本發明屬于抗腫瘤藥物領域，具體涉及新型結構的酯類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術：

惡性腫瘤是一種嚴重威脅人類健康的常見病和多發病，人類因惡性腫瘤而引起的死亡率居所有疾病死亡率的第二位，成為僅次于心血管疾病的第二號“殺手”。2013年初，全國腫瘤登記中心發布的一版《2012中國腫瘤登記年報》表明，中國每年新發癌癥病例約312萬，因癌癥死亡人數超過200萬，這意味著每1分鐘有6個人被確診為癌癥。目前全國癌癥發病趨勢嚴峻，發病率與死亡率呈持續上升趨勢。癌癥已成為嚴重威脅人類生命安全和影響人類生活質量的重大問題之一，由此而引發的問題也越來越成為社會經濟發展的負擔。

目前，腫瘤的治療方法主要有手術治療、放射治療和藥物治療(化學治療)，但很大程度上仍是以藥物治療為主。多數常見實體瘤如肺癌、肝癌、結腸癌及胰腺癌等仍缺乏有效藥物，不少抗腫瘤藥物在臨床應用過程中產生耐藥性。隨著社會的科技進步，人類對癌癥的認知已逐漸清晰，對某些癌癥的預防和早期診斷的方法、技術和理論也日趨成熟，但尚不能完全治愈癌癥，只能非常有限地延長癌癥病人的存活時間。因此，新型抗腫瘤藥物的研發勢在必行，不斷開發高效低毒的新型抗腫瘤藥物，成為當前一項具有重要意義的研究工作。

酯類化合物是一類重要的精細化工產品，廣泛應用于藥物、材料、食品、增塑劑、溶劑等化工行業，芳香酯可廣泛用于香料、防腐劑、溶劑、藥物、染料、涂料和材料合成等方面。本申請人所在項目組自主合成了三種具有新型結構的芳香酯化合物，并于2015年在期刊Tetrahedron Letters公開了這幾種芳香酯化合物的制備方法。未對其生物學活性進行評價。

技術實現要素：

本發明的目的是針對上述現狀，提供一種芳香酯類化合物及其藥學上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述芳香酯類化合物為下式之一：

進一步地，本發明提供的芳香酯類化合物藥學上可接受的鹽是常規無機酸鹽，如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽及有機酸鹽，如甲磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽、醋酸鹽、三氟乙酸鹽、苯甲酸鹽。

進一步地，所述的藥物為治療肝癌、肺癌、乳腺癌、耐阿霉素的乳腺癌、胃癌、宮頸癌、神經膠質瘤的藥物。

進一步地，所述的芳香酯類化合物優選為式WY90。

進一步地，所述的藥物為治療耐阿霉素的乳腺癌的藥物。

進一步地，所述的藥物為引起腫瘤細胞凋亡的藥物。

本發明的芳香酯類化合物及其藥學上可接受的鹽作為活性成分與常規藥用載體制成藥物組合物。

本發明的芳香酯類化合物及其藥學上可接受的鹽可通過常規方法制備成各種實用型藥劑，如顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊、注射劑、懸浮劑或乳劑的藥物。

本發明通過對所述的芳香酯類化合物體外抗腫瘤活性評價、引起的腫瘤細胞病變效應及引起的腫瘤細胞凋亡活性評價，證實所述的芳香酯類化合物具有明顯的抑制不同種腫瘤細胞增殖的作用，其中具有最佳抑制效果的化合物WY90的抗腫瘤活性明顯優于對照藥物，對于陽性對照藥物5-Fu和DOX呈現耐藥性的MCF-7/ADR腫瘤細胞同樣呈現了強的抑制效果。

本發明所涉及的芳香酯類化合物的制備，參照文獻Tetrahedron Letters 2015，56，6136–6141的方法，具體以過渡金屬鈀為催化劑，在吡啶的鄰位誘導作用下，在芳環的鄰位用高價碘苯作用，進行芳酰氧基化，得到最終酯化產物。

鑒于該類化合物的制備過程簡單易行，原料價格低廉，易于獲取；系列化合物可以通過構效關系研究來尋求其抗腫瘤作用靶點，為進一步藥物開發提供有價值的導向作用。因此，本發明所述的芳香酯類化合物為新藥篩選提供了基礎。

附圖說明

圖1三種芳香酯類化合物WY90、WYH96、WY99對于不同腫瘤細胞的抑制活性。

圖2芳香酯類化合物WY90濃度依賴的抑制不同腫瘤細胞的活性。

圖3化合物WY90引起的腫瘤細胞病變效應。

圖4 WY90引發腫瘤細胞凋亡的檢測圖。

具體實施方式

通過以下詳細說明結合附圖可以進一步理解本發明的特點和優點。所提供的實施例僅是對本發明方法的說明，而不以任何方式限制本發明揭示的其余內容。

在下文中，如果未特別說明，本發明所用材料和操作方法是本領域公知的。

【實施例1】化合物的體外抗腫瘤活性評價

供試腫瘤細胞：人類肝癌細胞HepG2、人類肺癌細胞A549、人類乳腺癌細胞MCF-7、耐阿霉素的人類乳腺癌細胞(MCF-7/ADR)、人類胃癌細胞SGC-7901、人類宮頸癌細胞Hela、人類神經膠質瘤細胞C6。

細胞培養：GIBCO DMEM培養基，10％胎牛血清和0.01％L-谷氨酰胺配制成培養液。培養的細胞株置于37℃、5％CO₂飽和濕度下常規培養傳代，實驗均用處于對數生長期的細胞。

