本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種枸杞多糖果蜜及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：蜂蜜是一種天然食品，在漢代已作為普遍的飲品。蜂蜜始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，蜂蜜是由單糖類的葡萄糖和果糖構(gòu)成，可以被人體直接吸收，而不需要酶的分解。蜂蜜具有保健功能，還具有藥效功效，中國藥典2015版：“功能：補(bǔ)中，潤燥，止痛，解毒；外用生肌斂瘡。主治：脘腹虛痛，肺燥干咳，腸燥便秘，解烏頭類藥毒；外治瘡瘍不斂，水火燙傷。”柴達(dá)木枸杞種植基地位于柴達(dá)木盆地東南部，受降水量少、日照時(shí)間長、晝夜溫差大等氣候特征影響，產(chǎn)出的枸杞以顆粒大、含糖量高而著稱。經(jīng)專家研究，柴達(dá)木枸杞年均日照時(shí)長達(dá)3144小時(shí)，晝夜溫差12℃，方圓150公里生態(tài)環(huán)境潔凈，水源、土壤無污染、無農(nóng)藥和重金屬殘留。枸杞為茄科枸杞屬植物。枸杞性平、味甘、入肝腎二經(jīng)。功能補(bǔ)肝腎、監(jiān)筋骨、補(bǔ)血液、潤肺益氣、助陽。枸杞是我國重要的“藥食同源”植物，具有明目定神，美容養(yǎng)顏，滋補(bǔ)肝腎，強(qiáng)壯筋骨的功能，諾木洪枸杞果粒大、果甜、籽少、色鮮，富含多種生物活性物質(zhì)，含有人體所需的18種氨基酸、豐富的還原糖、維生素以及鈣、磷、鐵等營養(yǎng)成分，并含鍺、硒、酮等具有抗癌、抗衰老、美容等功效的微量元素，具有極高的藥用價(jià)值。枸杞多糖是一種水溶性多糖，是枸杞中最主要的活性成分，研究表明枸杞多糖具有促進(jìn)免疫、抗衰老、抗腫瘤、清除自由基、抗疲勞、抗輻射、保肝、生殖功能保護(hù)和改善等作用。然而，現(xiàn)有技術(shù)中缺乏對(duì)枸杞同源產(chǎn)品的深度開發(fā)和應(yīng)用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種枸杞多糖果蜜及其制備方法和應(yīng)用。一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜和枸杞多糖，所述枸杞果蜜為枸杞單花蜜。進(jìn)一步，一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，所述枸杞多糖果蜜包括按重量份的枸杞果蜜1份和枸杞多糖0.01-0.5份，所述枸杞果蜜為枸杞單花蜜。一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，所述枸杞果蜜具有以下特征：1)為青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的枸杞單花蜜；2)顯微觀察每個(gè)視野圖不低于13個(gè)枸杞花粉粒；3)紅外譜圖在波長3600-3000cm-1處出現(xiàn)寬而圓的強(qiáng)峰(-oh締合峰)，在波長2933cm-1處出現(xiàn)中強(qiáng)峰(c-h伸縮振動(dòng))，在1634-1633cm-1左右出現(xiàn)中強(qiáng)峰(c＝o伸縮振動(dòng))，在1060cm-1左右出現(xiàn)強(qiáng)峰(c-o伸縮振動(dòng))；4)鈣元素含量不低于100mg/kg；5)還原糖不低于75％；5)5-羥甲基糠醛不超過0.0075(mg/kg)。6)含水量不超過12％。thermofisher傅立葉紅外光譜儀nicoletis50，從圖2看出，枸杞蜂蜜的紅外譜圖在波長3600-3000cm-1處出現(xiàn)寬而圓的強(qiáng)峰(-oh締合峰)，在波長2933cm-1處出現(xiàn)中強(qiáng)峰(c-h伸縮振動(dòng))，在1634-1633cm-1左右出現(xiàn)中強(qiáng)峰(c＝o伸縮振動(dòng))，在1060cm-1左右出現(xiàn)強(qiáng)峰(c-o伸縮振動(dòng))。一種枸杞多糖果蜜制備方法，其特征在于：包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)取上述枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍3-8小時(shí)，粉碎至顆粒度為40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入50-95％的乙醇6-10倍回流提取3次，每次1-6小時(shí)，提取液用于其它產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑捎贸R界二氧化碳萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀繛?-10倍，每次提取2-8小時(shí)，提取1-3次，提取液備用；6)合并d5步驟所得提取液，減壓濃縮至含水量10％以下得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和d6步驟所得枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得枸杞多糖果蜜，分裝即可。上述方法制得的枸杞多糖果蜜在人體免疫調(diào)節(jié)和抗氧化中的應(yīng)用。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明在原料全部采用青海諾木洪的特色資源，無污染；為純天然食品，含果糖、葡萄糖、多糖，無防腐劑、無化學(xué)添加劑；具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功效。本發(fā)明利用諾木洪枸杞蜜源，以枸杞單花蜜果蜜為原料，配伍同源基地枸杞果實(shí)提取的枸杞多糖，篩選了枸杞果糖、葡糖糖多糖為主，花、果、蜜完美結(jié)合的最佳配方。