脈絡寧酚及其制備方法和用途
【專利摘要】本發明涉及醫藥【技術領域】，提供了一種具有治療心血管疾病的酚類新化合物——脈絡寧酚(1-(7-甲氧基乙基)-3，4-鄰苯二酚)(1-(7-methoxy?ethyl)-3，4-catechol)，結構式如下：。本發明還涉及該化合物的制備方法及其該化合物具有直接抑制LPS誘導的NO釋放增加，此結果與脈絡寧酚抑制LPS誘導的RAW264.7細胞的生長和增殖活性有關，0.1μM吲哚美辛抑制率達到63.1％，而0.625μM脈絡寧酚劑量組抑制率與其基本持平，達到59.7％，由此推測脈絡寧酚具有更好的抗炎活性，可用于制備治療心血管疾病的藥物。
【專利說明】脈絡寧酚及其制備方法和用途
一、【技術領域】:
[0001]本發明涉及醫藥【技術領域】，是一種具有治療心血管疾病的酚類新化合物一脈絡寧酚(1-(7-甲氧基乙基)-3，4-鄰苯二酚)的制備方法和在醫藥領域中的治療心血管疾病的用途。具體涉及從脈絡寧注射液中提取分離得到的一種酚類新化合物，該化合物具有直接抑制LPS誘導的NO釋放增加，此結果與脈絡寧酚抑制LPS誘導的RAW264.7細胞的生長和增殖活性有關，0.1 μ M吲哚美辛抑制率達到63.1 %，而0.625 μ M脈絡寧酚劑量組抑制率與其基本持平，達到59.7%，由此推測脈絡寧酚具有更好的抗炎活性，可用于制備治療心血管疾病的藥物。
二、技術背景:
[0002]中藥復方制劑脈絡寧注射液是在著名醫方“四妙勇安湯”臨床應用的基礎上研究開發出來的、具有自立知識產權的，并于1985年正式批準生產的中藥復方靜脈注射劑，由中藥石斛、玄參、牛膝、金銀花、山銀花經科學提取精制而成。具有活血化淤、行氣止痛、養陰通絡和補益肝腎的功效，主要用于治療缺血性中風急性期、血栓閉塞性脈管炎、下肢深靜脈血栓形成、動脈硬化性閉塞癥、腦梗塞、心絞痛、心肌梗死、血液循環障礙及其后遺癥等疾病，總有效率可達94.5%，與同類藥品比較具有見效快、療效高、療程短、價格低廉、副作用少、安全性高等優點。
[0003]單核-巨噬細胞包括骨髓中的前單核細胞、外周血中的單核細胞、以及組織內的巨噬細胞(:Μφ:)。Μφ主要來源于血液中的單核細胞，單核-巨噬細胞是自體重要的免疫細胞，具有抗感染、抗腫瘤和免疫調節等重要作用。當機體遭受細菌、病毒或異物攻擊，以及人體產生的衰老、損傷細胞和壞死組織等刺激后，巨噬細胞被激活，進入相應的組織中發揮強大的吞噬和分泌功能，吞噬死亡的細胞和侵入體內的細菌，在免疫反應中起重要作用。所以，單核-巨噬細胞又被譽為“人體健康的衛士”。然而巨噬細胞也促進了許多疾病的發生發展。動脈粥樣硬化斑塊的形成是許多炎癥反應激活的結果，包括單核細胞進入血管壁并被激活，內皮細胞激活，細胞因子和趨化因子等炎癥介質上調。Hosono M等研究證實，人冠狀動脈粥樣硬化斑塊內含大量巨噬細胞和激活的T淋巴細胞，尤其是在不穩定心絞痛的斑塊內。由巨噬細胞表達的組織因子和基質金屬蛋白酶，可致纖維帽消化和斑塊破裂，脫落的斑塊易于形成血栓，堵塞冠脈血管，造成急性心肌梗塞。因此，研究影響炎癥過程中巨噬細胞活力的藥物，對于防治高血壓、血脂紊亂等代謝性疾病具有重要的意義。
三、
【發明內容】
:
[0004]本發明提供一種具有顯著抑制LPS誘導的巨噬細胞中一氧化氮(NO)的產生等作用的酚類新化合物——脈絡寧酚的制備方法和在醫藥領域中治療心血管疾病的用途。
[0005]本發明公開了該化合物的結構式(見摘要附圖)
[0006]分子式為=C9H12O3,不飽和度為4,分子量:168。
[0007]命名為:脈絡寧酌.(1_ (7_甲氧基乙基)_3，4_鄰苯二酌.)。[0008]本發明中上述化合物的制備方法如下:
[0009]其特征在于以脈絡寧注射液為原料，經反復通過硅膠或球形硅膠、SephadexLH-20(Sep.)凝膠柱層析、反相材料ODS中的一種或幾種柱層析和重結晶等手段分離純化得到該化合物。
[0010]本發明的新化合物及其衍生物與醫學上可接受的藥用輔料組成藥物制劑用于治療心血管疾病。可制備的劑型有:片劑、膠囊劑、顆粒劑和注射劑。
四、【專利附圖】

【附圖說明】:
[0011]以下圖可作為附件材料上報。
[0012]圖1、化合物的1H-NMR譜圖2、化合物的13C-NMR譜
[0013]圖3、化合物的1H-1H COSY的譜圖4、化合物的HSQC譜
[0014]圖5、化合物的HMBC譜圖6、化合物的ROESY譜
[0015]圖7、化合物的ES1-MS譜
五、【具體實施方式】:
[0016]結合【具體實施方式】對本發明作進一步說明，但本發明的內容并不僅僅限于所列舉的實施方式。
[0017]實施例1.從脈絡寧注射液中分離和鑒定該新化合物
