本發明涉及植物提取物的制備技術領域，特別是涉及紅棗與瑪卡的提取物，及其制備方法及應用。

背景技術：

紅棗，又名大棗，多項研究表明紅棗中含有豐富的蛋白質、礦物質、糖類、氨基酸，具有促進免疫、抗衰老、抗腫瘤、清除自由基、抗疲勞、抗輻射、保肝、生殖功能保護和改善等作用。

瑪卡是一種十字花科植物，含有多種均衡合理的營養成份以及多種具有生物活性的次生代謝產物，還含有生物堿、芥子油苷、瑪卡酰胺等功效成分，因此，瑪卡具備多種保健和治療功效與作用，傳統上可用于增強精力、提高生育力、治療更年期綜合癥、風濕癥、抑郁癥、貧血癥，另外，它還具有抗癌和抗白血病等作用。

近年來，越來越多的研究者關注到紅棗與瑪卡的對于提高人體免疫力、平衡人體荷爾蒙分泌及促進生育能力的效用，但對于其起效機理知之甚少。目前市場上紅棗與瑪卡的產品有幾種加工形式，如微粉(粉末，片劑)，冷凍干燥，水醇提取物等。但現有技術提取效率較低，產品有效成分流失嚴重，人體吸收率低，難以發揮這類產品的多種功效。

技術實現要素：

基于此，有必要針對上述問題，提供一種紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，工藝簡單，大大提高了紅棗和瑪卡中氨基酸、生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷等有效成份的提取效率，保留了產品有效成份，紅棗與瑪卡的提取物應用于提高免疫力藥物、促進生育能力藥物中，效果顯著。

一種紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡，制成紅棗與瑪卡的混合粉末；

步驟2：加入乙醇和醋酸混合溶液，超聲回流，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液濃縮至原體積1/3～1/5倍，獲得濃縮粗提液；

步驟4：將步驟3中的濃縮粗提液用樹脂吸附；

步驟5：依次用水、20％乙醇、50％乙醇、80％乙醇、95％乙醇洗脫，收集洗脫液；

步驟6：將洗脫液進行超低溫冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

上述紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，提取物中的有效成份主要為中氨基酸、生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷，相較于以往的提取工藝，本發明制備方法獲得氨基酸、生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷產出率均獲得很大的提高，且工藝簡單，價格低廉，適合大規模工藝生產；所獲得的提取物應用于提高免疫力藥物、促進生育能力藥物中，效果顯著。

在其中一個實施例中，紅棗與瑪卡的混合粉末的質量與乙醇和醋酸混合溶液的體積的比值為1:4～7。

在其中一個實施例中，乙醇和醋酸混合溶液由濃度為40％～70％的乙醇與濃醋酸混合制成。

在其中一個實施例中，濃度為40％～70％的乙醇與濃醋酸的體積比為98～99：1～2。

在其中一個實施例中，步驟2所述乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，每次超聲回流40～60min。

在其中一個實施例中，樹脂為lsi004大孔樹脂。

在其中一個實施例中，樹脂與紅棗與瑪卡的混合粉末的質量比為1～1.5:1。

在其中一個實施例中，步驟5中加入的水、20％乙醇、50％乙醇、80％乙醇、95％乙醇的量分別為水200ml、20％乙醇600～700ml、50％乙醇800～900ml、80％乙醇600～700ml、95％乙醇200～300ml。

在其中一個實施例中，超低溫的溫度為低于-263℃。

一種紅棗與瑪卡的提取物，含有72～75mg/g的氨基酸、4～5mg/g的瑪卡酰胺、5.7～6.0mg/g的總生物堿及5～6mg/g的芥子油苷。

紅棗與瑪卡的提取物的應用，上述制備方法所獲得的紅棗與瑪卡的提取物可應用于提高免疫力或促進生育能力的藥物或食品，如飲料、保健品等。

附圖說明

圖1為實施例1的紅棗與瑪卡的提取物的cck-8測定細胞存活率的測試結果；

圖2為實施例1的紅棗與瑪卡的提取物的atp含量測定的測試結果。

具體實施方式

為了便于理解本發明，下面將對本發明進行更全面的描述。但是，本發明可以以許多不同的形式來實現，并不限于本文所描述的實施例。相反地，提供這些實施例的目的是使對本發明的公開內容的理解更加透徹全面。

