專利名稱：一種溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種載藥微球的制備方法，具體以聚(α -氰基丙烯酸異丁酯)為載體材料，包封溶菌酶的載藥微球及其制備方法。
背景技術：
溶菌酶(lysozyme)是一種專門作用于微生物細胞壁的水解酶，能切斷肽聚糖中 N-乙酰胞壁酸與N-乙酰氨基葡萄糖之間的β _1，4糖苷鍵之間的連接，破壞肽聚糖支架，在內部滲透壓的作用下細胞脹裂，引起細菌裂解。溶菌酶在醫學上具有抗菌消炎、抗病毒、增強免疫力等作用，但其半衰期短，需頻繁注射給藥，患者順應性低；且其分子量大、擴散差、 分配系數小，使其難以通過生物屏障及脂質膜，生物利用率低。聚(α -氰基丙烯酸酯)微球由于其具有高吸附能力、釋藥持續性、低毒性、優良的生物降解性和生物相容性等優點，使它非常適宜作為藥物傳輸載體將藥物傳送到身體的各個組織器官。利用聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)為藥物載體材料，制備粒徑小于200nm的微球，既可以轉運藥物通過血腦屏障， 又可以達到緩釋的效果。中國專利CN1840184A由溶菌酶、磷脂和親脂性穩定劑制備了溶菌酶脂質體，包封率高，緩釋性能好，殺菌效果顯著，但在制備過程中需用有機溶劑，對環境有一定的危害。雖然中國專利CN1425464A、CN1732962A、CN1416812A以水為分散介質、聚氰基丙烯酸烷基酯為載體材料，制備了負載胰島素、阿霉素或絲裂霉素的載藥微球，但是未見負載溶菌酶藥物的聚氰基丙烯酸烷基酯載藥微球。本發明以聚(α -氰基丙烯酸異丁酯)為載體材料，泊洛沙姆 188(p0l0Xamer-188)、葡聚糖70 (Dextran70)或兩者合用為表面活性劑，采用乳化聚合法制備溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球。包封率可達60%以上，載藥率可達6.0% 以上，平均粒徑170nm左右，微球表面光滑，緩釋性能較好，并且生產工藝簡單，便于工業化生產。

發明內容
本發明的目的在于提供一種大小均勻、能通過血腦屏障、使溶菌酶平穩釋放、生物利用度高的溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球的制備工藝。為了實現上述目的，本發明按以下組分(質量分數)進行反應α-氰基丙烯酸異丁酯0.8 1.2
表面活性劑0.8 1.2
溶菌酶0.04 0.1
去離子水100
pH值調節劑3 8本發明使用的表面活性劑為泊洛沙姆188 (poloxamer-188)、葡聚糖 70 (Dextran70)或兩者合用。本發明使用的pH值調節劑為0. Imol/L的鹽酸和0. lmol/L的氫氧化鈉。本發明還提供一種上述微球的制備方法，該方法具體工藝步驟如下稱取一定量的泊洛沙姆188 (poloxamer-188)，葡聚糖70 (Dextran70)或兩者按一定比例加入去離子水中，待其充分溶解后，用0. lmol/L的鹽酸溶液調節體系pH值在2. 5左右，800r/min磁力攪拌下用注射器緩慢滴加α _氰基丙烯酸異丁酯單體，繼續攪拌2 池， 用0. lmol/L的氫氧化鈉溶液調節體系pH值在6. 5，加入一定量的溶菌酶，室溫繼續攪拌 3 4h后用0. 45 μ m孔徑的微孔濾膜過濾，所得乳白色懸浮液離心、洗滌、真空冷凍干燥后， 最終得到溶菌酶/聚(α -氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球。本發明具有以下優點1)藥物活性成分的分解慢，活性成分釋放持久；2)聚 (α -氰基丙烯酸異丁酯)吸附能力較強，藥物吸附在微球上不易受到化學、光和微生物等因素影響而使藥物分解；3)使用去離子水做溶劑，減少有機溶劑的危害；4)藥物能通過血腦屏障，提高藥物的生物利用度。


圖1為溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球的透射電子顯微鏡照片。圖2為溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球的掃描電子顯微鏡照片。圖3為溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球的粒徑分布圖。