為枸杞綜合開發(fā)研究，枸杞多糖果蜜利用了枸杞提取的多糖成分，不同產(chǎn)品利用了枸杞的其它成分，提高枸杞附加值，具有廣闊的市場前景。附圖說明圖1為枸杞花蜜顯微視野圖圖2為枸杞花蜜紅外譜圖圖3為枸杞多糖果蜜對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響效果圖圖4為不同干燥方法枸杞多糖果蜜frap亞鐵離子還原能力圖具體實(shí)施方式下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.01份組成。一種枸杞多糖果蜜的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍3小時(shí)，粉碎至粒度為40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入50％的乙醇6倍回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀?倍，每次提取2小時(shí)，提取1次；6)合并d5步驟所得提取液，減壓濃縮至含水量10％即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，分裝即可。實(shí)施例2一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.05份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍8小時(shí)，粉碎，粒度在40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入95％的乙醇10倍回流提取2次，每次6小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀?0倍，每次提取8小時(shí)，提取2次；6)合并d5步驟提取液，減壓濃縮至含水量8％即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)施例3一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.1份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍6小時(shí)，粉碎，粒度在40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入85％的乙醇8倍回流提取2次，每次4小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將上述殘?jiān)兯崛。铀?倍，每次提取4小時(shí)，提取3次；6)合并上述提取液，減壓濃縮至含水量9％即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)施例4一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.5份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍4小時(shí)，粉碎至粒度為40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入75％的乙醇7倍回流提取2次，每次2小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀?倍，每次提取3小時(shí)，提取2次；6)合并上述提取液，減壓濃縮至含水量7％以下即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)施例5一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.3份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍7小時(shí)，粉碎至粒度為40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入65％的乙醇9倍回流提取1次，每次2小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)盟崛。铀?倍，每次提取7小時(shí)，提取2次；6)合并d5步驟提取液，減壓濃縮至含水量6％以下即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和d6步驟所得枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)施例6一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.09份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍6.5小時(shí)，粉碎，粒度在40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入85％的乙醇7倍回流提取3次，每次2.5小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀?倍，每次提取4.5小時(shí)，提取3次；6)合并d5步驟提取液，減壓濃縮至含水量8％以下即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)施例7一種枸杞多糖果蜜，其特征在于，其組分中包括枸杞果蜜、枸杞多糖，按重量份計(jì)枸杞果蜜1份，枸杞多糖0.4份組成。