除非另有定義，本文所使用的所有的技術和科學術語與屬于本發明的技術領域的技術人員通常理解的含義相同。本文中在本發明的說明書中所使用的術語只是為了描述具體的實施例的目的，不是旨在于限制本發明。

實施例1

本實施例紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡共200g，其中，紅棗與瑪卡的質量比為1:2，洗干凈，瀝干，制成紅棗與瑪卡的混合粉末；需要說明的是，可以將紅棗與瑪卡混合后一起研磨成粉，制成混合粉末，也可以將紅棗制成紅棗粉末，瑪卡制成瑪卡粉末，然后再混合。

步驟2：用濃度為60％的乙醇與冰醋酸以體積比為98：2配制成乙醇和醋酸混合溶液，作為提取液；將紅棗與瑪卡的混合粉末裝入回流裝置，往紅棗與瑪卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液，乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，第一次加入500ml，超聲回流60min，再加入300ml，再超聲回流50min，使有效成份充分溶解入提取液中，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液轉入旋轉蒸發儀，旋轉蒸發濃縮至200ml，獲得濃縮粗提液；

步驟4：稱取lsi004大孔樹脂200g，裝柱，柱體積約200ml，將步驟3中的濃縮粗提液過柱，吸附2小時；

步驟5：依次用200ml水、600ml20％乙醇、800ml50％乙醇、600ml80％乙醇、200ml95％乙醇洗脫步驟4中的lsi004大孔樹脂柱，以100毫升/瓶的量收集洗脫液，則獲得不同組分層析液的24份樣品，水分層析液的樣品2份，20％乙醇分層析液的樣品6份，50％乙醇分層析液的樣品8份，80％乙醇分層析液的樣品6份，95％乙醇分層析液的樣品2份，根據收集次序對應編號為水-1，水-2，20％乙醇-1，20％乙醇-2，20％乙醇-3，20％乙醇-4，20％乙醇-5，20％乙醇-6，50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-4，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，80％乙醇-1，80％乙醇-2，80％乙醇-3，80％乙醇-4，80％乙醇-5，80％乙醇-6，95％乙醇-1，95％乙醇-2。

步驟6：將步驟5中的24份樣品每份分別用旋轉蒸發儀減壓蒸餾濃縮至10ml，獲得濃縮洗脫樣品，然后將濃縮洗脫樣品在低于-263℃的超低溫下進行冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

分別取24份樣品對應的紅棗與瑪卡的提取物進行氨基酸、總生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷的含量測定，及對樣品進行毒性及藥性分析。

紅棗與瑪卡的提取物中氨基酸含量的測定

采用茚三酮比色法測定氨基酸含量，準確吸取200μg/ml氨基酸標準溶液0.0ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，1.2ml，1.5ml，2.0ml，分別置于25ml容量瓶，加入茚三酮及磷酸緩沖液各1ml，混合均勻，水浴加熱15min，取出冷卻至室溫，再搖勻，定容至25ml，獲得7個標準樣品。靜置15min后，在560nm吸收光波長下，以加入0.0ml氨基酸標準溶液的溶液為空白參比液，分別測定7個標準液樣品，以吸光度為縱坐標，氨基酸的濃度為橫坐標，繪制標準曲線，獲得回歸方程為y＝4.1730x-0.1406，r²＝0.9978，并且氨基酸在0.4-4.5mg/ml濃度范圍內與吸光度呈良好的線性關系。

然后以加入0.0ml氨基酸標準溶液的溶液為空白參比液，分別測試步驟5中的24份樣品，獲得氨基酸的平均含量為73.604mg/g，即每1g紅棗與瑪卡的提取物中含有73.604mg氨基酸。

