一種次血紅素三肽及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明屬于一種化學(xué)藥物及藥物制劑的【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是一種次血紅素三肽(Deuterohemin-β-Ala-His-Lys，DhHP-3)和衍生物及其新的醫(yī)藥用途，進(jìn)一步講是在抗2型糖尿病藥物制備中的應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)過(guò)優(yōu)選的次血紅素三肽及其衍生物具有降低血糖、膽固醇及甘油三酯活性，作為治療或預(yù)防抗2型糖尿病的藥物，具有細(xì)胞膜通透性好、血漿穩(wěn)定性好、降糖效果好、副作用小等優(yōu)點(diǎn)，具有較好的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】一種次血紅素三肽及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于一種化學(xué)藥物及藥物制劑的【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種應(yīng)用在抗2型糖尿病藥物制備中的次血紅素三肽及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]2型糖尿病(Type2Diabetes Mellitus, T2DM)是一種代謝綜合癥，主要表現(xiàn)為高血糖、胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能障礙等，與I型糖尿病相比，其發(fā)病率高，也較為常見(jiàn)，約占糖尿病患者中90%。隨著2型糖尿病的發(fā)展，患者常會(huì)產(chǎn)生多種形式的并發(fā)癥，而這些并發(fā)癥常是導(dǎo)致死亡的直接因素，嚴(yán)重危害人類的生命和健康。
[0003]近年來(lái) ，三價(jià)鐵卟啉-短肽化合物因具有較好的生物學(xué)活性而較受關(guān)注，該類三價(jià)鐵卟啉短肽化合物均是血紅素或次血紅素上的羧基與肽鏈上的氨基以酰胺鍵相連。中國(guó)專利CN02144902.3公開(kāi)了三價(jià)鐵卟啉及衍生物-短肽化合物及其合成方法；中國(guó)專利CN200610131682.5報(bào)道了三價(jià)鐵卟啉短肽化合物在抗冠心病藥物制備中的用途。
[0004]進(jìn)一步研究結(jié)果表明，這種血紅素或次血紅素與短肽相連構(gòu)成的血紅素-短肽化合物或次血紅素-短肽化合物，由于短肽的氨基酸殘基組成和順序的差異，其空間構(gòu)型、水溶性、過(guò)氧化物酶活性、細(xì)胞膜通透性及生物學(xué)活性也有所不同，甚至差異很大。
[0005]中國(guó)專利CN200910066991.2報(bào)道了一種次血紅素六肽(DhHP_6)化合物在抗腦缺血藥物制備中的用途，該化合物的缺點(diǎn)水溶性低、細(xì)胞膜通透性弱，導(dǎo)致其生物利用度低，并且在血漿中的穩(wěn)定性差；中國(guó)專利CN201210448286.0報(bào)道了三價(jià)鐵卟啉-短肽化合物在抗2型糖尿病藥物制備中的應(yīng)用，這些短肽化合物雖然表現(xiàn)出一定的降糖活性，然而，由于短肽的氨基酸殘基組成和順序的差異，仍然沒(méi)有克服上述的水溶性低、細(xì)胞膜通透性弱的缺點(diǎn)，并且降糖活性弱。
[0006]為了克服現(xiàn)有三價(jià)鐵卟啉-短肽化合物的不足，本發(fā)明提供了一種優(yōu)選的以次血紅素和三肽相連構(gòu)成的次血紅素三肽化合物及其衍生物，以及其在治療2型糖尿病方面的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題，是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種特定的次血紅素三肽Deuterohemin-β -Ala-His-Lys (DhHP-3)及其衍生物，以及在制備預(yù)防及治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明的次血紅素三肽的技術(shù)方案如下:
[0009]一種次血紅素三肽，是次血紅素(用Dh表示)的羧基與三肽分子中丙氨酸殘基上的氨基以酰胺鍵相連，其特征在于，所述的三肽，鏈接方式依次為β-Ala殘基、His殘基、Lys殘基；具體結(jié)構(gòu)式(記為結(jié)構(gòu)式I )是:
【權(quán)利要求】
1.一種次血紅素三肽，是次血紅素的羧基與三肽分子中丙氨酸殘基上的氨基以酰胺鍵相連，其特征在于，所述的三肽，鏈接方式依次為β -Ala殘基、His殘基、Lys殘基；具體結(jié)構(gòu)式是:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的次血紅素三肽，其特征在于，以次血紅素三肽結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)，將單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯的衍生物與次血紅素三肽分子中賴氨酸殘基上的ε-氨基通過(guò)親核取代反應(yīng)以酰胺鍵相連，得到一種單甲氧基聚乙二醇修飾的次血紅素三肽；具體結(jié)構(gòu)式是:.?