一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用枸杞多糖果蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)取產(chǎn)自青海省海西蒙古族藏族自治州都蘭縣諾木洪的干燥枸杞，抽樣測定其多糖含量，將多糖含量不低于5％的枸杞備用；2)將上述達(dá)到含量的枸杞清洗干凈，置-80℃快速冷凍3小時(shí)，粉碎，粒度在40目；3)將上述粉碎的枸杞粉加入95％的乙醇10倍回流提取1次，每次6小時(shí)，提取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d3步驟所得殘?jiān)栏桑R界萃取，萃取液用于其他產(chǎn)品，殘?jiān)鼈溆茫?)將d4步驟所得殘?jiān)眉兯崛。铀?倍，每次提取6小時(shí)，提取3次；6)合并d5步驟提取液，減壓濃縮至含水量7％以下即得枸杞多糖濃縮液；7)按配方稱取枸杞果蜜和枸杞多糖濃縮液，混合均勻，即得本發(fā)明所述枸杞多糖果蜜，分裝即可。實(shí)驗(yàn)例從枸杞多糖免疫調(diào)節(jié)和抗氧化能力方面進(jìn)行了研究。研究表明枸杞多糖具有促進(jìn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的功能；能明顯增強(qiáng)dpph清除自由基能力，明顯提高frap亞鐵離子還原能力。1.1枸杞多糖果蜜對(duì)balb/c小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響(1)受試藥物：枸杞多糖果蜜(2)試劑與耗材：小鼠脾臟淋巴細(xì)胞提取試劑盒(上海生工生物工程有限公司)(3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：balb/c小鼠為3周—4周齡。飼養(yǎng)條件，室內(nèi)恒溫取暖裝置，室內(nèi)溫度控制在18～25℃之間，機(jī)械通風(fēng)，空氣清潔度良好，濕度適當(dāng)，自然光照，自由飲水(自來水)。小鼠生長維持顆粒飼料(ii)，購自北京科奧協(xié)力飼料有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)為：scxk(京)2008-2010。(4)使用儀器：多功能酶標(biāo)儀(perineimerenspire公司)；ml104電子天平(梅特勒托利多儀器(上海)有限公司)；石英自動(dòng)雙重純水蒸餾器(1810-b型常州澳華儀器有限公司)；離心機(jī)(sigma公司)；高壓滅菌鍋(國產(chǎn))。1.2實(shí)驗(yàn)方法提取balb/c小鼠脾臟淋巴細(xì)胞；制備小鼠脾臟組織單細(xì)胞懸液；分離小鼠脾臟淋巴細(xì)胞；計(jì)數(shù)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞；統(tǒng)計(jì)。1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)分為空白組、枸杞多糖果蜜高劑量組(800ug/ml)、枸杞多糖果蜜中劑量組(400ug/ml)、枸杞多糖果蜜低劑量組(200ug/ml)。作用時(shí)間分別為24h。結(jié)果見圖3。與空白組比較，不同濃度枸杞多糖凍干粉和蜂蜜的混合物對(duì)balb/c小鼠脾臟淋巴細(xì)胞作用24h小時(shí)后，枸杞多糖果蜜高劑量組、枸杞多糖果蜜中劑量組對(duì)balb/c小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，枸杞多糖果蜜低劑量組未見明顯變化。枸杞多糖果蜜高劑量組對(duì)balb/c小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的增殖效果最為明顯，增殖效果與枸杞多糖的濃度呈正相關(guān)。2.1枸杞多糖體外抗氧化實(shí)驗(yàn)(1)受試藥物：枸杞多糖果蜜；(2)試劑與耗材：dpph(1,1-二苯基-2-苦基肼，上海源葉生物科技有限公司)，總抗氧化能力試劑盒(frap法，上海碧云天生物技術(shù)有限公司)，總抗氧化能力試劑盒(abts法，上海碧云天生物技術(shù)有限公司)(3)儀器：多功能酶標(biāo)儀(perineimerenspire公司)；ml104電子天平(梅特勒托利多儀器(上海)有限公司)；石英自動(dòng)雙重純水蒸餾器(1810-b型常州澳華儀器有限公司)；離心機(jī)(sigma公司)；2.2實(shí)驗(yàn)方法(1)dpph清除自由基實(shí)驗(yàn)將500μl體積的樣品與99.5％乙醇和125μl的dpph乙醇溶液進(jìn)行混合。在517nm下，使用多模板讀數(shù)器測量dpph自由基的還原。dpph自由基清除活性計(jì)算公式如下：dpph自由基清除活性(％)＝(樣品的1-a517/對(duì)照的樣品的a517)×100混合物的較低吸光度表明其具有較高的dpph自由基清除活性。(2)frap亞鐵離子還原能力實(shí)驗(yàn)按照frap試劑盒步驟操作，最后使用多功能酶標(biāo)儀在593nm處讀取吸光度。為了更好的進(jìn)行比較，實(shí)驗(yàn)采用水溶性維生素e類似物trolox(6-羥基-2,5,7,8-四甲基苯并二氫吡喃-2-羧酸)作為對(duì)照樣品。結(jié)果表示為每克樣品中feso4·7h2o的當(dāng)量(mmol)。每個(gè)樣品進(jìn)行三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)。2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)dpph清除自由基實(shí)驗(yàn)結(jié)果枸杞多糖果蜜dpph清除自由基的影響樣品dpph清除自由基能力(％)枸杞多糖果蜜1號(hào)42.11±24.20枸杞多糖果蜜2號(hào)89.84±4.49枸杞多糖果蜜2號(hào)dpph清除自由基能力最強(qiáng)。(2)frat總抗氧化能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4結(jié)果表明：枸杞多糖果蜜1號(hào)的frap亞鐵離子還原能力最強(qiáng)。當(dāng)前第1頁12