紅棗與瑪卡的提取物中總生物堿含量的測定

本實施例采用溴麝香草酚藍比色法測定紅棗與瑪卡的提取物中總生物堿的含量。

樣品溶液的制備

對應24份樣品，分別取24份0.1g紅棗與瑪卡的提取物，用2％的hc1溶液洗滌溶解3次后合并酸液。然后用10％的氫氧化鈉溶液調節ph至10，采用等體積氯仿萃取3次后合并萃取液，最后蒸發濃縮，定容至10ml，即為樣品溶液。

對照溶液的制備

稱取氧化苦參堿0.1g，溶于氯仿溶液中，定容至100ml，即為對照溶液。

溴麝香草酚藍顯色劑的配制

稱取0.1g溴麝香草酚藍，溶于1000ml磷酸緩沖溶液中。緩沖溶液由

0.2mol/lna2hpo4·12h2o與0.2mol/lnah2po4·2h2o配制而成。

制作標準曲線

精確吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml苦參堿對照溶液，分別加入氯仿至1.0ml，再加入溴麝香草酚藍顯色劑5.0ml、氯仿4.0ml，測定不同濃度的對照溶液的吸光度，以溶液濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標制作標準曲線。

然后后按標準曲線制作方法操作測試樣品溶液，再將測試結果代入回歸方程計算總生物堿的含量，獲得總生物堿的平均含量為5.9725mg/g，即每1g紅棗與瑪卡的提取物中含有5.9725mg總生物堿。

紅棗與瑪卡的提取物中瑪卡酰胺含量測定

本實施例采用hplc測定瑪卡酰胺的含量。

hplc的設置參數如下:

c－18反相柱(250mm×4.6mm，5μm)；

進樣體積10μl；

流速1.0ml/min；

柱溫35℃；

流動相a為水，流動相b為乙腈；

波長210nm進行梯度洗脫，洗脫參數如表1所示。

表1

n－芐基－十六碳酰胺標準曲線繪制

準確配制1mg/ml的n－芐基－十六碳酰胺標準品溶液，再分別配制濃度為1、5、25、50、100、150g/ml的標準品溶液，采用hplc在210nm處測定峰面積，繪制標準曲線。

紅棗與瑪卡的提取物中瑪卡酰胺測定

取1g紅棗與瑪卡的提取物，加入甲醇(色譜級)溶解定容至50ml，7000r/min離心10min，取上層清液，用0.45μm濾膜過濾，采用hplc在210nm處測定峰面積，代入回歸方程得紅棗與瑪卡的提取物中瑪卡酰胺含量。測得平均瑪卡酰胺含量為4.7625mg/g，即每1g紅棗與瑪卡的提取物中含有4.7625mg瑪卡酰胺。

紅棗與瑪卡的提取物中芥子油苷測定

本實施例采用比色法測定芥子油苷的含量。

芥子油苷標準曲線:準確吸取0.50mmol/l黑芥子苷標準溶液0.0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0ml于10ml比色管中補加水到2.0ml，再加入0.15％羧甲基纖維素鈉溶液4.0ml，充分搖勻，加入2ml的pdcl2顯色溶液，蓋上塞子，再充分搖勻并于25℃下放置4h，以水-pdcl2-羧甲基纖維素鈉空白溶液為參比，在540nm波長下測定吸光值，繪制標準曲線。

取1g紅棗與瑪卡的提取物用50％甲醇溶解定容至25ml，然后取其中1.0ml，按標準曲線處理方法于540nm測吸光度，代入回歸方程得紅棗與瑪卡的提取物中芥子油苷含量，獲得芥子油苷的平均含量為5.884mg/g，即每1g紅棗與瑪卡的提取物中含有5.884mg芥子油苷。

cck-8測定細胞存活率

cck-8(cellcountingkit-8)試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析，其基本原理為：cck-8試劑中含有wst-8【2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2h-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物，生成的甲瓚產物的數量與活細胞的數量成正比，因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

用dmem(dulbecco'smodifiedeaglemedium)配置成含9％馬血清，6％牛血清，0.5％青霉素-鏈霉素雙抗溶液的培養液，在96孔板內以每孔1.5萬個pc-12細胞接種，在細胞培養箱中孵育24小時后加入上述24個樣品的紅棗與瑪卡的提取物，紅棗與瑪卡的提取物與培養液比例為1:9；72小時后檢測細胞存活率。