體外抗腫瘤活性評價(MTT法)：

將以上腫瘤細胞分別鋪板96孔板，在37℃，5％CO₂培養箱培養長滿單層后，棄去細胞培養液，分別加含不同濃度測試化合物的細胞維持液繼續培養，以未經藥物作用的細胞作為空白對照，以抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶(5-Fu)及阿霉素(DOX)為陽性對照，每組設8個復孔，繼續培養48h。顯微鏡目測并分別記錄細胞狀況，每孔加MTT(5mg/mL)20μl繼續培養4h，棄上清液，每孔加150μLDMSO，37℃孵育10min，酶標儀檢測492nm波長處的吸光值(A492)。按以下公式計算平均抑制率：

抑制率＝(細胞對照組平均OD492值-藥物組平均OD492值)/細胞對照組平均OD492值)×100％。

測試結果表明，制備的三種芳香酯類化合物對供試腫瘤細胞表現出不同程度的抑制活性。WY90、WY96、WY99、Dox、5-Fu對于Hela、C6、HepG2、SGC-7901、A549、MCF-7、MCF-7/ADR的半數抑制濃度(IC50)如下表1所示。化合物WY90的抑制效果最佳。WY90與對照藥劑5-Fu相比，對于每種腫瘤細胞都具有更好的抑制效果。除了對于A549細胞的IC50為23μg/mL以外，對于其他腫瘤細胞的IC50都在20μg/mL以內。與對照藥物DOX相比，抑制效果相對較差，但是對于耐阿霉素的人類乳腺癌細胞(MCF-7/ADR)，DOX表現出強的耐藥作用(IC50＞100μg/mL)，陽性對照藥物5-Fu在MCF-7/ADR上同樣有很差的抑制效果(IC50＞100μg/mL)。而WY90未表現出任何耐藥性，仍具有強的抑制效應，半數抑制濃度只需14.5μg/mL。

表1 新型酯類化合物對于不同腫瘤細胞的抑制活性(IC50)

表1中：a IC50<20μg/mL記為+++，IC50為20～50μg/mL記為++，IC50>50μg/mL記為+.

b Dox,阿霉素，陽性對照；c 5-Fu，5-氟尿嘧啶，陽性對照。

40μg/mL化合物WY90、WY96、WY99對于不同腫瘤細胞的抑制活性如圖1所示,WY90在40μg/mL時對于所有腫瘤細胞都表現出極強的抑制效果，除了對于A549細胞的抑制率為73.2％以外，對于腫瘤細胞C6、Hep-G2、SGC-7901、MCF-7、MCF-7/ADR和Hela的抑制率已分別達到87％、95％、98.9％、91.3％、88.2％、96.5％，明顯優于對照藥物5-Fu(對于以上所有腫瘤細胞的抑制效應最大值不超過66.6％)。陽性藥物DOX除了對于MCF-7/ADR無明顯的抑制活性，對于所有腫瘤細胞抑制效果顯著。WY96和WY99抑制效果較差，WY96只對于Hela、HepG2、SGC-7901有較好的抑制活性，抑制率均在50％左右。WY99對MCF-7/ADR、HepG2、SGC-7901和C6腫瘤細胞具有較好的抑制效應，抑制率分別為73.9％、48.0％、61.1％、54.5％。

化合物WY90濃度依賴的抑制不同腫瘤細胞的活性如圖2所示。WY90對所有腫瘤細胞呈現濃度依賴的抑制活性，在足夠濃度的情況下可以達到使腫瘤細胞完全凋亡致死的效果。整體對于HepG2抑制較強，對于A549抑制效果較差。對照藥物5-Fu呈現濃度依賴性不強，整體在5～40μg/mL時，對于腫瘤細胞抑制活性增加不明顯，呈現比較均一的抑制效果。

【實施例2】化合物WY90引起的腫瘤細胞病變效應

我們進一步用顯微鏡記錄了WY90引起的腫瘤細胞病變效應。具體實施方法如下：

將對數生長期的HepG2、MCF-7、MCF-7/ADR、SGC-7901、Hela、C6腫瘤細胞分別鋪板24孔板，在37℃，5％CO2培養箱培養長滿單層后，棄去細胞培養液，分別加含20μg/mL WY90(Hela細胞加10μg/mL)細胞維持液繼續培養，48h時顯微鏡目測并拍照細胞病變情況。

化合物WY90引起的腫瘤細胞病變效應如圖3所示。顯微鏡下未做處理的腫瘤細胞對照生長良好，貼壁牢固，形態飽滿，邊緣界限清晰。20μg/mL WY90處理48h即導致所有的腫瘤細胞凋亡，細胞以不同形式變圓，從培養板脫落。可見WY90對于多種腫瘤細胞具有強的抑制生長效應。

【實施例3】化合物WY90引起的腫瘤細胞凋亡活性評價

本申請人進一步實施了化合物誘導腫瘤細胞凋亡試驗，試驗情況如下：對數生長期的HepG2、Hela細胞鋪板24孔板，長滿單層后分別加入含20μg/mL WY90的細胞維持液孵育，設定不加藥物處理的細胞對照，大約48h后，收集細胞，運用Annexin V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒在流式細胞儀上進行細胞凋亡的檢測。

實驗結果如圖4所示表明，20μg/mL WY90可以強效誘發以上被檢測腫瘤細胞的凋亡。在Hela細胞中，未做處理的陽性對照細胞凋亡率為5％，而WY90處理促使95.6％的細胞發生凋亡。在HepG2細胞中，陽性對照細胞凋亡率為18％，WY90處理則使66％的細胞發生凋亡。

綜上所述，新型酯類化合物WY90具有很好的抑制不同種腫瘤細胞增殖作用，對于陽性對照藥物5-Fu和DOX呈現耐藥作用的MCF-7/ADR細胞，WY90仍然具有同樣強的抑制效果，顯示了大的應用潛力。如果進一步在臨床上進行研究，有希望制備一種有效對抗腫瘤疾病的藥物。