[0018]開啟脈絡寧注射液700支約7000mL，經S印hadex LH-20柱(7.5 X 120cm)，50%乙醇洗脫，共收集10個流份，流份1、2色素重，流份3、4、5分別反復經硅膠柱、S^hadex LH-20柱、反相柱層析從脈絡寧注射液中得到該單體化合物，通過理化性質、波譜方法鑒定為脈絡寧酚，經文獻檢索該化合物是新化合物。
[0019]該化合物結構經核磁共振譜鑒定如下:
[0020]無色晶體，刮出后為白色粉末，易溶于甲醇、丙酮等有機溶劑。TLC濃硫酸-香草醛顯淡紫色(加熱)，FeCl3顯色反應呈陽性，說明含有酚羥基。ES1-MS顯示化合物的分子離子峰為166.9 ([M-H] _)，335 ([2M-H] 0，高分辨MS顯示的準分子離子峰為167.0757 ([M-H]-)，計算值為167.0758，計算出其分子量為168，結合碳譜和氫譜的碳氫信號數據得出該化合物的分子式為C9H12O3，不飽和度為4。
[0021]1H-NMR(CD3OD, 500MHz, 8，ppm)的放大圖，三個氫原子信號 6:6.73 (1H, d，Ja =8.1),6.61 (1H，dd，Ja = 2.0,8.1), 6.74 (1H，d，Ja = 2.1),從化學位移及耦合關系和裂分規律上看，這三個氫原子都是苯環上ABX系統的氫原子信號，進而確定了這三個氫原子的位置。
[0022]根據HSQC譜得到其對應的碳原子的化學位移分別為S 6.73的氫和S 116.1的碳直接相連；S 6.61的氫和S 119.1的碳直接相連；S 6.74的氫和S 114.2的碳直接相連。
[0023]氫譜中有化學位移為3.16且為單峰的三個氫原子,顯示化合物中有甲氧基。氫譜中化學位移為4.16的單個氫原子為四重峰，Ja = 6.6HZ，說明其碳原子應該與一個甲基相連，甲基三個氫的化學位移為1.35，二重峰，Ja = 6.5HZ。而且1H-1H COSY相關譜顯示的6 4.16 (lH，q，Ja = 6.6Hz)與 6 1.35 (3H, d, Ja = 6.5Hz)有相關，進一步證實了化合物中存在與一個甲基相連的叔碳原子。HSQC譜顯示5 4.16的氫與5 80.7的碳直接相連，6 1.35的氫與δ 23.9的碳直接相。
[0024]HMBC譜中顯示甲氧基氫原子和叔碳原子明顯相關，與甲基碳原子弱相關，推測甲氧基與叔碳原子相連；ROESY譜的δ 4.16氫原子和δ 3.16氫原子相關說明甲氧基氫原子和叔碳氫原子空間上接近，從而進一步證實了甲氧基與叔碳原子相連。所以，可以確定化合物的叔碳原子與一個甲氧基和一個甲基相連。
[0025]HMBC譜顯示連接在叔碳原子上δ 4.16的氫原子與苯環上化學位移為119.1和114.2兩個碳原子明顯相關，推測叔碳原子連接在這兩個碳原子之間的苯環碳原子上；ROESY譜可以看出，化學位移δ 4.16氫原子和δ 6.61的氫原子相關，δ 4.16氫原子和δ 6.74的氫原子相關，也在空間上進一步證實了這一點。
[0026]根據分子式算出還剩兩個羥基，只能分別連接在苯環剩余的兩個位置上，化學位移分別為145.9,146.3。該化合物的碳氫譜歸屬見下表。
[0027]脈絡寧酚的1H-NMR(SOOMHz)，13C-NMR(125MHz)的信號全歸屬及相互間相關關系
[0028]
【權利要求】
1.一種新的酚類化合物及其制備方法和用途，其特征在于該化合物化學名為1-(7-甲氧基乙基)-3,4_ 鄰苯二酹(l-(7-methoxy ethyl) _3,4-catechol),化學結構式為:
2.制備權利要求1所述化合物的方法，其特征在于以金陵藥業股份有限公司生產的脈絡寧注射液為原料，通過多次硅膠柱層析，經石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶劑系統或者氯仿-甲醇分離，再經Sephadex LH-20或ODS反相柱層析，甲醇、乙醇或者甲醇-水、乙醇-水不同比例的溶液洗脫而得。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的柱層析用擔體選自硅膠、凝膠、反相硅膠中的一種或幾種。
4.權利要求1所述的化合物與醫學上可接受的藥用輔料組成藥物制劑。
5.根據權利要求4所述的制劑劑型是片劑、膠囊劑、顆粒劑和注射劑。
6.權利要求1所述的化合物在制備治療心腦血管疾病藥物方面的用途。
【文檔編號】A61P29/00GK103694089SQ201310724769
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月25日 優先權日:2013年12月25日
【發明者】王奇志, 湯衛國, 馮煦, 徐向陽, 單宇, 印敏, 陳雨, 王鳴, 管福琴, 趙友誼, 張建華 申請人:江蘇省中國科學院植物研究所