實驗結果如圖1所示，c表示未加入紅棗與瑪卡的提取物的培養液，作為對照組。檢測結果表明，紅棗與瑪卡的提取物毒性小，尤其是由20％乙醇洗脫液對應于樣本20％乙醇-4，20％乙醇-6和50％乙醇洗脫液對應于樣本50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，其不僅無毒性，且具有較明顯的促進細胞生長的作用。

atp含量測定

用dmem配置成含8％馬血清，5.5％牛血清，0.6％青霉素-鏈霉素雙抗溶液的培養液，在96孔板內以每孔15萬個pc-12細胞接種。在細胞培養箱中孵育24小時后加入上述24個樣品的紅棗與瑪卡的提取物，紅棗與瑪卡的提取物與培養液的體積比為1:8；在細胞培養箱中孵育24小時后檢測atp(腺嘌呤核苷三磷酸)和蛋白質濃度。以羅氏(roche)atp檢測試劑盒和bca試劑，利用酶標儀檢測樣品的吸光度值，繪制標準曲線并計算出樣品中atp增加的量。

實驗結果如圖2所示，c表示未加入紅棗與瑪卡的提取物的培養液，作為空白組。檢測結果表明，經含有紅棗與瑪卡的提取物的營養液孵育24小時后的細胞其atp含量超空白組1倍以上，尤其是由20％乙醇對應于樣本20％乙醇-4，20％乙醇-6和50％乙醇提取物對應于樣本50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-5，50％乙醇-7，50％乙醇-8使細胞的atp含量增加約2倍，高于市場上增加能量代謝藥物，該樣本對應的紅棗與瑪卡的提取物有望應用在制備提高免疫力藥物、促進生育能力藥物中。

根據上述cck-8測定細胞存活率及atp含量測定可知，最有藥用價值的紅棗與瑪卡的提取物是由20％乙醇第四、六柱和50％乙醇洗脫液制備得到。

實施例2

本實施例紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡共200g，其中，紅棗與瑪卡的質量比為2:5，洗干凈，瀝干，然后制成紅棗與瑪卡的混合粉末；

步驟2：用濃度為40％的乙醇與冰醋酸以體積比為98：2配制成乙醇和醋酸混合溶液，作為提取液；將紅棗與瑪卡的混合粉末裝入回流裝置，往紅棗與瑪卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液，乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，第一次加入600ml，超聲回流40min，再加入400ml，再超聲回流40min，使有效成份充分溶解入提取液中，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液轉入旋轉蒸發儀，旋轉蒸發濃縮至200ml，獲得濃縮粗提液；

步驟4：稱取lsi004大孔樹脂約200g，裝柱，柱體積約200ml，將步驟3中的濃縮粗提液過柱，吸附2小時；

步驟5：依次用200ml水、700ml20％乙醇、900ml50％乙醇、700ml80％乙醇、300ml95％乙醇洗脫步驟4中的lsi004大孔樹脂柱，以100毫升/瓶的量收集洗脫液，則獲得不同組分層析液的28份樣品，水分層析液的樣品2份，20％乙醇分層析液的樣品7份，50％乙醇分層析液的樣品9份，80％乙醇分層析液的樣品7份，95％乙醇分層析液的樣品3份，根據收集次序對應編號為水-1，水-2，20％乙醇-1，20％乙醇-2，20％乙醇-3，20％乙醇-4，20％乙醇-5，20％乙醇-6，20％乙醇-7，50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-4，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，50％乙醇-9，80％乙醇-1，80％乙醇-2，80％乙醇-3，80％乙醇-4，80％乙醇-5，80％乙醇-6，80％乙醇-7，95％乙醇-1，95％乙醇-2，95％乙醇-3。

步驟6：將步驟5中的28份樣品每份分別用旋轉蒸發儀減壓蒸餾濃縮至10ml，獲得濃縮洗脫樣品，然后將濃縮洗脫樣品在低于-263℃的超低溫下進行冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

實施例3

本實施例紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡100g，其中，紅棗與瑪卡的質量比為8:7，洗干凈，瀝干，然后制成紅棗與瑪卡的混合粉末；

