專利名稱：從草果中提取的活性成分及其在制備降糖藥品與食品中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種從草果中提取的活性成分及其在制備降糖藥品與食品中的應用。
背景技術：
我國糖尿病患者增長速度迅速，尤其中老年人群高血糖比例逐年増加。但我國降糖保健食品的開發卻相當滯后。西方國家的降糖保健食品已發展成為重要新興產業。美國毎年降糖保健食品市場銷售額高達25億 30億美元，品種達上百種之多。日本糖尿病發病率已接近4%，其相應的降糖保健食品產業也發展較迅速，2002年總銷售額就已突破1萬億日元，其中降血糖/減肥保健食品約占1/2份額。而在我國，1978年以前糖尿病的平均發病率低于1%，到2000年底已上升至3. 4%，短短20年間糖尿病發病率已翻了一番。現在，京滬地區糖尿病發病率甚至分別達到了 8%和11%。因此，降糖保健食品市場巨大，且具有龐大市場操作空間和消費需求，行業效益十分可觀。國際醫學界普遍認為，糖尿病人不僅應服降糖藥物控制過高的血糖，而且攝食某些特殊食品(保健食品)同樣能起到控制高血糖的效果。這類食物就是降糖功能性食品。目前國際市場上銷售中的降糖食品至少有上百種之多，其中在美國等西方國家銷售情況最好的4種降糖保健食品依次為苦瓜(主要活性成分為“苦瓜多肽”)；印度匙羹藤(主要成分為“匙羹藤酸”)；葫蘆巴豆(主要成分為葫蘆巴膠)；肉桂粉(主要成分為“桂皮酸”)。我國雖然已是糖尿病高發國，但國內尚未形成降糖保健品大市場。故開發新資源降糖保健食品在我國將有廣闊的市場前景。草果(Amomum tsao-ko Crevostet Lemarie)在我國云南、廣西、貴州等廣大地區都有種植，來源廣泛，作為食品香辛料和中草藥應用已有千年歷史。人們從草果精油中鑒定了近8 Q種化學成分，主要是1，8-桉油素、檸檬醛、香葉醇、反-2-十一烯醛、2-癸烯醛、β —菔烯等。目前未見有有關草果降糖作用的報道。

發明內容
本發明的目的是提供一種降糖效果好的從草果中提取的活性成分。本發明的另ー個目的是提供上述活性成分在制備降糖藥品與食品中的應用。本發明采取的技術方案
一種從草果中提取的活性成分，由如下方法得到經干燥的草果去皮后粉碎，用氯仿-甲醇-水體系萃取，萃取后經過濾除去殘渣，濾液經分液漏斗靜置分層，取下層濾液，濾液在30-40°C經真空濃縮得飽和濃縮液，將所述飽和濃縮液通過ニ氧化硅凝膠柱，并分別依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脫，取甲醇洗脫液經真空濃縮成飽和溶液后過ニ氧化硅凝膠柱，用氯仿-甲醇-水體系作洗脫劑進行洗脫，收集前60%洗脫液經真空濃縮至飽和，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋，得活性成分固體物。所述氯仿-甲醇-水體系中氯仿、甲醇和水的體積比為5 10 :1。
所述的從草果中提取的活性成分在制備降糖保健藥品及食品添加中的應用。所述的應用中所述活性成分的添加量不低于0.001 Wt %。本發明采用上述技術方案取得的有益效果本發明利用我國特產資源草果為原料，所提取的活性成分具有顯著的降血糖功效，其降糖效果優于肉桂粉(見圖1)，針對中老年血糖增高的人群，為市場提供有效的預防血糖增高的生物制劑，該活性成分可以與無機成型劑或有機成型劑配合，調配成各種常規的ロ服應用劑型，如膠囊、片劑、ロ服液等，也可以添加于各種食品當中制成各種功能性降糖食品。


圖1為草果粉與肉桂粉的降糖效果對比圖2為標準飼料和添加草果活性成分的實驗飼料抑制體重増加效果對比圖； 圖3為標準飼料和添加草果活性成分的實驗飼料降低血糖濃度效果對比圖。
具體實施例方式實施例1 草果活性成分的制備
(1)干燥的草果經去皮后，粉碎成100目以上粉末，取50g草果粉末，加入150ml氯仿、 300ml甲醇和30ml去離子水，在室溫下浸泡12小時后用均質機高速攪拌(轉數1600-20000 轉/分)5-10分鐘，然后用超聲波均質機均質10分鐘(功率為500-1000W)，靜置4小時以上，抽濾得濾液，濾液移至IL分液漏斗，振蕩1分鐘后靜置12小吋，使氯仿層(下層夜)與甲醇層(上層液)分開，上層液用IOOml氯仿分3次洗滌后與下層液合井，合并后的混合液加入 2g無水硫酸鈉干燥，過濾得濾液。濾渣重復上述步驟3-6次，合并每次萃取的氯仿層濾液。(2)將上述氯仿層濾液，經旋轉蒸發儀在30-40度濃縮后，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋。上述干燥后的固體再加入氯仿/甲醇混合溶液(氯仿甲醇=l:2》00ml 溶解，用均質機均質1分鐘后過濾，濾液移至分液漏斗，分液后取下層氯仿層液體經旋轉蒸發儀在40度以下濃縮后，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋。上述操作重復3次，制得提取物I。(3)將干燥的200-300目硅膠H500g，干硅膠的視密度在0. 4左右，加入干硅膠體積一倍的氯仿(氯仿用無水氯化鈣干燥，以除去醇和水，用玻璃棒充分攪拌，抽真空脫氣20分鐘，采用濕法灌柱(層析柱是直徑55mm長600ml的玻璃柱)。沉降完成后，最上層加入l-2cm 的石英砂，加入更多的氯仿，用雙聯球或氣泵加壓，直至流速恒定。柱床約被壓縮至9/10體積，最后用IOOOml正己烷置換柱中氯仿制成填充量為55mmX500mm的層析柱。(4)稱取步驟(2)中得到的提取物A 6g，加入適量無水甲醇溶解成飽和溶液緩慢從層析柱上端加入，待溶劑層下降至石英砂底面后，分別用1200ml氯仿、1000ml丙酮、 1200ml甲醇進行洗脫，收集甲醇洗脫液，經旋轉蒸發儀在30-40度下濃縮后，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋，得甲醇溶出物II。(5)將氯仿100ml、甲醇100ml、去離子水30ml混合，配成混合液，再將該混合液用氯仿稀釋10倍作為洗脫液。將上述甲醇溶出物B加入適量甲醇制成飽和溶液，緩慢從層析柱上端加入，待溶劑層下降至石英砂底面后，用上述配制的洗脫液進行淋洗，收集開始從層折柱流出的1500ml洗脫液，經旋轉蒸發儀在30-40度下濃縮后，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋，得具有紫外吸收特性的草果降糖活性成分，剰余的洗脫液中洗脫下來的主要為多糖組分。實施例2 含有草果活性成分的實驗飼料的制備
稱取如下質量百分比的組分淀粉47. 8%、干酪素20%、蔗糖15%、豬油6%、纖維素5%、混合礦物鹽4%、混合維生素2%、L-甲硫氨酸0. 2% ；以上原料經充分混合后，調制成標準飼料。 向每公斤標準飼料中加入50-500mg的實施例1中制得的草果降糖活性成分，配制成實驗飼料。將40只12周齡的ICR雄性小鼠隨機分配成A、B、C、D四組，每組10只，A組為對照組，供給標準飼料，B組供給添加甲醇溶出物II的實驗飼料，C組供給添加前60%洗脫液中得到的有紫外吸收特性的組分即草果活性成分，D組供給添加后40%洗脫液中得到的多糖組份。毎日平均每只小鼠供給4. 5g飼料，喂養90天，并每天觀察小鼠狀況，每周測一次體重，結果見圖2 (四組實驗數據的Spjotvoll/Moline test統計學分析得出的數據差異見表1，此試驗是在P<0. 05的情況下得出的。)喂養結束后，A組和C組小鼠經ニ氧化碳麻醉后采血，血液經冷凍離心分離，測量血液過氧化脂質(TBARS)和血糖濃度，實驗結果見圖3。表1圖2的Spjotvoll/^toline test統計學分析結果
權利要求
1.一種從草果中提取的活性成分，其特征在于其由如下方法得到經干燥的草果去皮后粉碎，用氯仿-甲醇-水體系萃取，萃取后經過濾除去殘渣，濾液經分液漏斗靜置分層，取下層濾液，濾液在30-40°C經真空濃縮得飽和濃縮液，將所述飽和濃縮液通過ニ氧化硅凝膠柱，并分別依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脫，取甲醇洗脫液經真空濃縮成飽和溶液后過ニ氧化硅凝膠柱，用氯仿-甲醇-水體系作洗脫劑進行洗脫，收集前60%洗脫液經真空濃縮至飽和，放入冷凍干燥機中冷凍干燥48-72小吋，得活性成分固體物。
2.根據權利要求1所述的從草果中提取的活性成分，其特征在于所述氯仿-甲醇-水體系中氯仿、甲醇和水的體積比為5 10 :1。
3.權利要求1所述的從草果中提取的活性成分在制備降糖保健藥品及食品添加中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于所述活性成分的添加量不低于0.001wt
全文摘要
本發明公開了一種從草果中提取的活性成分及其在制備降糖藥品與食品中的應用，所述活性成分是草果粉經氯仿-甲醇-水體系萃取后過二氧化硅凝膠柱，并分別依次用氯仿、丙酮、甲醇洗脫，取甲醇洗脫液過二氧化硅凝膠柱，用氯仿-甲醇-水體系進行洗脫得到的。該活性成分具有降糖作用，能制成降糖藥品和降糖保健食品。
文檔編號A61K36/9064GK102552791SQ20121001057
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月14日 優先權日2012年1月14日
發明者俞龍泉, 張文娜, 時偉, 段書德, 谷維娜, 韓愛云 申請人:石家莊學院