一種補骨脂提取物及其制備、應用的制作方法
【專利摘要】本發明屬于中藥提取【技術領域】，具體涉及一種補骨脂提取物及其制備、應用。該補骨脂提取物為補骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位，實驗證明補骨脂三個部位均有抗凝血作用，三個部位可單獨或組合用于制備抗凝血劑。
【專利說明】一種補骨脂提取物及其制備、應用
[0001]【技術領域】
本發明屬于中藥提取【技術領域】，具體涉及一種補骨脂提取物及其制備、應用。
[0002]【背景技術】
補骨脂Fructus為豆科植物補骨脂corylifolia Linn.的干燥果實，又名破故紙、黑故子等，為常用中藥，味辛、苦，性溫，歸腎、脾經，具有補腎助陽，納氣平喘，溫脾止瀉的功效?，F代研究表明，補骨脂含黃酮類、香豆素類、脂肪酸類和單萜酚類等多種化學成分，具有抗氧化、降血糖、保肝、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、雌激素樣和抑制葡萄糖苷酶等作用。
[0003]正常人由于有完整的血液凝固系統和抗凝及纖溶系統，所以血液在血管內既不凝固也不出血，始終自由流動完成其功能，但當機體處于高凝狀態或抗凝及纖溶減弱時，則發生血栓栓塞性疾病。使用抗凝血藥可以防治血管內栓塞或血栓形成的疾病，預防中風或其它血栓性疾病。目前常用的抗凝血藥有肝素、香豆素類(雙香豆素、華法林和新抗凝等)和抗血小板藥(阿司匹林和潘生丁等)，此外蛇毒溶栓劑如去纖酶、抗栓酶和清栓酶可溶解已形成的血栓使血管再通。其中肝素對凝血過程的各環節均有抑制作用，主要依賴于抗凝血酶III;香豆素類是維生素K拮抗劑，在肝臟抑制維生素K由環氧化物向氫醌型轉化，從而阻止維生素K的反復利用，影響含有谷氨酸殘基的凝血因子I1、νπ、IX、X的羧化作用，使這些因子停留于無凝血活性的前體階段，從而影響凝血過程；抗血小板藥通過抑制血小板環氧化酶的作用，并可防 止血小板環氧化酶將花生四烯酸轉化成前列腺素中間體，從而起到防止血栓的形成。
[0004]目前尚無補骨脂對血漿復鈣時間及體外溶栓作用的報道。
[0005]
【發明內容】

本發明的目的在于提供一種有抗凝血作用的補骨脂提取物，同時提供該提取物的制備方法和應用。
[0006]本發明采用以下技術方案:
一種補骨脂提取物，為補骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位。
[0007]所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指將補骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
[0008]所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指將補骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
[0009]補骨脂甲醇浸膏的制備方法為:補骨脂粉碎后，用甲醇(90% ν/ν以上)浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、過濾、濃縮得甲醇浸膏。
[0010]甲醇浸提時采用室溫冷浸的方式。
[0011]補骨脂提取物的制備方法，將補骨脂甲醇浸膏分散于(75-85%v/v)甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，所得石油醚萃取物即為石油醚部位，所得乙酸乙酯萃取物即為乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即為正丁醇部位。
[0012]補骨脂提取物在抗凝血方面的應用。[0013]補骨脂提取物在制備溶栓(或纖溶)藥物方面的應用。
[0014]本發明從補骨脂中提取出了石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位，并采用體外血漿復鈣時間法對三個部位的體外凝血效果進行了考察，結果表明，補骨脂三個部位均有抗凝血作用，尤以正丁醇部位的抗凝血作用最強，石油醚部位、乙酸乙酯部位的抗凝血作用稍弱于正丁醇部位?？梢?，補骨脂的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位三個部位可單獨或組合用于制備抗凝血劑。
[0015]本發明還以尿激酶為陽性對照，利用纖維蛋白平板法考察了補骨脂三個部位的溶栓作用，結果表明，正丁醇部位有一定的溶栓作用，可應用于制備溶栓(或纖溶)藥物藥物。
[0016]【專利附圖】

【附圖說明】
圖1為系列濃度尿激酶標準曲線。
[0017]【具體實施方式】
實施例1補骨脂提取部位的制備
補骨脂提取部位由以下方法提取得到:取補骨脂，用甲醇室溫冷浸提取3次，每次3 d，提取液合并、過濾、濃縮，得甲醇總浸膏。將甲醇總浸膏分散于75%甲醇水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取3次，濃縮，回收溶劑，分別得到補骨脂石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
