5moL/L鹽酸調節PH值4_5之間，煮沸3h，靜置沉淀，分離除去上層泡沫和溶液后，得沉淀物，再將沉淀物按重量加入5倍量的純凈水，攪勻，冷至38-45°C時，離心甩干得濕銀杏蛋白，經真空干燥后得銀杏蛋白粉。
[0022]實施例3
稱取實施例2制得的銀杏蛋白粉，加純凈水使溶解，銀杏蛋白粉在水中的重量濃度為2%，在不斷攪拌中加熱，使溶液溫度達50°C，用ImoL/L氫氧化鈉調節PH值為6.5-6.9，進行溶解后，再測定PH值，保證PH值在6.6-6.8范圍，溶液溫度在48_52°C范圍，然后按銀杏蛋白溶液重量的1.5-3%加入中性蛋白酶進行酶解，酶解時間為2.5-4小時，得中性蛋白酶酶解液，然后將中性蛋白酶酶解液，在不用調節PH值的條件下，繼續保溫48-52°C，加入銀杏蛋白粉溶液重量1.5-3%的復合風味蛋白酶繼續進行酶解4.5-8.5小時，得酶解液，然后將酶解液以0.5moL/L鹽酸調節PH值在3.6-4.6之間，靜置讓其自然冷卻后，進行離心分離得上清液和沉淀物；將上述得到的上清液用ImoL/L氫氧化鈉調節PH為6.6-6.8溫度控制在48-52°C，加入上清液重量的1.55-2.6%復混蛋白酶進行第二次水解，水解時間為
6.5-8.5小時，酶解完成后，加熱至95°C滅酶，經濃縮、噴霧干燥得銀杏糖肽。再將上述所得沉淀物采用復混蛋白酶進行第二次酶解，第二次酶解是在沉淀物投料重量濃度為2%，溫度為48-52°C條件下，用沉淀物溶液重量的1.15%的復混蛋白酶，酶解7-9小時，然后加熱至95°C滅酶，經離心分離取上清液進行噴霧干燥得氨基酸平衡肽；取沉淀進行真空干燥得銀杏多肽。
[0023]實施例3中所述的復混蛋白酶，是由中性蛋白酶與復合風味蛋白酶按其重量份為1:1.5復配混合制得。
【權利要求】
1.一種制備銀杏蛋白肽的方法，其特征在于，它包括以下工藝步驟: (1)原料處理將脫殼后的銀杏果仁放入100°C沸水中漂燙2min后，撈入50-60°C熱水中輕搓漂洗脫去內種皮后，用流動水沖洗干凈，再迅速浸沒于含有0.5%的食鹽、0.25%的檸檬酸和0.1%的抗壞血酸水溶液中進行護色，處理30min后撈出，浙干水分； (2)銀杏粉的制備將步驟(I)處理好的銀杏果仁先放入砂輪磨中加入果仁重量8倍的含有0.3%食鹽和0.2%檸檬酸的純凈水進行粗磨，磨成均勻的漿汁后，立即送入膠體磨中進行細磨，細磨15_25min，使磨漿成為均勻的乳狀漿液，將細磨過的乳狀漿液送入離心過濾機中進行離心過濾，漿渣加2倍量同上條件的純凈水，再送入膠體磨細磨I次，經離心過濾后，再將兩次經過過濾的漿液合并，再用300目篩網過濾I次，經干燥后得銀杏粉； (3)銀杏蛋白粉制備將步驟(2)獲得的銀杏粉加入純凈水，按重量比為1:20的配料比混合，充分攪拌，用ImoL/L氫氧化鈉調節PH至6.6-7.2之間，浸泡3h后過濾,取濾液，以0.5moL/L鹽酸調節PH4-5之間，煮沸3h，靜置沉淀，除去上層泡沫和溶液后，得沉淀物，再將沉淀物，按重量比加入5倍量的純凈水，攪勻，冷至38-45°C時，離心甩干得濕銀杏蛋白，經干燥后得銀杏蛋白粉； (4)一次酶解將步驟(3)得到的銀杏蛋白粉溶解，溶解的條件為銀杏蛋白粉在水中的重量濃度為2%、控制溫度為50°C、PH值為6.5-6.9進行溶解后，先用中性蛋白酶進行酶解，其中條件為中性蛋白酶的重量為銀杏蛋白溶液重量的1.5-3%，PH值為6.6-6.8，保溫48-52°C，酶解時間為2.5-4小時，得中性蛋白酶酶解液，然后將酶解液再加入復合風味蛋白酶進行酶解，其中條件為:復合風味蛋白酶的重量為銀杏蛋白溶液重量的1.5-3%，PH值自然、保溫48-52°C，酶解時間為4.5-8.5小時，得酶解液，然后將酶解液以0.5moL/L鹽酸調節PH值在3.6-4.6之間，靜置使自然冷卻后，進行離心分離得上清液和沉淀物； (5)二次酶解將步驟(4)得到的上清液用復混蛋白酶進行第二次酶解，然后加熱至95°C滅酶，經濃縮、噴霧干燥得銀杏糖肽；將步驟(4)得到的沉淀物用復混蛋白酶進行第二次酶解，然后加熱至95°C滅酶，經離心分離取上清液進行噴霧干燥得氨基酸平衡肽；取沉淀物進行真空干燥得銀杏多肽。
2.如權利要求1所述制備銀杏蛋白肽的方法，其特征在于所述步驟(5)中的上清液酶解條件是PH值為6.6-6.8、溫度為48-52°C，酶解時間為6.5-8.5小時；酶解時，復混蛋白酶的重量為上清液重量的1.55-2.6%。
3.如權利要求1所述制備銀杏蛋白肽的方法，其特征在于所述步驟(5)中沉淀物酶解時的投料重量濃度為1.5-2% ;其中酶解條件是溫度為48-52°C，酶解時間為7-9小時；酶解時，復混蛋白酶的重量為沉淀物溶解液重量的0.75-1.56%。
4.如權利要求1所述制備銀杏蛋白肽的方法，其特征在于所述步驟(5)中的復混蛋白酶，是由中性蛋白酶與復合風味蛋白酶按1:1.5重量份復配混合制得。
5.一種如權利要求1所述的方法獲得銀杏糖肽產品。
6.一種如權利要求1所述的方法獲得氨基酸平衡肽產品。
7.—種如權利要求1所述的方法獲得銀杏多肽產品。
【文檔編號】A23J3/14GK103609831SQ201310580225
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月19日 優先權日:2013年11月19日
【發明者】張志年, 其他發明人請求不公開姓名 申請人:徐州綠之野生物食品有限公司