具體實施例方式以下通過具體實施例對本發明進行更詳細的說明。實施例僅是對本發明的一種說明，而不構成對本發明的限制。實施例1稱取泊洛沙姆188 (poloxamer-188) 0. 6g加入50ml去離子水中，待其充分溶解后， 用0. lmol/L的鹽酸溶液調節體系pH值2.0，800r/min磁力攪拌下用注射器緩慢滴加α-氰基丙烯酸異丁酯單體0.6g，繼續攪拌池，用0. Imo 1/1的氫氧化鈉溶液調體系？!1值6.5，加入40mg溶菌酶，室溫繼續攪拌3 4h后用0. 45 μ m孔徑的微孔濾膜過濾，所得乳白色懸浮液離心、洗滌、真空冷凍干燥后，最終得到溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球。該產品的包封率55. 23 %，載藥率6. 30 %，平均粒徑170nm，粒徑分散系數0. 053， 溶菌酶活性基本保持不變，在生理鹽水中藥物緩釋可達30h以上(表1)。表1溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球的緩釋
權利要求
1.一種溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球，其特征在于組分(質量分數)為 α-氰基丙烯酸異丁酯0.8 1.2表面活性劑0.8 1.2溶菌酶0.04 0. 1。去離子水100ρΗ值調節劑3 8
2.根據權利要求1所述的溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球，其特征在于 所述的表面活性劑為泊洛沙姆188(p0l0Xamer-188)，葡聚糖70 (Dextran70)或兩者合用,
3.根據權利要求1所述的溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球，其特征在于所述的PH值酸性調節劑為0. lmol/L的鹽酸溶液。
4.根據權利要求1所述的溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球，其特征在于所述的PH值堿性調節劑為0. lmol/L的氫氧化鈉溶液。
5.一種制備上述溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)微球的方法，其特征在于包括以下步驟稱取一定量的泊洛沙姆188(poloxamer-188)，葡聚糖70(Dextran70)或兩者按一定比例加入去離子水中，待其充分溶解后，用0. lmol/L的鹽酸溶液調節體系ρΗ值在2. 5左右，800r/min磁力攪拌下用注射器緩慢滴加α _氰基丙烯酸異丁酯，繼續攪拌2 池，用 0. lmol/L的氫氧化鈉溶液調節體系ρΗ值在6. 5左右，加入一定量的溶菌酶，室溫繼續攪拌 3 4h后用0. 45 μ m孔徑的微孔濾膜過濾，所得乳白色懸浮液離心、洗滌、真空冷凍干燥后， 最終得到溶菌酶/聚(α -氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球。
全文摘要
本發明涉及一種溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球及其制備方法。技術特征在于組分為去離子水、表面活性劑、α-氰基丙烯酸異丁酯、溶菌酶、pH值調節劑。制備步驟是稱取定量的表面活性劑加入去離子水中，待其充分溶解后用pH值調節劑調節體系pH值在2.5左右，800r/min磁力攪拌下用注射器緩慢滴加α-氰基丙烯酸異丁酯，繼續攪拌一定時間后用pH值調節劑調節體系pH值在6.5左右，然后加入一定量的溶菌酶，繼續攪拌3～4h后用0.45μm孔徑的微孔濾膜過濾，所得懸浮液離心、洗滌、真空冷凍干燥后，最終得到溶菌酶/聚(α-氰基丙烯酸異丁酯)載藥微球。該微球表面光滑，粒徑大小分布均勻，包封率較高，緩釋時間較長，且制備方法簡單，周期性短，適合于工業化生產和應用。
文檔編號A61K47/32GK102552166SQ201210004189
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月9日 優先權日2012年1月9日
發明者夏宇正, 石淑先, 郭會芳, 陳曉農 申請人:北京化工大學