[0018]實施例2補骨脂提取部位的制備
補骨脂提取部位由以下方法提取得到:取補骨脂，用甲醇室溫冷浸提取2次，每次4 d，提取液合并、過濾、濃縮，得甲醇總浸膏。將`甲醇總浸膏分散于85%甲醇水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取5次，濃縮，回收溶劑，分別得到補骨脂石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
[0019]效果實驗I
補骨脂三個部位體外抗凝血活性應用
補骨脂三個部位(實施例1石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位)對血漿復鈣時間的影響的實驗。
[0020]方法:家兔體外血漿復鈣時間
儀器和材料:TGL-16高速離心機(江蘇金壇中大儀器廠)、秒表計時器、LRH-150生化培養箱(上海一恒科技有限公司)、注射生理鹽水(山東齊都藥業有限公司，2012053107)、維生素kl注射液(天津藥業集團新鄭股份有限公司，1109051)、注射用燈盞花素(湖南恒生制藥有限公司，20110202)、38 g/L枸櫞酸鈉溶液(自制)、2.775 g/L氯化鈣溶液(自制)。
[0021]實驗動物:獺兔，雄性，體重2.0-2.5 kg。
[0022]樣品溶液配制:分別稱取補骨脂三個部位各I mg，分別加入溶劑(乙醇:丙二醇:生理鹽水體積比=1:1:3) I mL，混懸，超聲至溶解或分散均勻，備用。
[0023]藥品溶液配制:量取一定體積的維生素kl注射液，加入一定體積的溶劑(乙醇:丙二醇:生理鹽水體積比=1:1:3)，配成維生素kl濃度為I mg/mL溶液；稱取注射用燈盞花素I mg，加入溶劑(乙醇:丙二醇:生理鹽水體積比=1:1:3) I mL，混懸，超聲至溶解或分散均勻，備用。
[0024]取家兔耳緣靜脈取血3.6 mL,加38 g/L枸櫞酸鈉溶液400 μ L,混勻，1000 r/min離心15 min,取上清液(下述血衆)備用。樣品組加入血衆0.1 mL及樣品溶液各0.1 mL,陽性對照組加入血漿0.1 mL及藥品溶液0.1 mL，空白組加入血漿0.1 mL及空白溶劑(乙醇:丙二醇:生理鹽水體積比=1:1:3) 0.1 mL。各組于37°C溫育I min后分別向每管加入2.775 g/L CaCl2溶液0.1 mL，計時，直到檢測到彌漫性蛋白顆粒時停止計時，維生素K1、燈盞花素對照組重復3次，樣品組重復6次，求算術平均值和標準差，即為血漿復鈣時間。結果采用平均值和標準差表示，采用SPSS17.0軟件單因素方差分析法(One-WayANOVA)進行統計學分析，測定結果詳見表1。
[0025]表1
【權利要求】
1.一種補骨脂提取物，其特征在于:為補骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位。
2.如權利要求1所述的補骨脂提取物，其特征在于:所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指將補骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
3.如權利要求1所述的補骨脂提取物，其特征在于:所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指將補骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
4.如權利要求1-3任一項所述的補骨脂提取物，其特征在于:補骨脂甲醇浸膏的制備方法為:補骨脂粉碎后，用甲醇浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、過濾、濃縮得甲醇浸膏。
5.制備權利要求1所述的補骨脂提取物的方法，其特征在于:將補骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，所得石油醚萃取物即為石油醚部位，所得乙酸乙酯萃取物即為乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即為正丁醇部位。
6.如權利要求5所述的補骨脂提取物的制備方法，其特征在于:所述補骨脂甲醇浸膏的制備方法為:補骨脂粉碎后，用甲醇浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、過濾、濃縮得甲醇浸膏。
7.權利要求1-4任一項所述的補骨脂提取物在抗凝血方面的應用。
8.權利要求1-4任一項所述的補骨脂提取物在制備溶栓藥物方面的應用。
【文檔編號】A61P7/02GK103623045SQ201310540110
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月5日 優先權日:2013年11月5日
【發明者】康文藝, 張偉, 尹震花, 彭濤 申請人:黃河科技學院