步驟2：用濃度為50％的乙醇與冰醋酸以體積比為99：1配制成乙醇和醋酸混合溶液，作為提取液；將紅棗與瑪卡的混合粉末裝入回流裝置，往紅棗與瑪卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液，乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，第一次加入400ml，超聲回流60min，再加入300ml，再超聲回流60min，使有效成份充分溶解入提取液中，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液轉入旋轉蒸發儀，旋轉蒸發濃縮至原體積200ml，獲得濃縮粗提液；

步驟4：稱取lsi004大孔樹脂約100g，裝柱，柱體積約100ml，將步驟3中的濃縮粗提液過柱，吸附2小時；

步驟5：依次用200ml水、700ml20％乙醇、900ml50％乙醇、700ml80％乙醇、300ml95％乙醇洗脫步驟4中的lsi004大孔樹脂柱，以100毫升/瓶的量收集洗脫液，則獲得不同組分層析液的28份樣品，水分層析液的樣品2份，20％乙醇分層析液的樣品7份，50％乙醇分層析液的樣品9份，80％乙醇分層析液的樣品7份，95％乙醇分層析液的樣品3份，根據收集次序對應編號為水-1，水-2，20％乙醇-1，20％乙醇-2，20％乙醇-3，20％乙醇-4，20％乙醇-5，20％乙醇-6，20％乙醇-7，50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-4，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，50％乙醇-9，80％乙醇-1，80％乙醇-2，80％乙醇-3，80％乙醇-4，80％乙醇-5，80％乙醇-6，80％乙醇-7，95％乙醇-1，95％乙醇-2，95％乙醇-3。

步驟6：將步驟5中的28份樣品每份分別用旋轉蒸發儀減壓蒸餾濃縮至10ml，獲得濃縮洗脫樣品，然后將濃縮洗脫樣品在低于-263℃的超低溫下進行冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

實施例4

本實施例紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡150g，其中，紅棗與瑪卡的質量比為7:9，洗干凈，瀝干，然后制成紅棗與瑪卡的混合粉末；

步驟2：用濃度為55％的乙醇與冰醋酸以體積比為98：1配制成乙醇和醋酸混合溶液，作為提取液；將紅棗與瑪卡的混合粉末裝入回流裝置，往紅棗與瑪卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液，乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，第一次加入500ml，超聲回流50min，再加入300ml，再超聲回流50min，使有效成份充分溶解入提取液中，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液轉入旋轉蒸發儀，旋轉蒸發濃縮至原體積200ml，獲得濃縮粗提液；

步驟4：稱取lsi004大孔樹脂約150g，裝柱，柱體積約150ml，將步驟3中的濃縮粗提液過柱，吸附2小時；

步驟5：依次用200ml水、600ml20％乙醇、800ml50％乙醇、600ml80％乙醇、200ml95％乙醇洗脫步驟4中的lsi004大孔樹脂柱，以100毫升/瓶的量收集洗脫液，則獲得不同組分層析液的24份樣品，水分層析液的樣品2份，20％乙醇分層析液的樣品6份，50％乙醇分層析液的樣品8份，80％乙醇分層析液的樣品6份，95％乙醇分層析液的樣品2份，根據收集次序對應編號為水-1，水-2，20％乙醇-1，20％乙醇-2，20％乙醇-3，20％乙醇-4，20％乙醇-5，20％乙醇-6，50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-4，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，80％乙醇-1，80％乙醇-2，80％乙醇-3，80％乙醇-4，80％乙醇-5，80％乙醇-6，95％乙醇-1，95％乙醇-2。

步驟6：將步驟5中的24份樣品每份分別用旋轉蒸發儀減壓蒸餾濃縮至10ml，獲得濃縮洗脫樣品，然后將濃縮洗脫樣品在低于-263℃的超低溫下進行冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

實施例5

本實施例紅棗與瑪卡的提取物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：稱取紅棗和瑪卡100g，其中，紅棗與瑪卡的質量比為2:1，洗干凈，瀝干，然后制成紅棗與瑪卡的混合粉末；