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的次血紅素三肽，其特征在于，所述的血紅素三肽，制成載藥聚酯微球；所述的載藥聚酯微球，是用聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乙二醇-聚乳酸-羥基乙酸共聚物對(duì)次血紅素三肽或血紅素三肽衍生物進(jìn)行包埋得到。
4.一種權(quán)利要求1的次血紅素三肽的制備方法，是Fmoc固相合成方法，具體過(guò)程是: ①樹(shù)脂溶脹:稱取2mmolRink-NH2樹(shù)脂，加入50ml 二氯甲烷溶脹2h，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹(shù)脂6次； ②脫保護(hù):加入100ml20%哌啶/二甲基甲酰胺溶液，于室溫震蕩30min，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹(shù)脂6次，用顯色劑檢測(cè)氨基脫保護(hù)情況，當(dāng)樹(shù)脂顆粒全部變?yōu)樗{(lán)色為脫保護(hù)完全； ③連接氨基酸:將Fmoc-β-Ala-OH、PyBOP, HOBT, NMM和Rink-NH2樹(shù)脂按摩爾比為.3:3:3:3:1依次加入反應(yīng)器中，加入50ml 二甲基甲酰胺室溫震蕩lh，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹(shù)脂6次，用顯色劑檢測(cè)氨基酸連接情況，樹(shù)脂顆粒全部變?yōu)橥该鞯狞S色為反應(yīng)完全；重復(fù)步驟②③，連接后續(xù)的Fmoc-His (Trt) -OH和Fmoc-Lys (Trt) -OH ； ④連接血紅素:重復(fù)步驟②，加入4倍過(guò)量的亞鐵血紅素反應(yīng)3小時(shí)；抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹(shù)脂6次； ⑤切割:加入100mL切割試劑；切割試劑組成為95%三氟乙酸、2.5%三異丙基硅烷和.2.5%水，室溫反應(yīng)3h，抽濾，將濾液旋轉(zhuǎn)蒸； ⑥沉淀:將所得殘留液加入300ml乙醚中沉淀，離心，收集，得次血紅素三肽粗品1.7克； ⑦ 純化:得到的粗肽用反相制備液相色譜純化，流動(dòng)相:0.1%三氟乙酸/10~90%乙腈/水梯度洗脫，接收主峰，蒸出溶劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，所得水溶液凍干，得產(chǎn)物次血紅素三肽純品1.5克。
5.一種權(quán)利要求1的次血紅素三肽在制備預(yù)防及治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的次血紅素三肽的應(yīng)用，其特征在于，在次血紅素三肽中，加入粘合劑、崩解劑、填充劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑、增溶劑、溶劑、防腐劑、賦形劑中的一種或幾種，制備成片劑、丸劑、膠囊劑、沖劑、噴霧劑、口服液、混懸液、透皮吸收劑或注射劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的次血紅素三肽的應(yīng)用，其特征在于，次血紅素三肽與二甲雙胍、艾塞那肽、胰島素聯(lián)合用藥。
8.—種權(quán)利要求2的次血紅素三肽衍生物的應(yīng)用，用于制備預(yù)防及治療2型糖尿病藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的次血紅素三肽衍生物的應(yīng)用，其特征在于，在次血紅素三肽衍生物中，加入粘合劑、崩解劑、填充劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑、增溶劑、溶劑、防腐劑、賦形劑中任意一種或幾種，制備成片齊?、丸齊?、膠囊齊?、沖齊?、噴霧劑、口服液、混懸液、透皮吸收劑或注射劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的次血紅素三肽衍生物的應(yīng)用，其特征在于，次血紅素三肽衍生物與二甲雙胍、艾塞那肽、胰島素聯(lián)合用藥。
【文檔編號(hào)】A61K47/48GK103965287SQ201410191151
【公開(kāi)日】2014年8月6日 申請(qǐng)日期:2014年5月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月7日
【發(fā)明者】王麗萍, 修志明, 雷莉妍, 李惟 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)