步驟2：用濃度為70％的乙醇與冰醋酸以體積比為99：1配制成乙醇和醋酸混合溶液，作為提取液；將紅棗與瑪卡的混合粉末裝入回流裝置，往紅棗與瑪卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液，乙醇和醋酸混合溶液分兩次加入，第一次加入600ml，超聲回流60min，再加入300ml，再超聲回流60min，使有效成份充分溶解入提取液中，獲得粗提液；

步驟3：將步驟2中的粗提液轉入旋轉蒸發儀，旋轉蒸發濃縮至原體積200ml，獲得濃縮粗提液；

步驟4：稱取lsi004大孔樹脂約100g，裝柱，柱體積約100ml，將步驟3中的濃縮粗提液過柱，吸附2小時；

步驟5：依次用200ml水、600ml20％乙醇、800ml50％乙醇、600ml80％乙醇、200ml95％乙醇洗脫步驟4中的lsi004大孔樹脂柱，以100毫升/瓶的量收集洗脫液，則獲得不同組分層析液的24份樣品，水分層析液的樣品2份，20％乙醇分層析液的樣品6份，50％乙醇分層析液的樣品8份，80％乙醇分層析液的樣品6份，95％乙醇分層析液的樣品2份，根據收集次序對應編號為水-1，水-2，20％乙醇-1，20％乙醇-2，20％乙醇-3，20％乙醇-4，20％乙醇-5，20％乙醇-6，50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-4，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，80％乙醇-1，80％乙醇-2，80％乙醇-3，80％乙醇-4，80％乙醇-5，80％乙醇-6，95％乙醇-1，95％乙醇-2。

步驟6：將步驟5中的24份樣品每份分別用旋轉蒸發儀減壓蒸餾濃縮至10ml，獲得濃縮洗脫樣品，然后將濃縮洗脫樣品在低于-263℃的超低溫下進行冷凍干燥處理，獲得紅棗與瑪卡的提取物。

按照實施例1中所述的氨基酸、總生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷的含量測定方法，分別測定實施例2至5所獲得紅棗與瑪卡的提取物中的氨基酸、總生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷的平均含量，并取一例采用傳統的制備方法制備的紅棗與瑪卡的提取物中的氨基酸、總生物堿、瑪卡酰胺及芥子油苷的平均含量，測定結果如表2。

表2

從表2的測試結果可知，相較傳統方法制備的紅棗與瑪卡的提取物，本發明的實施例1至5所制備的紅棗與瑪卡的提取物中的有效成份氨基酸、總生物堿、瑪卡酰胺基芥子油苷的平均含量均獲得很大提高，分別是傳統方法的將近1.5倍，有效提高原材料的利用率及生產效率，且工藝簡單，易于推廣，適合大規模工藝生產。

按照實施例1的cck-8測定細胞存活率及atp含量測定方法分別測定實施例2至5的毒性和藥性，測試結果與實施例1的結論相同，即紅棗與瑪卡的提取物的毒性小，尤其是由20％乙醇洗脫液對應于樣本20％乙醇-4，20％乙醇-6和50％乙醇洗脫液對應于樣本50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-5，50％乙醇-6，50％乙醇-7，50％乙醇-8，其不僅無毒性，且具有較明顯的促進細胞生長的作用。而由20％乙醇對應于樣本20％乙醇-4，20％乙醇-6和50％乙醇提取物對應于樣本50％乙醇-1，50％乙醇-2，50％乙醇-3，50％乙醇-5，50％乙醇-7，50％乙醇-8使細胞的atp含量增加約2倍，對提高免疫力、促進生育能力有一定的作用。總之，最有藥用價值的紅棗與瑪卡的提取物由20％乙醇第四、六柱和50％乙醇洗脫液制備獲得，可應用于提高免疫力、促進生育能力領域的藥物或食品。

以上所述實施例的各技術特征可以進行任意的組合，為使描述簡潔，未對上述實施例中的各個技術特征所有可能的組合都進行描述，然而，只要這些技術特征的組合不存在矛盾，都應當認為是本說明書記載的范圍。

以上所述實施例僅表達了本發明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。